SH3-结构域激酶结合蛋白 1； SH3KBP1

CBL 相互作用蛋白，85-KD； CIN85

HGNC 批准的基因符号：SH3KBP1

细胞遗传学位置：Xp22.12 基因组坐标（GRCh38）：X:19,533,977-19,887,600（来自 NCBI）

▼ 说明

CBL（165360）与含有 SH3 结构域的蛋白质组成型相互作用，并在酪氨酸磷酸化后与含有 SH2 结构域的蛋白质相互作用。 SH3KBP1 基因编码一种 85-kD CBL 相互作用蛋白，可增强肿瘤坏死因子（191160）介导的细胞凋亡（Narita 等，2001）。

▼ 克隆与表达

Take 等人使用 CBL 作为诱饵对 B 淋巴细胞 cDNA 文库进行酵母 2 杂交筛选，然后探测 Raji cDNA 文库（2000）获得了编码名为 CIN85 的蛋白质的 cDNA，即“85 kD 的 CBL 相互作用蛋白”。序列分析预测，该 665 个氨基酸的蛋白质与 CMS（604241） 36% 相同，包含 3 个连续的 N 端 SH3 结构域，后跟一个富含脯氨酸的区域和一个 C 端 α 螺旋卷曲螺旋结构域。对组织和癌细胞系的 Northern 印迹分析揭示了骨骼肌、肾、胰腺和一些癌细胞系中普遍存在的 3.2-kb 转录物以及 2.4-kb 转录物的表达。免疫印迹和免疫沉淀分析显示 85 kD 蛋白的表达，大于预测的 73 kD，该蛋白与 CBL 相互作用。突变和免疫印迹分析表明，具有双或三重 SH3 结构域的 CIN85 与 CBL 的相互作用比具有单个 SH3 结构域的突变体更有效。此外，无论 EGF（131530）刺激如何，CIN85 基本上与 CBL 相关，并且这种关联随着 CBL 的酪氨酸磷酸化和 EGFR（131550）的激活而增强。以等人为例（2000）表明 CIN85 用于将选择性蛋白质组装成 EGFR 信号级联中的特定 CBL 复合物。

Narita 等人使用 HCK（142370）的 SH3 结构域作为诱饵进行酵母 2-杂交筛选（2001）克隆了 SH3KBP1 基因，编码人类 Src 家族激酶结合蛋白，他们将其命名为 HSB1。巨噬细胞样细胞系中的异位表达导致对 HIV-1 感染的抵抗。

▼ 基因功能

Soubeyran 等人使用酵母 2 杂交筛选 cDNA 文库，以富含脯氨酸的 C 端序列或 CBL 的远端部分作为诱饵（2002）显示CIN85与CBL的远端序列相互作用，但与富含前序列的序列不相互作用。免疫沉淀分析还表明，由于 CBL 磷酸化和与 EGF 受体结合，CBL-CIN85 相互作用在 EGF 刺激的细胞中增强。 Soubeyran 等人通过使用 C 端 CIN85 作为诱饵进行筛选（2002）通过其 SH3 结构域，将内亲素 A1（604465）、A2（601768）和 A3（603362）鉴定为组成型相互作用因子，与富含脯氨酸的 CIN85 序列。 EGF 刺激会产生 CBL、CIN85、内亲素和 EGF 受体的复合物。共聚焦显微镜显示静息细胞中存在弥漫性细胞质分布，并且在 EGF 刺激后与内吞囊泡中的 EGF 受体共定位。对 CIN85 的显性干扰形式的分析表明，CIN85 对于 EGF 受体的多泛素化来说是可有可无的，但它对于受体内吞作用和溶酶体降解的调节可能至关重要。苏贝兰等人（2002）得出结论，CIN85 在控制膜后事件中发挥作用，例如靶向受体以降解和调节基因转录，可能是通过与多种转换因子蛋白结合。

