杜宾-约翰逊综合征；Dubin-Johnson 综合征；ATP-BINDING CASSETTE, 亚族C，成员2
ABCC2是一种190 kD整合膜糖蛋白，主要在肝细胞的小管（顶）膜中表达。它属于ATP结合框转运蛋白超家族，可将内源性和外源性阴离子缀合物从肝细胞转运至胆汁。ABCC2还参与癌细胞对化学治疗药物的抗性（Mor-Cohen等人，2001年的综述）。
细胞遗传学位置：10q24.2
基因组坐标（GRCh38）：10：99,782,601-99,853,740
| Location | Phenotype | Phenotype MIM number |
Inheritance | Phenotype mapping key |
|---|---|---|---|---|
| 10q24.2 | Dubin-Johnson syndrome | 237500 | AR | 3 |
▼ 克隆和表达
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Paulusma等（1996年）使用Dubin-Johnson综合征（DJS; 237500）的动物模型TR-大鼠阐明了小管多特异性有机阴离子转运蛋白（cMOAT），该介质介导了许多有机阴离子的肝胆排泄。从与人类多药耐药蛋白（MRP; 158343）类似的大鼠角膜cDNA的研究中，他们提供了证据表明MRP和cMOAT分别在肝细胞的基底外侧和小管（顶端）部分表达，并且cMOAT而不是MRP参与胆汁有机阴离子转移。他们还表明，这2种蛋白质由2种不同的基因编码。在TR-大鼠中，cmoat基因中的单个核苷酸缺失导致mRNA减少和蛋白缺失。
▼ 基因功能
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Evers等（1998）将cMOAT称为多药耐药相关蛋白2（MRP2），研究了其在MDCK细胞中在极化肾脏中的药物输出活性。与MRP1（158343），cMOAT主要在非极化细胞的细胞内发现，这表明cMOAT需要极化细胞进行质膜路由。他们发现，当肾脏上皮的MDCK细胞单层生长时，cMOAT定位在心尖质膜上。他们的研究表明，cMOAT会引起有机阴离子的转移，包括以前未显示过被有机阴离子转运蛋白转移的底物。转运只能被已知能阻断MRP1的化合物有效地抑制。他们还表明，cMOAT导致抗癌药物长春碱向细胞单层的顶侧转运。他们得出结论，cMOAT是一种5-prime-腺苷三磷酸结合框转运蛋白，可能参与哺乳动物细胞的耐药性。
使用微阵列分析和定量RT-PCR，Xu等（2012）发现microRNA-297（MIR297; 615520）的表达在耐化疗的人结肠直肠癌细胞系中比其亲本细胞系下调。MIR297的下调与推定靶标MRP2的表达成反比。定量RT-PCR和蛋白质印迹分析表明，在人类大肠癌的临床分期中，MIR297和MRP2的表达分别逐渐减少和增加。报告基因检测证实MRP2是MIR297的直接靶标。MIR297模拟物的表达提高了细胞对抗癌药的敏感性，并在注射入裸鼠后体外和体内诱导了大肠癌细胞的凋亡。
▼ 基因结构
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Toh等（1999）确定了人MRP2 / CMOAT基因的外显子/内含子结构。他们发现人类基因包含32个外显子，跨越200 kb或更多的基因组DNA。
▼ 测绘
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Taniguchi等人通过荧光原位杂交（FISH）（1996）将人类CMOAT基因定位到10q24。同样由FISH 撰写的van Kuijck等人（1997）将CMOAT基因定位于人10q24和小鼠19D2。Gopalan等（1998）同样将cmoat基因定位于小鼠19号染色体。
▼ 分子遗传学
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Zimniak（1993）提出，Dubin-Johnson综合征的缺陷可能存在于CMOAT基因中。Dubin-Johnson综合征是一种常染色体隐性遗传疾病，其特征为共轭性高胆红素血症，尿卟啉同分异构体I排泄增加，肝细胞中黑色素样色素沉积以及硫代溴酞的保留时间延长，但肝功能正常。与在高胆红素血症的两种大鼠模型中同源cmoat基因缺陷的发现一致（Paulusma等，1996；Ito等，1997），Wada等（1998）报道了DJS患者在CMOAT基因的主动转运家族签名区域中有2个缺失和一个错义突变。
Kajihara等人在一名63岁的日本男子中患有DJS，他是由表兄弟姐妹的父母所生（1998年）确定纯合性的ABCC2基因剪接位点突变（601107.0006）。
Toh等（1999）确定的3个突变，其中2个是新的，在DJS患者MRP2 / CMOAT基因（601107.0001和601107.0003 - 601107.0004分别）。
到那时为止，鉴定出的所有突变都在胞质结构域中，其中包括2个ATP结合框和接头区域，或在相邻的假定跨膜结构域中。
Mor-Cohen等（2001年）分析了来自24个无关家庭的35名以色列DJS患者的ABCC2基因，其中大多数是先前由Shani等确定的（1970年），至今已追踪了三十多年，包括来自13个伊朗犹太家庭的22名DJS患者，来自4个摩洛哥犹太家庭的5名患者，来自摩洛哥和伊朗混合家庭的2名患者，来自阿什肯纳兹犹太人的3名患者以及来自土耳其，库尔德人的3名患者和阿富汗犹太人血统。所有22名伊朗犹太患者都是ABCC2中I1173F突变纯合子（601107.0007），所有5名摩洛哥犹太患者都是R1150H突变纯合子（601107.0008）。两种突变对于那些特定人群都是独特的。
