神经丝蛋白、轻多肽； NEFL

神经丝蛋白，轻链； NFL
NF68

HGNC 批准的基因符号：NEFL

细胞遗传学位置：8p21.2 基因组坐标（GRCh38）：8:24,950,955-24,956,612（来自 NCBI）

▼ 说明

NEFL 基因编码神经丝轻链多肽，这是一种形成 IV 型中间丝杂聚物的子单元，是神经元细胞骨架的主要组成部分（Agrawal 等人总结，2014）。

细胞质中间丝（IF） 根据其生化特性、免疫特异性和组织分布可分为 5 个亚类：上皮细胞中的角蛋白（139350, 148030） 丝、间质来源细胞中的波形蛋白（193060） 丝、结蛋白（125660）肌肉细胞中的神经胶质丝、星形胶质细胞中的神经胶质丝和神经元中的神经丝。不同类型的中间丝蛋白具有共同的结构特征。神经丝由 3 种神经元特异性蛋白质组成，在 SDS 凝胶电泳上表观分子量分别为 68 kD（NFL）、125 kD（NFM） 和 200 kD（NFH）（Julien 等人总结，1987）。

▼ 克隆与表达

朱利安等人（1987） 使用 NFL cDNA 探针分离出人类 NFL 基因的基因组副本。转染小鼠L细胞后，克隆的基因被转录成2个大约2.6和4.3 kb长的mRNA。不同的序列数据表明，中间丝蛋白含有类似的保守长度的α-螺旋结构域，能够形成卷曲螺旋。

▼ 基因结构

波形蛋白、结蛋白和神经胶质原纤维酸性蛋白基因各自在相同位置包含8个内含子，其中6个内含子位于编码α螺旋序列的区域内。相关性较不密切的角蛋白基因中的大多数内含子出现在相似或相同的位置。 NFL 基因是由 Julien 等人发现的（1987）有一个意想不到的内含子-外显子组织，因为它在中间丝基因家族其他成员中发现的位置完全缺乏内含子。它仅包含 3 个内含子。讨论了可能的进化解释。李斯等人（1988） 分析了 NFH 子单元的结构。他们得出的结论是，神经 IF 谱系与非神经 IF 谱系的分歧可能涉及祖先 IF 基因的复制，而不是 RNA 介导的转座。

▼ 测绘

Hurst 等人通过对来自杂交细胞组的 DNA 进行 Southern 印迹分析和原位杂交（1987） 将 NEFL 基因分配给 8p21。萨默维尔等人（1988） 还通过原位杂交将这个基因（他们将其标记为 NF68）分配给 8p21。此外，他们还在染色体2的着丝粒区域和染色体7的长臂上发现了二次杂交位点，这些位点是其他中间丝的假定位点。 NFL 的相应基因以及中分子质量神经丝蛋白的基因似乎位于小鼠的染色体 14 上（Levy 等，1987）。

▼ 基因功能

普雷维塔利等人（2003） 在髓鞘形成雪旺细胞的所有细胞质区室以及非髓鞘形成雪旺细胞以及感觉和运动神经元的细胞质中检测到 MTMR2（603557）。相比之下，MTMR2 在雪旺细胞和运动神经元的细胞核中检测到，但在感觉神经元的细胞核中没有检测到。在使用胎儿大脑和周围神经文库的酵母 2 杂交筛选中，NFL 与 MTMR2 相互作用，并发现 NFL 与雪旺细胞和神经元中的 MTMR2 相互作用。

▼ 分子遗传学

腓骨肌萎缩症 2E

在一个患有轴突型腓骨肌萎缩症（CMT2E; 607684） 的俄罗斯大家族中，Mersiyanova 等人（2000） 鉴定了 NEFL 基因中的 gln333 到 pro 的突变（Q333P; 162280.0001）。

Brownlees 等人使用瞬时表达系统（2002） 证明 pro8-to-arg（P8R; 162280.0003） 和 Q333P（162280.0001） 突变 NEFL 蛋白会导致 CMT2E，破坏培养的哺乳动物细胞和神经元中的神经丝组装和神经丝轴突转移。 CMT 突变神经丝也扰乱了神经元中线粒体的定位。神经丝累积是多种神经退行性疾病的病理特征，包括肌萎缩侧索硬化症（ALS；105400）、阿尔茨海默病（104300）、帕金森病（168600）、路易体痴呆（127750） 和糖尿病神经病变（参见 603933）。作者得出的结论是，他们的结果表明，异常的神经丝组装和转移可诱发神经系统疾病，并进一步暗示人类神经退行性疾病的发病机制中存在缺陷的神经丝代谢。

