ENAH 肌节蛋白调节剂; ENAH

ENABLED，果蝇，同源
ENA
哺乳动物 ENABLED；MENA
NDPP1

HGNC 批准的基因符号：ENAH

细胞遗传学位置：1q42.12 基因组坐标（GRCh38）：1:225,486,829-225,653,878（来自 NCBI）

▼ 克隆与表达

佐祖卡等人（1992）克隆了小鼠 Enah，他们将其称为 Ndpp1。 3-prime UTR 包含 7 个 ATTTA mRNA 不稳定基序。推导的 389 个氨基酸的蛋白质具有富含脯氨酸的 N 末端，随后是富含亮氨酸/脯氨酸的区域、靠近可能的 α 螺旋的 4-精氨酸簇，以及位于 C 末端的第二个可能的 α 螺旋。 Enah 还具有 3 个假定的 N-糖基化位点。 Northern印迹分析检测到许多在小鼠胚胎发育过程中下调的mRNA种类，并且在成年小鼠大脑中仅微弱地检测到。 RT-PCR产物的Southern印迹分析发现Enah在多种成年小鼠组织中表达，其中在心脏和睾丸中表达最高。 Southern 印迹分析在包括人类在内的多种脊椎动物中检测到了小鼠 Enah 的同源物。

塔尼等人（2003）克隆了全长小鼠 Enah，他们将其称为 Mena，以及一个较短的剪接变体，他们将其称为 Mena（S）。全长 Mena cDNA 编码推导的 541 个氨基酸的蛋白质，包含 N 末端 Ena/VASP（601703）同源 1（EVH1）结构域、富含 arg-leu-glu 的区域、富含 profilin 的区域（176610 ）-结合基序和 C 端 EVH2 结构域。 Mena（S） cDNA 编码推导的 508 个氨基酸的蛋白质，该蛋白质缺少一部分 profilin 结合基序。免疫荧光显微镜将 Mena 定位于小鼠胚胎成纤维细胞的焦点接触处和前缘。

通过数据库分析以及成人和胎儿大脑和成纤维细胞 cDNA 文库的 PCR 和 5-prime RACE，Urbanelli 等人（2006）克隆了全长人类 ENAH。推导的 570 个氨基酸的 ENAH 蛋白与小鼠 Enah 具有 86.6% 的一致性。人 ENAH 具有由 LERER 重复区域和富含脯氨酸区域分隔的 N 端和 C 端 EVH 结构域。它还具有潜在的磷酸化位点和 2 个短氨基酸序列，位于富含 arg-leu-glu 的区域，而这些在小鼠 Enah 中未发现。 LERER 重复预计会形成带有交替电荷的延伸螺旋。 Northern印迹分析在所有检查的组织中检测到约4.8 kb的主要转录本，其中在骨骼肌、胰腺和胎盘中表达最高，在脑中表达最低。在骨骼肌中也检测到了较小的转录本。 RT-PCR 在人胶质母细胞瘤细胞系中检测到与小鼠 Enah（S）变体同源的 ENAH 剪接变体，在人神经母细胞瘤细胞系中检测到与 3 个小鼠神经特异性 Enah 变体同源的 3 个 ENAH 剪接变体。

▼ 基因功能

Ermekova 等人通过从小鼠脑裂解物中下拉并对过表达大鼠 Fe65（APBB1; 602709）的 COS 细胞进行免疫共沉淀（1997）确定大鼠 Fe65 的 WW 结构域与小鼠 Mena 富含聚脯氨酸的区域相互作用。

单核细胞增生李斯特氏菌的运动取决于肌节蛋白聚合。 Laurent 等人使用人血小板和小鼠脑提取物中李斯特菌的运动测定（1999）表明 ENA、VASP 和 EVL（616912）在肌节蛋白聚合转化为主动运动和推进力过程中发挥着可互换的作用。人 VASP 的 EVH1 结构域与 ACTA（102610）的 zyxin（ZYX; 602002）同源富含脯氨酸区域处于缓慢缔合-解离平衡高亲和力结合。 VASP 还通过其 C 端 EVH2 结构域以 Ser157 磷酸化依赖性方式与 F-肌节蛋白相互作用。劳伦特等人（1999）得出结论，VASP、EVL 和 ENA 将细菌与肌节蛋白尾部连接起来，从而能够在分子棘轮模型中运动。

Tani 等人使用酵母 2-杂交测定法（2003）发现人类 ABI1（SSH3BP1; 603050）与小鼠 Mena 结合。结合分析表明，Mena 的 EVH1 结构域结合了 ABI1 的聚脯氨酸结构。内源性 MENA 和 ABL1（189980）与来自人胚胎肾细胞的表位标记的 ABI1 共沉淀。 ABI1 显着促进 ABL1 介导的 MENA 酪氨酸磷酸化，但不促进其他底物的酪氨酸磷酸化。突变分析表明 Mena 在 tyr296 上被酪氨酸磷酸化。

Philippar 等人使用大鼠腺癌细胞系和裸鼠（2008）发现 Mena 的 1 个剪接变体编码一种在细胞侵袭中发挥作用的亚型。他们将这种亚型称为 Mena（INV），可促进癌细胞在体内和体外的运动和侵袭性，并增加肺转移。 Mena 和 Mena（INV）均增强了 EGF（131530）诱导的膜突出并增加了肿瘤细胞的基质降解活性。然而，Mena（INV）更有效地驱动转移并使细胞对 EGF 依赖性膜突出和侵袭敏感。

▼ 基因结构

乌尔班内利等人（2006）确定 ENAH 基因包含 14 个主要外显子，长度约为 157 kb。选择性剪接导致包含更大形式的外显子 6、内含子 3 中的 2 个附加小外显子和/或外显子 7 中的附加内含子。

▼ 测绘

通过基因组序列分析，Urbanelli 等人（2006）将 ENAH 基因定位到染色体 1q42.13。他们将小鼠 Enah 基因定位到 1H5 号染色体上。