在有新生儿DJS的2个兄弟中，Pacifico等人（2010）确定了ABCC2中R768W突变（601107.0001）和无意义突变（R1066X; 601107.0009）的化合物杂合性。尽管这两个突变的复合杂合性是新颖的，但以前在成年患者中都发现了这两个突变。
▼ 等位基因变异体（9个示例）：
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.0001杜宾-约翰逊综合症
ABCC2，ARG768TRP
Wada等人在3名患有Dubin-Johnson综合征（DJS; 237500）的患者中，其中2名是兄弟（1998）证明了在CMOAT基因的核苷酸2302的C到T转换，导致arg768到trp（R768W）替换。该突变是重症患者的基因组DNA中的纯合子，在两个兄弟及其父亲中是杂合子。DJS的2个兄弟中的第二个变化是2272del168（601107.0002），在PCR产物中从2272到2439缺失了168个核苷酸。因此，兄弟是复合杂合子，而通过尿卟啉I排泄被诊断为携带者的父母对于这些突变中的一个或另一个是杂合的。一个姐妹都没有突变。
Toh等人在一位81岁的日本男子中患有DJS（1999）发现R768W突变的纯合性。该男子与Wada等人研究的患者无关（1998）。
Materna和Lage（2003）在一位女性DJS高加索（土耳其）患者中鉴定出纯合状态下的R768W突变。
在有新生儿DJS的2个兄弟中，Pacifico等人（2010）在ABCC2基因的第23外显子中鉴定了R768W的化合物杂合性和3196C-T过渡，导致arg1066-to-ter（R1066X; 601107.0009）取代，预计将导致该蛋白缺少4个跨膜结构域，并且完成第二个ATP卡匣。
.0002杜宾-约翰逊综合症
ABCC2，168-BP DEL，NT2272
对于在ABCC2基因的168-bp缺失（2272del168），将其在2个兄弟与杜宾-约翰逊综合征（DJS;实测值的讨论237500）由Wada等人（1998），参见601107.0001。
.0003杜宾-约翰逊综合症
ABCC2，147-BP DEL，NT1669
Wada等人在患有Dubin-Johnson综合征（DJS; 237500）的患者中（1998）发现了明显的纯合性为1669del147突变，在PCR产物中从1669到1815删除了147个核苷酸。基因组序列表明缺失连接在外显子-内含子边界。在从患者中分离的基因组DNA中，在相应外显子的3个主要边界（剪接供体位点）之后，从T到A转换了2个碱基。
.0004杜宾-约翰逊综合症
ABCC2，IVS18DS，TC，+ 2
Toh等人在一个日本的杜宾-约翰逊综合征（DJS; 237500）隔离家庭中（1999）发现受影响的个体是外显子18的2439 + 2T-C过渡2个碱基的3个引物纯合子。这涉及保守的剪接供体位点，并且预计会导致cDNA中2722-2439位的168个核苷酸的缺失。 。
.0005杜宾-约翰逊综合症
ABCC2，GLN1382ARG
Toh等人在患有Dubin-Johnson综合征（DJS; 237500）的患者中（1999年）确定了CMOAT基因2个突变的化合物杂合性：2439 + 2T-C（601107.0004）和核苷酸4145的A到G过渡，导致gln1382到arg（Q1382R）取代。
.0006杜宾-约翰逊综合症
ABCC2、67-BP DEL，IVSDS，TC，+ 2
Kajihara等（1998）确定了在CMOAT基因的外显子-内含子连接处的一个单核苷酸取代，其产生具有67bp外显子缺失的肝脏cDNA。外显子跳过是由于3-prime侧翼内含子的剪接供体位点的GT-GC改变。该患者是一名63岁的日本男子，是表弟的父母的后代。他从小就患有黄疸病。根据慢性共轭高胆红素血症，在90分钟静脉注射溴磺酞酞后清除清除和继发性上升，诊断出杜宾-约翰逊综合症（DJS; 237500）。肝组织从宏观上看是黑色的，并且显示出色素沉着的肝实质细胞。
.0007杜宾-约翰逊综合症
ABCC2，ILE1173PHE
Mor-Cohen等在13个无关家庭中的22名伊朗犹太人患有杜宾-约翰逊综合症（DJS; 237500）（2001年）筛选了MRP2基因的所有32个外显子和邻近区域，并鉴定了外显子25中3517A-T颠倒的纯合性，预测了ile1173-to-phe（I1173F）取代。使用4种基因内二态性和单倍型分析显示了特定的创始人效应。通过定点诱变将突变引入MRP2表达载体，转染到HEK293细胞中，并通过荧光转运分析，免疫印迹和免疫细胞化学进行分析。研究表明该突变削弱了MRP2的转运活性。免疫印迹分析和免疫细胞化学分析表明，该突变体的表达水平低，并且错位到了转染细胞的内质网中。
.0008杜宾-约翰逊综合征
ABCC2，ARG1150HIS
Mor-Cohen等在来自4个无关家庭的5名摩洛哥人患有Dubin-Johnson综合征（DJS; 237500）中（2001年）筛选了MRP2基因的所有32个外显子和邻近区域，并鉴定了25号外显子的3449G-A过渡纯合子，预测了arg1150-his（R1150H）取代。突变削弱了MRP2的转运活性。突变体MRP2正确成熟并位于转染细胞的质膜上。
.0009杜宾-约翰逊综合症
ABCC2，ARG1066TER
为了讨论ABCC2基因中的arg1066-to-ter（R1066X）突变，该突变在Pacifico等人的新生儿型Dubin-Johnson综合征（DJS; 237500）患者的复合杂合状态下发现（2010），请参阅601107.0001。