腓骨肌萎缩症 1F 型

乔丹诺娃等人（2003） 在常染色体显性脱髓鞘 CMT1F（607734） 患者的 NEFL 基因中发现了 6 个错义突变和一个 3 bp 缺失（162280.0004）。其中三个突变发生在密码子 8 中（参见例如 162280.0003）。山本等人（2004） 提出的证据表明 NEFL 基因中的 3 bp 缺失是一种多态性变异，而不是日本的致病突变。

腓骨肌萎缩症，显性中间 G

一个 3 代德国家庭的 4 名受影响成员患有显性中间型腓骨肌萎缩症 G（CMTDIG；617882）。祖赫纳等人（2004） 鉴定了 NEFL 基因中的杂合错义突变（E396K; 162280.0010）。该突变是通过对 NEFL 基因进行直接测序发现的，与该家族中的疾病分离。两名无症状的家庭成员也携带该突变：他们当时 21 ，可能表明与年龄相关的不完全外显率。没有进行变体的功能研究和患者细胞的研究。

埃尔布拉赫特等人（2014） 在一个多代家庭的 8 名从婴儿期或幼儿期开始患有 CMTDIG 的成员以及一名 50 岁时患有 CMTDIG 的无关患者（患者 9）中发现了 NEFL 基因 E396K 突变的杂合性；他没有 CMT 家族史。具有相同突变的患者之间表型的差异表明存在额外的遗传修饰因素，并拓宽了与该突变相关的表型谱。没有对该变体进行功能研究。

贝尔恰诺等人（2015） 在西班牙 CMTDIG 家族的 4 名受影响成员中鉴定出 NEFL 基因 E396K 突变的杂合性。该变异是通过候选疾病基因的外显子组测序发现的，并通过桑格测序证实并与疾病分离。没有进行变体的功能研究和患者细胞的研究。

Berciano 等人在一名西班牙妇女和她的 CMTDIG 儿子中（2016） 鉴定了 NEFL 基因中的杂合错义突变（N98S; 162280.0011）。该突变是通过外显子组测序发现的。没有对该变体进行功能研究。

NEFL 聚合研究

林等人（2005） 报道 p190RhoGEF（612790） 是一种 RNA 结合蛋白，与 NEFL mRNA 中的不稳定元件结合，参与 NEFL 蛋白的聚集，并与运动神经元变性的发病机制有关。 190RhoGEF 蛋白与未组装的 NEFL 蛋白共聚，并且该共聚与神经元细胞中亲本 NEFL mRNA 的下调相关。中型神经丝（NFM; 162250） 的共表达增加了 NF 组装并减少了 RNA 触发的聚集以及 NEFL 蛋白溶解度的损失。 siRNA诱导的p190RhoGEF下调不仅减少了NEFL和NFM的聚集并促进其组装，而且还导致转染细胞中聚集的逆转和NF组装的恢复。对运动神经元疾病转基因模型的检查表明，在表达未翻译的 NEFL RNA 或 G93A 突变 SOD1（147450） 转基因的小鼠的退化运动神经元中，出现了 p190RhoGEF 和 NEFL 的显着聚集以及 NEFL 表达的下调。此外，p190RhoGEF 和 NEFL 的聚集作为症状前 G93A 突变 SOD1 转基因小鼠的早期病理变化出现。林等人（2005） 得出结论，p190RhoGEF 参与 NEFL 蛋白的聚集，并提出 p190RhoGEF 和 NEFL 的聚集可能是运动神经元疾病中触发神经毒性的上游事件。

雷贝洛等人（2016） 鉴定 NEFL 是一种可能因终止突变而导致异常和有毒蛋白质聚集的基因，即一种突变，将 3-prime 终止密码子框架延伸到正常终止密码子之外，从而导致添加神秘的淀粉样蛋白生成元件（CAE）。表达此类移码 NEFL 突变的培养神经元细胞在细胞质和圆形细胞中显示出明显的毒性蛋白聚集，并且缺乏轴突样投射，表明它们具有致病性，因此可能导致神经系统疾病。 NEFH 基因（162230） 中的移码突变也观察到了类似的结果。

