β-1,3-半乳糖基转移酶 8; B3GNT8

BGALT15
β-1,3-半乳糖基转移酶 7,前; B3GALT7,前

HGNC 批准的基因符号:B3GNT8

细胞遗传学位置:19q13.2 基因组坐标(GRCh38):19:41,425,359-41,428,730(来自 NCBI)

▼ 说明

B3GNT8 是一种半乳糖基转移酶,参与聚 N-乙酰基乳糖胺(polyLacNAc) 的合成,聚 N-乙酰基乳糖胺(polyLacNAc) 是由半乳糖(Gal) 和 N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc) 组成的重复 LacNAc 单元的线性链,其结构为(Gal-β-1-4) -GlcNAc-β-1-3)n(Seko 和 Yamashita,2008)。

▼ 克隆与表达

通过在人类数据库中搜索与 B3GALT1(603093) 相似的序列,然后对肺 cDNA 文库进行 PCR,Huang 等人发现,(2004) 克隆了 B3GNT8,他们将其称为 B3GALT7。推导的 397 个氨基酸蛋白质的计算分子量为 43.3 kD。 B3GALT8 具有 N 端信号肽和半乳糖基-T 结构域,具有多个保守序列基序和 5 个保守半胱氨酸。对 16 个人体组织进行 Northern blot 分析,检测到一个 1.9 kb 的转录物在肺、咽喉和回肠中高表达,在舌、乳房、子宫和睾丸中表达较低,在其他组织中没有表达。 B3GALT8 在 6 种人类肿瘤细胞系中也有不同表达。

Ishida 等人通过在 EST 数据库中搜索与 B3GNT3(605863) 相似的序列,然后对 Colo205 结肠癌 cDNA 文库进行 PCR,得出了这一结论(2005)克隆了B3GNT8。推导的 397 个氨基酸的 II 型膜蛋白具有 4 个氨基酸的 N 端胞质结构域,随后是跨膜片段、茎区和推定的催化结构域。它还具有 1 个可能的 N-糖基化位点。 B3GNT8 中的二价金属结合基序是 QDD 而不是 DDD,后者在其他 B3GNT 酶中是保守的。实时PCR检测到B3GNT8在26种人体组织中存在差异表达,其中在脾脏、骨髓、小肠和胰腺中表达最高,在除成人或胎儿脑、心脏、结肠和前列腺之外的大多数其他组织中表达较低。几乎没有表情。

▼ 基因功能

石田等人(2005)表明,转染的 HEK293 细胞过表达的可溶性 B3GNT8 选择性地将 GlcNAc 从 UDP-GlcNAc 转移到 Gal-β-1-4-GlcNAc-α-对硝基苯磷酸盐的非还原末端和乳糖苷-α-苯甲酰基。它不使用硫酸角质素或聚乳糖胺寡糖作为底物。 B3GNT8 活性需要 Mn(2+),而使用 Co(2+) 时效率较低。最适pH值在7至7.5之间。 B3GNT8 还将 GlcNAc 转移到 α-1-酸性糖蛋白(参见 AGP1, 138600)和卵类粘蛋白上,后者具有四触角复合物类型和五触角复合物类型 N-聚糖。对于四触角 N-聚糖底物,B3GNT8 似乎更喜欢 β-1-2 分支而不是 β-1-6 分支。当 B3GNT8 在 HCT15 人结肠癌细胞中过表达时,会增加细胞表面 PolyLacNAc 和 β-1-6 支链 N-聚糖的表达。

Seko 和 Yamashita(2008) 指出,可溶形式的 B3GNT8 和 B3GNT2(605581) 的混合物在体外比单独使用任一酶具有更高的酶活性(Seko 和 Yamashita, 2005)。通过免疫共沉淀分析,他们发现这两种酶在转染的 COS-7 细胞中相互作用。 B3GNT2 的 DDD 基序或 B3GNT8 的 QDD 基序的突变使酶失活,但并未消除它们的相互作用。混合活性酶和非活性酶表明,B3GNT2 的活性因相互作用而增加,但 B3GNT8 的活性并未增加。 B3GNT8 没有改变 B3GNT2 的底物特异性,但增加了其周转速度。鼠类B3gnt8也激活了人B3GNT2,而人B3GNT8激活了鼠类B3gnt2,表明效应的保守性。在分化的 HL-60 细胞中,B3GNT8 和聚-N-乙酰基乳糖胺(polyLacNAc) 部分的水平均增加。活性或失活的 B3GNT8(而非 B3GNT2)的过表达增加了分化的 HL-60 细胞的 PolyLacNAc 含量,表明外源 B3GNT8 激活了预先存在的游离 B3GNT2。

▼ 基因结构

石田等人(2005) 确定 B3GNT8 基因具有单一编码外显子。

▼ 测绘

通过基因组序列分析,Huang 等人(2004) 将 B3GNT8 基因定位到染色体 19q13.2。

石田等人(2005) 将 B3GNT8 基因对应到染色体 19q13.31,将小鼠 B3gnt8 基因对应到染色体 7A3。