受体相互作用丝氨酸/苏氨酸激酶 2； RIPK2

含卡冰相关激酶；CARDIAK
受体相互作用蛋白 2； RIP2
裂口样相互作用 CLARP 激酶；RICK

HGNC 批准的基因符号：RIPK2

细胞遗传学位置：8q21.3 基因组坐标（GRCh38）：8:89,757,816-89,791,064（来自 NCBI）

▼ 克隆与表达

通过 FAS（134637）死亡受体发出的信号在免疫系统的稳态中发挥着关键作用。配体诱导的寡聚化后，FAS 受体通过 FADD（602457）将半胱天冬酶-8（601763）募集至受体信号复合物，从而导致半胱天冬酶-8 的加工并释放到胞质溶胶中。活性半胱天冬酶-8 会诱导半胱天冬酶级联反应并导致细胞快速死亡。 RIP（RIPK1; 603453）是一种含有死亡结构域的蛋白激酶，可与 FAS 的死亡结构域相互作用，但似乎不会介导 FAS 引发的细胞凋亡。为了鉴定可能参与 FAS 诱导细胞凋亡调节的激酶，Inohara 等人（1998）在 EST 数据库中搜索了与 RIP 催化结构域具有同源性的克隆。他们鉴定了编码一种蛋白质的 cDNA，并将其命名为 RICK（类 RIP 相互作用 CLARP 激酶）。预测的 540 个氨基酸蛋白包含 N 端丝氨酸/苏氨酸激酶催化结构域和 C 端半胱天冬酶激活和募集结构域（CARD）。 CARD 介导同性相互作用，允许将半胱天冬酶募集到受体复合物上，并且已在许多参与细胞凋亡信号转导的分子中得到鉴定，包括 RAIDD（603454）、半胱天冬酶-2（600639）和 cIAP2（BIRC3; 601721）（McCarthy等人，1998）。井野原等人（1998）证明 RICK 与 CLARP（603599）发生物理相互作用，CLARP 是一种已知可与 FADD 和半胱天冬酶-8 结合的半胱天冬酶样分子。 RICK 的表达促进半胱天冬酶-8 的激活，并增强 FAS、FADD、CLARP 和半胱天冬酶-8 诱导的细胞凋亡。 Northern 印迹分析显示，RICK 在各种人体组织中以 2.5-和 1.8-kb mRNA 的形式表达，这些 mRNA 由于选择性多聚腺苷酸化而有所不同。作者得出结论，RICK 是一种新型激酶，可以调节 FAS 受体途径诱导的细胞凋亡。

▼ 基因功能

TNFR 家族成员，例如 TNFR1（191190）、FAS 和 CD40（109535），在重叠细胞反应中发挥重要作用，包括细胞激活、增殖、分化、NF-kappa-B（参见 164011）激活和细胞凋亡。麦卡锡等人（1998）发现 RICK 的过度表达（他们称之为 RIP2）可以发出细胞死亡和 NF-κ-B 激活的信号。 RIP2 诱导的细胞凋亡是通过 CARD 基序介导的，而整个蛋白是 NF-κ-B 激活所必需的。免疫共沉淀研究表明，RIP2 与 TNFR1 信号复合体的成员相互作用，包括 cIAP1（BIRC2; 601712）以及特定的 TNFR 相关因子（TRAF）家族蛋白。这些 TRAF 相互作用介导 RIP2 向受体信号复合物的募集。托姆等人（1998）报道 RICK，他们称之为 CARDIAK（含 CARD 的 ICE 相关激酶），与 ICE/半胱天冬酶-1 的 CARD 特异性相互作用（147678），这种相互作用与 pro-半胱天冬酶-1 和半胱天冬酶-1 的加工相关。活性半胱天冬酶-1 p20 亚基的形成。

通过研究果蝇和人类细胞中宿主对大肠杆菌细胞毒性坏死因子-1（CNF1）的反应，Boyer 等人（2011）表明宿主通过 RAC2 的修饰和激活间接感知病原体（602049）。 CNF1修饰RAC2后，RAC2分别与果蝇和人类细胞中的先天免疫转换因子Imd和RIPK1-RIPK2相互作用。在果蝇中诱导免疫反应需要 CNF1 酶活性，在哺乳动物中，CNF1 酶活性催化 RAC2 中谷氨酰胺脱酰胺为谷氨酸，消除 GTP 酶活性并将酶锁定为活性形式。修饰的 RAC2 与 RIPK1 和 RIPK2 相互作用，通过人类细胞中的 NFKB（参见 164011）和 IL8（146930）表达诱导免疫激活。博耶等人（2011）得出结论，CNF1 等毒力因子通过这种机制诱导免疫反应，而无毒微生物则无法激发宿主反应。

基斯特拉等人（2013）证明 NOD1（605980）通过监测小 Rho GTPases 的激活状态来感知胞质微生物产物。通过细菌递送或 SopE（肠道病原体沙门氏菌的毒力因子）的异位表达激活 RAC1（602048）和 CDC42（116952），触发 NOD1 信号通路，随后由 RIP2 介导诱导 NF-κ-B 依赖性炎症反应。同样，肽聚糖激活 NOD1 信号通路需要 RAC1 活性。此外，Keestra 等人（2013）表明 RAC1、CDC42 和 RHOA（165390）的组成型活性形式激活 NOD1 信号通路。