▼ 基因型/表型相关性

佩雷斯-奥勒等人（2004） 分析了 5 个 NFL 突变对中间丝（IF） 的组装和细胞内分布的影响，并将结果与​​之前获得的其他 NFL 突变的结果进行了比较。尽管所有 NFL 突变体都会影响 IF 网络的形成，但根据突变的不同，对 IF 组装的影响也不同。对于所有 CMT 相关的 NFL 突变，观察到突变体 NFL 子单元的转移缺陷，但这种缺陷的特征也取决于特定的突变。作者得出的结论是，NF 的组装和转移缺陷对于当时研究的所有 NFL 突变体来说都是常见的，但缺陷的确切性质似乎与每种突变体基因型相关。

Miltenberger-Miltenyi 等人对已发表的 NEFL 突变患者研究进行了回顾（2007） 的结论是不存在明显的基因型/表型相关性。然而，作者指出，NEFL 头部结构域的突变可能比线圈 2B 结构域的突变导致更严重的神经传导速度减慢。

▼ 动物模型

Zhu 等人在胚胎干细胞中使用同源重组（1997） 培育出带有 NFL 基因定向破坏的小鼠。 NFL 蛋白的缺失导致大脑和坐骨神经中 Nfm 和 Nfh 蛋白的水平急剧下降，而其他细胞骨架蛋白（例如微管蛋白和 GAP43（162060））的水平却有所增加。尽管缺乏神经丝和轴突萎缩，NFL 基因敲除小鼠发育正常并且没有表现出任何明显的表型。然而，在杂合子和纯合子 NFL 突变小鼠中，Zhu 等人（1997）观察到周围神经挤压损伤后有髓轴突的正常再生减少。 Zhu 等人使用电子显微镜观察挤压部位远端的神经节段（1997） 检测到丰富的轴突芽簇，这表明 NFL 无效小鼠的再生纤维成熟迟缓。长期分析表明，神经丝缺陷的轴突具有再生和髓鞘再生的能力，尽管速度较慢。朱等人（1997） 得出结论，神经丝在再生有髓鞘轴突的成熟中发挥作用。

Hirokawa 和 Takeda（1998） 回顾了基因靶向研究为了解每种神经丝成分蛋白在神经丝形成和轴突口径确定中的作用所做的贡献。

Nguyen 等人使用免疫组织化学和免疫印迹实验（2001） 在 SOD1 基因中有 gly37-to arg（G37R） 突变的转基因小鼠的脊髓中检测到与异常升高的 p25/p35（见 603460）比率和 Cdk5（123831）活性相关的神经丝蛋白的过度磷酸化（ 147450.0001），肌萎缩侧索硬化症（ALS；105400）的小鼠模型。阮等人（2001） 将 Sod1 突变体转基因培育到神经丝突变体背景上，并观察到 ​​NFL 的缺失会引起运动神经元核周中未组装的神经丝子单元的积累。 Nguyen 等人使用双免疫荧光显微镜（2001） 证实在神经丝突变背景下，Cdk5 和 p25 与 SOD1（G37R） 小鼠的核周神经丝积累共定位。免疫印迹显示 SOD1（G37R） 小鼠中核周神经丝积聚的发生与微管相关蛋白 tau（157140）（另一种 p25/Cdk5 底物）磷酸化的减少有关。 NFL子单元的缺失延长了SOD1（G37R）小鼠的平均寿命。阮等人（2001） 假设运动神经元中神经丝蛋白的核周积聚可能通过充当 Cdk5 活性的磷酸化池来减轻 Sod1 突变小鼠的 ALS 发病机制，从而减少 tau 和其他神经元底物的有害过度磷酸化。

阿德博拉等人（2015） 发现 Nefl P8R（162280.0003） 突变的杂合或纯合敲入小鼠在行为上与野生型动物相似。作者将表型的缺乏归因于可能的背景修饰基因。相比之下，Nefl N98S（162280.0011） 突变杂合的敲入小鼠早在 1 个月大时就出现震颤和后肢紧握表型。出生后7天，大脑皮层和脑桥中的神经元突起就出现异常，并且这些动物的脊髓神经元的细胞体和近端轴突中存在多个包涵体。

▼ 等位基因变异体（11 个选定示例）：

.0001 腓骨肌萎缩症，轴突，2E 型
NEFL、GLN333PRO

在一个患有常染色体显性轴突型夏科-马里-图思病（CMT2E; 607684） 的莫尔多瓦（俄罗斯）大家族中，Mersiyanova 等人（2000） 发现了与染色体 8p21 的连锁，并在 NEFL 基因的第一个外显子中发现了 998A-C 颠换，导致保守区域出现 gln333-to-pro（Q333P） 突变。在 180 个正常染色体中未发现这种改变。在 20 名不相关的 CMT2 患者或其他 26 名患有未确定形式的 CMT 的患者中，未发现该基因突变。作者建议将这种疾病命名为 CMT2E。

