B 细胞连接蛋白； BLNK

含有 SH2 结构域的白细胞蛋白，65-KD； SLP65
B 细胞特异性转换因子蛋白； BASH

HGNC 批准的基因符号：BLNK

细胞遗传学位置：10q24.1 基因组坐标（GRCh38）：10:96,189,171-96,271,569（来自 NCBI）

▼ 说明

BLNK 基因编码 B 细胞连接蛋白。连接蛋白或转换因子蛋白提供了受体放大和调节下游效应蛋白的机制。 BLNK 对于正常 B 细胞发育至关重要（Fu et al., 1998）。

▼ 克隆与表达

傅等人（1998） 发现了一种新的 B 细胞连接蛋白，他们将其称为 BLNK。 BLNK 编码 456 个氨基酸的多肽，具有碱性、酸性、富含脯氨酸和 SH2 结构域。一种称为 BLNK-S 的选择性剪接产物缺乏富含脯氨酸的结构域内的 760 至 828 位碱基对。鼠 Blnk 蛋白与人类 BLNK 具有 82% 的同一性。小鼠 BLNK 似乎不存在选择性剪接形式。 BLNK 与 SLP76（601603） 连接蛋白具有最大的同源性。 BLNK mRNA 主要在脾脏中表达，但在肝脏、肾脏和胰腺中也可见到一定水平的表达。仅在 B 细胞系中检测到 BLNK 蛋白的表达。

维南兹等人（1998） 孤立克隆了 BLNK，他们将其称为 SLP65。

▼ 基因功能

傅等人（1998） 表明 BLNK 将 B 细胞受体（BCR） 相关的 SYK 酪氨酸激酶（600085） 与 PLC-γ（172420）、VAV 鸟嘌呤核苷酸交换因子（164875）、GRB2（108355） 和 NCK 连接起来。 600508） 转换因子蛋白。 SYK 对 BLNK 的酪氨酸磷酸化为这些含有 SH2 的效应分子提供了对接位点，进而允许其各自信号通路的磷酸化和/或激活。因此，BLNK 代表一种中心连接蛋白，它将 B 细胞受体相关激酶与多种信号通路连接起来，并可能调节 B 细胞功能和发育的生物学结果。

石合等人（1999） 证明 BLNK 对于激活磷脂酶 C（PLC）-γ-2（PLCG2; 600220） 和 JNK（601158） 至关重要。通过将膜相关形式的 PLC-γ-2 引入 BLNK 缺陷的 B 细胞，可以恢复 BCR 诱导的 PLC-γ-2 激活，但不能恢复 JNK 激活。由于 JNK 激活需要 Rac1（602048） 和 PLC-γ-2，Ishiai 等人（1999） 得出结论，除了调节 PLC-γ-2 定位外，BLNK 还调节 Rac1-JNK 通路。

朱马等人（2003） 表明分化调节剂 SLP65 抑制小鼠前 B 细胞白血病。在 SLP65 -/- 前 B 细胞系中重建 SLP65 表达可增强体外分化，并防止免疫缺陷小鼠发生前 B 细胞白血病。此活动需要 SLP65 的酪氨酸 96。敲除 SLP65 的小鼠前 B 细胞白血病类似于人类儿童期前 B ALL。事实上，所测试的 34 个儿童前 B ALL 样本中有 16 个显示 SLP65 表达完全丧失或急剧减少。朱马等人（2003） 表明这种丢失可能是由于将替代外显子纳入 SLP65 转录本，导致终止密码子过早出现。因此，Jumaa 等人（2003） 得出的结论是，SLP65 的体细胞缺失以及随之而来的前 B 细胞分化障碍可能是儿童前 B ALL 的主要原因之一。

田口等人（2004） 鉴定了一种缺乏 BLNK 表达的 pre-B ALL 细胞系，其中刺激 pre-BCR 导致 PLCG2 磷酸化缺失和细胞内钙增加。相反，MAP 激酶（参见 602425）和磷脂酰肌醇 3-激酶（参见 601232）信号传导的激活不受影响。田口等人（2004） 得出结论，BLNK 对于 PLCG2 诱导的钙内流至关重要，并且 BLNK 缺陷的细胞系可以为研究 BLNK 在前 B 细胞受体介导的信号传导机制中的作用提供体外模型。

科勒等人（2005） 发现小鼠 Slp65 高度保守的 N 末端的亮氨酸拉链对于其与质膜的关联至关重要。流式细胞术和免疫荧光显微镜证明，拉链区域关键亮氨酸的突变消除了膜关联。

