E2F 相关磷酸蛋白; EAPP

14 号染色体开放解读码组 11； C14ORF11

HGNC 批准的基因符号：EAPP

细胞遗传学位置：14q13.1 基因组坐标（GRCh38）：14:34,515,938-34,539,701（来自 NCBI）

▼ 克隆与表达

Novy 等人使用 E2F1（189971） 的 N 末端结构域作为人类 B 细胞 cDNA 文库的酵母 2 杂交筛选中的诱饵，然后进行 PCR（2005）克隆EAPP。推导的 281 个氨基酸蛋白质的计算分子量约为 36 kD。 EAPP 含有几个潜在的磷酸化位点，磷酸酶处理后其表观分子质量的变化表明 EAPP 被磷酸化。 Northern印迹分析在所有检查的组织中检测到1.4-kb EAPP转录物，其中在心脏、胎盘、骨骼肌和胰腺中水平最高，在脑、肺和肾中水平中等，在肝脏中表达水平较低。带有或不带有荧光标签的EAPP几乎只在转染的骨肉瘤细胞的细胞核中表达。蛋白质印迹分析在骨肉瘤细胞系的整个细胞周期中检测到 EAPP，但在有丝分裂细胞中未检测到。

Kamnasaran 等人通过在 14 号染色体（HPE8；609408）上寻找前脑无裂畸形最小关键区域内的基因，（2005） 鉴定出 C14ORF11。推导的 233 个氨基酸的蛋白质可能具有 N 端卷曲螺旋结构域。 Northern 印迹分析检测到一个 1.7 kb 转录物在所有组织和所检查的特定大脑区域中以不同水平表达。 C14ORF11 携带 C 端荧光标签，定位于转染的 COS-1 细胞和转化的人皮肤成纤维细胞的细胞质。小鼠胚胎的 RT-PCR 发现 C14orf11 在所检查的所有发育阶段都有表达，原位杂交发现 C14orf11 在发育中的中枢神经系统、脊柱、面部、咽部、四肢和内脏中表达。

▼ 基因功能

诺维等人（2005） 通过酵母 2 杂交分析和共转染细胞中相互作用蛋白的免疫沉淀证实 EAPP 直接与 E2F1 相互作用。体外翻译蛋白的 Pull-down 测定表明，EAPP 与 E2F1、E2F2（600426） 和 E2F3（600427） 结合，但不与 E2F4（600659） 结合。突变分析表明与E2F1的相互作用是由EAPP的C端部分介导的。 EAPP 增强了 E2F1 对含有 3 个 E2F 结合位点的报告基因的启动子活性。单独的 EAPP 表现出报告基因的低但剂量依赖性激活。 EAPP 在骨肉瘤细胞系中的过度表达导致处于 S 期的细胞比例较高，而 RNA 干扰则导致处于 S 期的细胞减少。

▼ 基因结构

卡姆纳萨兰等人（2005）确定C14ORF11基因含有6个外显子。

▼ 测绘

通过 BAC 和基因组序列分析，Kamnasaran 等人（2005） 将 C14ORF11 基因对应到染色体 14q13。