佩特雷利等人（2002）使用内亲素 A3 作为诱饵对脑 cDNA 文库进行酵母 2 杂交筛选，并鉴定出除了动力蛋白之外，CIN85 也是与内亲素 A3 的相互作用物。 GST 下拉和免疫沉淀分析表明，已知内亲蛋白的 SH3 结构域对于结合是必要且充分的。用 HGF（142409）刺激细胞导致 CBL 通过 tyr1356 与 HGFR（164860）结合，并诱导 HGFR 泛素化。此外，HGFR 激活和磷酸化导致 CBL 酪氨酸磷酸化和 CIN85-内亲素复合物的募集。佩特雷利等人（2002）提出该复合物驱动质膜内陷和囊泡形成，导致信号转导和生物反应的负调节。他们还提出，这种复合物的形成可能代表了下调激活的酪氨酸激酶受体的一般方法。

冯等人（2011）发现小鼠 Shkbp1（617322）负向调节 EGF 激活的 EGFR 的内吞作用和溶酶体降解。酵母 2-杂交和免疫共沉淀测定表明，Shkbp1（617322）与 CIN85 相互作用。 Shkbp1 与 CIN85 的相互作用消除了 CIN85 与内吞囊泡上 CBL 的相互作用，并干扰 EGF 激活的 EGFR 的内吞作用和降解。突变分析显示，Shkbp1 的 2 个 PxxxPR 基序中至少有 1 个是 Shkbp1 与 CIN85 的 SH3 结构域相互作用以及抑制 EGFR 降解所必需的。野生型 Shkbp1 或具有 1 个功能性 PxxxPR 基序的突变型 Shkbp1 提高了 EGFR 依赖性报告基因的表达。

▼ 测绘

成田等人（2001）通过FISH将SH3KBP1基因定位到染色体Xp22.1-p21.3。

▼ 分子遗传学

在 2 名患有免疫缺陷 61 的兄弟中（IMD61；300310），Keller 等人（2018）在 SH3KBP1 基因中发现了一个半合子 247.5-kb 基因内缺失，该缺失删除了编码蛋白质（300374.0001）的 2 个 SH3 结构域的外显子 2 至 6。通过阵列 CGH 发现的缺失也存在于未受影响的母亲中。与 SH3KBP1 相邻的基因不受影响。全外显子组测序排除了与人类原发性免疫缺陷相关的 395 个基因的突变。患者 B 细胞的体外功能表达研究显示，响应 B 细胞受体（BCR）刺激的 NFKB（参见 164011）典型激活存在特定缺陷。相反，连接 TLR9（605474）或 CD40（109535）并用 PMA 处理细胞可以正确激活 NFKB。其他信号通路，包括 Ras（参见 190020）-MAPK（参见 176872）、PI3 激酶（参见 171833）和 Akt（164730）-mTOR（601231）不受影响。在患者细胞中，BCR 诱导的激活标记物 CD86（601020）的表面表达降低。凯勒等人（2018）得出的结论是，缺失导致 B 细胞的内在缺陷，从而损害中枢 BCR 激活途径和抗体的产生。

▼ 动物模型

科梅塔尼等人（2011）发现小鼠 B 细胞中 Cin85 基因的特异性缺失会导致体内 T 细胞依赖性抗体反应受损，并在体外减弱 IKKB（603258）和 NFKB 激活以及对 B 细胞受体（BCR）交联的细胞反应。研究结果表明，Cin85 通过参与重要的信号通路，在 BCR 介导的存活和增殖中发挥重要作用。

▼ 等位基因变异体（1 个选定示例）：

.0001 免疫缺陷 61（1 个家族）
SH3KBP1，247.5-KB DEL

Keller 等人发现，2 名患有免疫缺陷 61（IMD61; 300310）的兄弟表现为低丙种球蛋白血症和反复感染（2018）在 SH3KBP1 基因中发现了一个半合子 247.5-kb 基因内缺失（chrX.19,667,630-19,886,572del, GRCh37），该缺失删除了外显子 2 至 6，编码该蛋白质的 2 个 SH3 结构域。通过阵列 CGH 发现的缺失也存在于未受影响的母亲中。与 SH3KBP1 相邻的基因不受影响。患者 B 细胞的体外功能表达研究表明，响应 B 细胞受体（BCR）刺激的 NFKB 典型激活存在特定缺陷。凯勒等人（2018）得出的结论是，缺失导致 B 细胞的内在缺陷，从而损害中枢 BCR 激活途径和抗体的产生。