在培养的小鼠运动神经元中，Zhai 等人（2007）发现Q333P-和P8R（162280.0003）-突变体NEFL的表达导致进行性退化和神经元活力丧失。退化的运动神经元表现出与神经丝网络破坏和 NEFL 蛋白聚集相关的神经炎过程的碎片和丧失。突变型 NEFL 与野生型 HSPB1（602195） 的共表达可减少突变型 NEFL 的聚集，诱导突变型 NEFL 聚集的逆转，并减少突变型 NEFL 诱导的运动神经元活力丧失。同样，导致 CMT2F（606595） 的突变体 HSPB1（S135F；602195.0001） 的表达也会导致运动神经元进行性变性，并导致神经丝网络破坏和 NEFL 蛋白聚集。发现这 2 种蛋白质结合在一起，并且 S135F 突变体 HSPB1 具有主导作用。翟等人（2007） 认为，NEFL 聚集导致的神经丝网络破坏是 CMT2E 和 CMT2F 运动神经元变性的常见触发事件。

.0002 腓骨肌萎缩症，轴突，2E 型
NEFL、PRO22SER

乔治欧等人（2002） 描述了一个患有常染色体显性 2E 型腓骨肌萎缩症（CMT2E; 607684） 的斯洛文尼亚 5 代大家族，其中所有 10 名受影响成员的 NEFL 基因外显子 1 中都有 64C-T 转变，导致 pro22 -to-ser（P22S） 替换。大多数患者的疾病发作是在生命的最初十年。由于缓慢进展的远端无力和下肢萎缩，出现的症状是行走或跑步困难。通常存在步进步态、高弓足和锤状趾。发病后 20 年内，三分之二的患者出现上肢受累，导致爪形手。所有患者在发病后 20 至 30 年内均可下床活动。

法布里齐等人（2004） 在一个患有 CMT2E 的意大利家庭的受影响成员中发现了 P22S 突变。腓肠神经活检显示大的有髓轴突缺失，以及一些包裹在薄髓鞘中的肿胀轴突。神经丝以随机方向分组。

佐佐木等人（2006） 指出 P22S 突变废除了 NEFL 头域中的磷酸化序列。在分离的人类细胞和大鼠皮质神经元培养物中进行的体外功能表达研究表明，突变的 P22S 或 P22T NEFL 蛋白形成大的聚集体并组装成比 10 nm 细丝更细的短曲丝。这些线在其末端彼此相连并纠缠成大的聚集体。结构扰动发生在低聚物形成过程中。进一步的研究表明，pro22 突变消除了 CDK5（123831） 对残基 thr21 的磷酸化，而 CDK5 通常抑制丝组装。然而，突变蛋白能够被蛋白激酶 A 磷酸化，程度与野生型相同，从而抑制皮质神经元中聚集体的形成。结果表明，pro22 CMT 突变通过破坏适当的寡聚物形成来诱导异常的丝聚集体，但证明这些聚集体的形成可以通过磷酸化来减轻。

.0003 腓骨肌萎缩症，轴突，2E 型
包括 1F 型腓骨肌萎缩症
NEFL、PRO8ARG

De Jonghe 等人在患有 2E 型腓骨肌萎缩症（CMT2E; 607684） 的比利时家庭成员中（2001） 证明了 NEFL 基因外显子 1 中核苷酸 22 至 23（CC 至 AG）处的双转变，导致 pro8 至 arg（P8R） 取代。这些患者表现出典型但相当严重的 CMT 表型，发病于第二个十年。神经传导速度有时严重减慢。

乔丹诺娃等人（2003） 在分离 CMT1F（607734） 的一个家族的受影响成员中发现了 P8R 突变，在另一个具有 CMT1F 的家族和具有相似表型的散发患者中，他们发现了相同密码子的突变。

佩雷斯-奥勒等人（2004） 证明 P8R 突变以及该密码子的其他 2 个突变导致突变 NFL 蛋白在细胞体和神经元突的近端片段中积累。

Miltenberger-Miltenyi 等人在患有 CMT2E 的奥地利家庭中受影响的成员中（2007） 鉴定了 NEFL 基因中的杂合 23C-G 颠换，导致蛋白质头域中的 P8R 取代。除 1 名患者外，所有患者均在 15 岁之前发病。该疾病进展缓慢，但导致严重且致残的表型。另一名不相关的散发性疾病患者也有 P8R 突变。