斯普兰格斯等人（2006） 在 28 例前 B 淋巴细胞白血病病例中的 7 例和 27 例 B 细胞淋巴瘤病例中的 5 例中发现了 SLP65 表达缺陷。 SLP65 缺陷与 RAG1（179615）/RAG2（179616） 表达和持续的 VH 基因重排活性相关。在 SLP65 缺陷的白血病和淋巴瘤细胞系中重建 SLP65 表达导致 RAG1/RAG2 下调，并阻止从头 VH-DJH 重排和继发性 VH 替换。斯普兰格斯等人（2006） 得出结论，VH 基因反复重排是 B 淋巴恶性肿瘤的常见特征，并且在许多情况下可归因于 SLP65 缺陷。

▼ 基因结构

BLNK 基因包含分布在约 65 kb DNA 上的 17 个外显子（Minegishi 等，1999）。

▼ 测绘

峰岸等人（1999） 使用荧光原位杂交将 BLNK 基因定位到染色体 10q23.2。

▼ 分子遗传学

在一名患有无丙种球蛋白血症且缺乏 B 细胞（AGM4; 613502） 的男孩中，Minegishi 等人（1999） 鉴定了 BLNK 基因中的纯合剪接缺陷（604515.0001）。尽管该患者的前 B 细胞数量正常，但他没有前 B 细胞或成熟 B 细胞，这表明 BLNK 在协调前 B 细胞向前 B 细胞的转变中发挥着关键作用。患者在8个月大时出现复发性中耳炎；两次肺炎发作后，他在 16 个月大时接受了免疫缺陷评估。当时，他的血清中未检测到 IgG、IgM 或 IgA，外周循环中的 B 细胞也不足 1%。他开始接受丙种球蛋白替代治疗，在 2 至 20 岁时，除了慢性中耳炎和鼻窦炎、静脉注射丙种球蛋白获得的丙型肝炎以及青春期出现的一次蛋白质丢失性肠病外，他的情况良好。

▼ 动物模型

帕普等人（1999） 通过有针对性的破坏产生了 Blnk 缺陷的小鼠。 Blnk -/- 小鼠中的 B 细胞发育在从 B220+CD43+ 祖 B 细胞向 B220+CD43- 前体 B 细胞的转变过程中被阻断。在外周血中仅检测到一小部分 IgM M++，但未检测到成熟的 IgM（lo）IgD（hi）、B 细胞。帕普等人（1999） 得出结论，BLNK 是 BCR 信号通路的重要组成部分，是促进 B 细胞发育所必需的。

弗莱明等人（2003） 表明野生型和 Slp65 -/- 骨髓来源的 B 细胞都需要 IL7（146660） 才能增殖。在缺乏 IL7 的情况下，或者通过重新引入 Slp65，许多突变细胞表达表面 IgM 并下调前 BCR。由于需要前 B 细胞受体信号传导导致 Erk（参见 MAPK1；176948）激活和 Slp65 -/- 细胞存活，同时缺乏前 BCR 和 Slp65 的细胞的增殖能力严重降低。弗莱明等人（2003）还发现Slp65缺陷小鼠比野生型小鼠更容易患前B细胞淋巴瘤和实体瘤。作者得出结论，SLP65 通过加速细胞在易发生突变的发育阶段的进展，充当有效的肿瘤抑制因子。

林等人（2004） 表明，在没有 Bash 的情况下，抗 DNA Ig 敲入小鼠的 BCR 编辑在多个层面上受损。缺乏 Bash 的小鼠对 DNA 载体免疫也有过度的抗体反应。林等人（2004） 得出结论，BCR 信号受体编辑有助于建立 B 细胞耐受性。

▼ 等位基因变异体（1 个选定示例）：

.0001 无伽玛球蛋白血症 4，常染色体隐性（1 个家族）
BLNK、IVS1DS、A-T、+3

Megishi 等人在一名患有早发性低球蛋白血症且 B 细胞缺失的 20 岁男性中（613502）（1999） 鉴定了 BLNK 基因的第一个外显子及其侧翼内含子序列的纯合改变。鉴定出两个不连续的碱基对取代。第一个是密码子 10 中第三个碱基对位置的 C 到 A 替换，编码沉默脯氨酸替换。第二个改变是内含子 1 剪接供体位点 +3 位置处的 A 到 T 颠换，即密码子 10 改变下游的 20 个碱基对。对 100 个不相关个体的 DNA 进行 SSCP 分析，没有发现与患者的情况。峰岸等人（1999） 直接从该患者的骨髓中提取 cDNA，并使用 RT-PCR 分析来检查 BLNK 转录物的丰度。无法从患者的骨髓中扩增出 BLNK 转录本。患者的母亲和父亲的 BLNK 中的两个碱基对替换均为杂合子，他们身体健康，血清免疫球蛋白浓度正常，B 细胞数量正常。一名哥哥在 6 个月大时患上复发性中耳炎，并在 16 个月大时死于假单胞菌败血症和中性粒细胞减少症。