中村等人（2014）表明，树突状细胞优先表达 2 种内溶酶体肽转运蛋白 SLC15A3（610408）和 SLC15A4（615806），特别是在 TLR 刺激后。转运蛋白介导细菌衍生成分（例如 NOD2（605956）同源配体胞壁酰二肽（MDP））的流出，并且是 NOD2 对内体衍生 MDP 反应的选择性需要。转运蛋白表达的增强还产生树突状细胞特征的内体膜小管，这进一步增强了对 MDP 的 NOD2 依赖性反应。最后，传感需要将 NOD2 及其效应激酶 RIPK2 募集到内体膜上，这可能是通过与 SLC15A3 或 SLC15A4 形成复合物来实现的。因此，中村等人（2014）得出的结论是，树突状细胞内体是病原体腔内和胞质传感的专用平台。

▼ 测绘

通过包含在映射克隆（AC004003）中，RIPK2 基因对应到染色体 8q21（Rasooly, 1998）。

▼ 动物模型

钦等人（2002）通过同源重组产生了 Ripk2 缺陷的可存活、可生育的小鼠。尽管 Ripk2 -/- 小鼠中亚类特异性 IgG 反应较低，但 T 淋巴细胞而非 B 细胞反应，特别是 Th1 分化和细胞因子产生，受到更严重的影响。在 Ripk2 缺陷型小鼠中，响应 T 细胞受体激活加上 IL12（参见 161560）和/或 IL18（600953）刺激的 Ifng（147570）产量减少，可能是通过有缺陷的 Stat4（600558）激活所致。 NK 细胞也无法响应 IL12 和/或 IL18 产生 Ifng。 Ripk2 -/- 小鼠感染单核细胞增多性李斯特菌会导致 8 天内死亡，且细菌载量较高，而大多数野生型小鼠则存活下来并完全清除了细菌。感染动力学表明突变小鼠先天免疫和适应性免疫均存在缺陷。 EMSA 分析显示，Ripk2 缺陷型巨噬细胞响应单核细胞增生李斯特菌或脂多糖，NFκB 活化降低。 RT-PCR 分析检测到野生型小鼠细胞中 Ripk2 的表达上调以响应 LPS。缺乏 Ripk2 的小鼠对致死剂量的 LPS 具有完全抵抗力。 TLR4（603030）或 Nod1/CARD4（605980）响应的 NFKB 激活被显性失活形式的 Ripk2 抑制。钦等人（2002）得出结论，RIPK2 通过 NOD 和 TLR 诱导的细胞信号传导参与对病原体的先天反应，并介导 Th1 和 NK 细胞中细胞因子诱导的 Ifng 产生。

Kobayashi 等人也使用 Ripk2 缺陷小鼠（2002）证明，肽聚糖、双链 RNA 或 LPS（而非 CpG DNA）（分别是 TLR2（603028）、TLR3（603029）、TLR4 和 TLR9（605474）的配体）会减少炎症细胞因子的产生，这表明与一些（但不是全部）TLR 相关。免疫印迹分析显示许多 MAP 激酶和 IKBA 的磷酸化水平降低（164008）。对 LPS 和单核细胞增生李斯特菌以及 IL18 和 IL12 的反应以及 Th1 和 Th2 细胞的反应孤立证实了 Chin 等人的观察结果（2002）。小林等人（2002）还确定 Nod1 或 Nod2（605956）的表达消除了 Ripk2 -/- 成纤维细胞中的 NFKB 激活。用 IL1B（147720）而不是 TNF（191160）刺激的胚胎成纤维细胞显示 IL6（147620）的产生受损，表明承载 IL1R（例如 147810）的 TLR 结构域存在缺陷，但 TNFR1 没有缺陷。小林等人（2002）得出的结论是，先天免疫系统中 TLR 和 NOD 蛋白家族成员的信号传导以及适应性免疫反应中适当的 TCR 信号传导都需要 RIPK2，因此，RIPK2 是一种能够整合来自两个系统的信号的独特激酶。他们提出了 3 个模型来解释这一点： Ripk2 是每个受体的直接下游信号分子； Ripk2 始终接收来自 NOD 蛋白的信号；或前两种机制的组合，具体取决于受体。

Bertrand 等人在缺乏 Birc2、Birc3 或 Ripk2 的小鼠中，或通过 RNAi 耗竭而缺乏 Birc2 或 Birc3 的 HT29 细胞中（2009）表明 Birc2 和 Birc3 是 Ripk2 泛素化所必需的，并且这些分子是响应 Nod1（605980）和 Nod2 激动剂而依赖 Ripk2 激活 Mapk 和 Nfkb（164011）信号通路所必需的。 Birc2 缺失和 Birc3 缺失小鼠的巨噬细胞中细胞因子和趋化因子的产生也减少。炎症反应的减少也导致对腹膜炎诱导的抵抗。在 Ripk2 和 Birc3 缺陷的小鼠中，胞壁酰二肽 Nod2 激活不能预防葡聚糖硫酸钠诱导的结肠炎。伯特兰等人（2009）得出结论，细胞凋亡抑制剂（cIAP）是 NOD 先天免疫信号传导的关键调节因子。