在培养的小鼠运动神经元中，Zhai 等人（2007） 发现 Q333P（162280.0001） 和 P8R 突变体 NEFL 的表达导致进行性退化和神经元活力丧失。退化的运动神经元表现出与神经丝网络破坏和 NEFL 蛋白聚集相关的神经炎过程的碎片和丧失。突变型 NEFL 与野生型 HSPB1（602195） 的共表达可减少突变型 NEFL 的聚集，诱导突变型 NEFL 聚集的逆转，并减少突变型 NEFL 诱导的运动神经元活力丧失。同样，导致 CMT2F（606595） 的突变体 HSPB1（S135F；602195.0001） 的表达也会导致运动神经元进行性变性，并导致神经丝网络破坏和 NEFL 蛋白聚集。发现这 2 种蛋白质结合在一起，并且 S135F 突变体 HSPB1 具有主导作用。翟等人（2007） 认为，NEFL 聚集导致的神经丝网络破坏是 CMT2E 和 CMT2F 运动神经元变性的常见触发事件。

.0004 腓骨肌萎缩症，1F 型
NEFL、3-BP DEL、1581GAG

在一个保加利亚家庭中，3代中有4名成员患有1F型腓骨肌萎缩症（CMT1F；607734），Jordanova等人（2003） 在 NEFL 基因的外显子 4 中发现了一个杂合的 3-bp 缺失（1581delGAG）。

山本等人（2004） 提出的证据表明，NEFL 基因中的 3 bp 缺失（导致密码子 528 处的谷氨酰胺缺失）是一种多态性变异，而不是日本的致病突变。

.0005 腓骨肌萎缩症，轴突，2E 型
NEFL、13-BP DUP/INS、NT61

Leung 等人对一名患有 2E 型腓骨肌萎缩症（CMT2E; 607684） 的 71 岁男性进行了研究（2006） 在 NEFL 基因外显子 1 的核苷酸 61 处鉴定出杂合的 13 bp 重复/插入，预计会导致密码子 21 处的终止。瞬时转染实验表明，突变的 NEFL 不能自行形成丝，并且在突变 NEFL 的存在，野生型 NEFL 仅形成短丝，而 α-internexin（605338） 丝塌陷成聚集体。

.0006 腓骨肌萎缩症，轴突，2E 型
NEFL、LEU94PRO

Miltenberger-Miltenyi 等人在患有 2E 型腓骨肌萎缩症（CMT2E; 607684） 的奥地利大家庭的 4 名受影响成员中（2007） 鉴定了 NEFL 基因中的杂合 281T-C 转变，导致线圈 1a 结构域中高度保守的残基发生 leu94 到 pro（L94P） 的取代。疾病在二十多岁时发病，伴有高弓足、进行性足底伸肌无力以及远端下肢萎缩和无力。两名患者只能坐轮椅。电生理学研究表明中间运动神经传导速度与轴突病理学一致。

.0007 腓骨肌萎缩症，1F 型
NEFL、GLU140TER

Abe 等人在一名患有 1F 型脱髓鞘性腓骨肌萎缩症（CMT1F; 607734） 的日本男性中，由近亲结婚生（2009） 鉴定了 NEFL 基因中的纯合 418G-T 颠换，导致 glu140-to-ter（E140X） 取代。 10岁前就出现步态问题，上下肢肌肉萎缩无力，远端感觉丧失，步态蹒跚，运动神经传导速度严重下降（13.8 m/s）。一位受到类似影响的兄弟在 40 岁时需要轮椅，但父母均未受到影响。阿部等人（2009） 假设无义突变会导致功能丧失，而错义突变会导致毒性功能获得，并得出结论，NEFL 基因中的纯合无义突变会导致隐性遗传疾病。

.0008 腓骨肌萎缩症，1F 型
NEFL、GLU210TER

Yum 等人在 4 名巴勒斯坦同胞中发现，其从儿童早期就开始患有严重的进行性周围神经病变（CMT1F；607734）（2009） 鉴定了 NEFL 基因中的纯合 628G-T 颠换，导致 glu210-to-ter（E210X） 取代。未受影响的近亲父母为突变杂合子。四分之三的儿童视觉诱发反应延长，表明中枢神经系统轴突受累。 1 名患者的腓肠神经活检显示 NEFL 缺乏免疫染色，有髓轴突数量减少，以及一些再生轴突。剩余的有髓鞘轴突中不存在中间丝。体外功能表达研究表明，突变体 NEFL 无法正常积累，表明无法形成丝或增强降解，与功能丧失一致。尽管百胜等人（2009） 将这种表型称为“轴突”。神经病变，所有受影响患者的中位神经传导速度范围为 14 至 25 m/s，这更符合“脱髓鞘”症状。神经病变，如 CMT1F。

.0009 腓骨肌萎缩症，轴突，2E 型
NEFL、ARG421TER

Agrawal 等人在一位母亲和她的 3 个儿子中发现了 2E 型轴突腓骨肌萎缩症（CMT2E; 607684），表现为先天性肌病（2014） 在 NEFL 基因中发现了一个杂合的 c.1261C-T 转变，导致 arg421 到 ter（R421X） 的取代。该突变是通过全基因组测序发现并经桑格测序证实的，与该家族中的疾病分离，并且在 dbSNP（版本 139）、1000 基因组计划或外显子组测序计划数据库中未发现。对患者细胞的分析表明，突变不会导致无义介导的 mRNA 衰减。对患者肌肉样本的蛋白质印迹分析和免疫荧光研究表明，NEFL 蛋白存在并正确定位于神经末梢的运动终板。在 2 名受影响成员和 2 名对照者的肌肉中发现了微弱的全长 NEFL 条带；由于骨骼肌中 NEFL 的总体丰度较低以及分子量上的非特异性或交叉反应带，因此无法评估与 R421X 突变相关的截短蛋白的存在。阿格拉瓦尔等人（2014） 假设翻译的截短蛋白可能是稳定的，可能会干扰成熟神经丝杂聚物中的野生型 NEFL。患者在婴儿期就出现肌张力低下、运动发育迟缓和远端肌肉无力的症状。他们都在不同的年龄段开始依赖轮椅。

.0010 腓骨肌萎缩症，显性中度 G
NEFL，GLU396LYS（rs62636503）

Zuchner 等人在患有显性中间型夏科-马里-图思病 G（CMTDIG；617882） 的德国 3 代家庭的 4 名受影响成员中（2004） 鉴定了 NEFL 基因外显子 3 中的杂合 c.1189G-A 转换，导致杆结构域末端的保守残基处发生 glu397-to-lys（E397K） 取代（Fabrizi 等人（2007） 指出，根据更新的参考序列，该突变的编号更改为 c.1186G-A 转换，导致 glu396 到 lys（E396K） 替换。）该突变，这是通过对 NEFL 基因进行直接测序发现的，与该家族中的疾病分离，并且在 65 名正常对照中未发现。两名无症状的家庭成员也携带该突变：他们当时 21 ，可能表明与年龄相关的不完全外显率。没有进行变体的功能研究和患者细胞的研究。

法布里齐等人（2007） 在 2 个患有 CMTDIG 的意大利同胞（E 家族）中鉴定出 NEFL 基因中 E396K 突变的杂合性。

埃尔布拉赫特等人（2014） 在一个多代家庭的 8 名从婴儿期或幼儿期开始患有 CMTDIG 的成员以及一名 50 岁时患有 CMTDIG 的无关患者（患者 9）中发现了 NEFL 基因 E396K 突变的杂合性；他没有 CMT 家族史。具有相同突变的患者之间表型的差异表明存在额外的遗传修饰因素，并拓宽了与该突变相关的表型谱。

Berciano 等人在一个患有 CMTDIG 的西班牙家庭的 4 名成员中（2015） 鉴定了 NEFL 基因中 E396K 突变的杂合性。该突变是通过外显子组测序发现并通过桑格测序确认的，并根据 dbSNP（版本 137）、1000 基因组计划和外显子组变异服务器数据库以及 90 个内部基因组进行筛选。

.0011 腓骨肌萎缩症，显性中度 G
NEFL，ASN98SER（rs58982919）

Berciano 等人在一对患有显性中间型夏科-马里-图斯病 G（CMTDIG；617882） 的母子中（2016） 鉴定了 NEFL 基因中的杂合 c.293A-G 转换，导致保守残基处出现 asn98 到 Ser（N98S） 取代。该突变是在排除几个脊髓小脑共济失调和 CMT 基因的突变后通过全外显子组测序发现的。没有对该变体进行功能研究。