氧甾醇结合蛋白样蛋白 9； OSBPL9

OSBP 相关蛋白 9；ORP9

HGNC 批准的基因符号：OSBPL9

细胞遗传学位置：1p32.3 基因组坐标（GRCh38）：1:51,518,272-51,789,219（来自 NCBI）

▼ 说明

OSBPL9 是细胞内脂质受体 OSBP 家族的成员。有关 OSBP 的背景信息，请参见 OSBP2（606729）。

▼ 克隆与表达

莱托等人（2001）使用数据库搜索来识别编码 OSBPL9 的 cDNA，他们将其称为 ORP9。序列分析预测，558 个氨基酸的蛋白质含有约 400 个残基的 C 端甾醇结合（SB）结构域，其中包括 OSBP 基序（EQVSHHPP）。 OSBPL9 似乎属于不同的 OSBP 亚家族，并且在 SB 结构域中与其他 OSBP 具有相对较少的同源性。基因表达数据库分析表明，脑和脾脏中的表达量最高，其次是心脏、骨骼肌、胎盘和睾丸。

贾沃斯基等人（2001）克隆了多个 OSBP，包括 OSBPL9，它编码具有 N 端血小板-白细胞C 激酶底物同源（PH）结构域的 737 个氨基酸的蛋白质。 RT-PCR 分析检测到普遍存在的表达，在视网膜色素上皮和脉络膜中表达最高。

Wyles 和 Ridgway（2004）使用囊泡膜相关蛋白 VAPA（605703）作为人 B 细胞 cDNA 文库的酵母 2 杂交筛选中的诱饵，并通过人肾 cDNA 文库的 PCR 克隆了 OSBPL9 的 2 个剪接变体，他们将其命名为 ORP9L 和 ORP9S。全长 ORP9L 含有 723 个氨基酸，计算分子量为 81 kD，而 ORP9S 含有 558 个氨基酸，计算分子量为 63 kD。 ORP9S 缺少 ORP9L 的 N 端 PH 结构域；然而，这两种蛋白都含有 VAP 结合基序和 C 端 OSBP 同源结构域。 Northern印迹分析检测到一个主要的3-kb转录本在心脏、骨骼肌、肾脏和肝脏中高表达，而在脑、脾、胎盘和肺中表达较弱。使用变体特异性引物进行的 PCR 分析揭示了 ORP9S 和 ORP9L 在大多数组织中的可变且不协调的表达，并在肺、肝脏和胎盘中共表达。共聚焦和免疫荧光显微镜显示 ORP9L 集中在核周高尔基体中，并有一些弥散的细胞质染色。蛋白质印迹分析在脑、心脏、肾脏和肝脏中检测到表观质量为 95 kD 的 ORP9L，仅在肝脏中检测到表观质量为 70 至 75 kD 的 ORP9S。

▼ 基因功能

Wyles 和 Ridgway（2004）使用酵母 2-杂交和蛋白质 Pull-down 测定表明 VAPA 与 ORP9L 和 ORP9S 相互作用。突变分析表明，相互作用需要 VAPA 中的保守 N 端基序以及 ORP9S 和 ORP9S 的 VAP 结合区。免疫共沉淀分析显示，除了 VAPA 之外，针对 ORP9 的抗体还能抑制 VAPB（605704）。过表达的 ORP9L 与中国仓鼠卵巢细胞中的 Vapa 共定位，并引起内质网（ER）和 ER-高尔基体中间室的显着重组和/或空泡化；这些效应需要 ORP9L 通过其 VAP 结合域与 VAPA 相互作用。 ORP9S 的过度表达显示对这些区室的破坏要弱得多。

通过敲低和过表达研究，Ngo 和 Ridgway（2009）表明 ORP9L 在反高尔基体/反高尔基体网络（TGN）和 ER 之间分配，并且其位置依赖于其 PH 结构域和 VAP 结合结构域。在脂质覆盖测定中，ORP9L 的 PH 结构域主要结合磷脂酰肌醇 4-磷酸（PtdIns（4）P），并且 ORP9L 介导体外脂质体之间的 PtdIns（4）P 依赖性胆固醇转运。通过 RNA 干扰消耗 ORP9L 会导致高尔基体断裂、内质网囊泡转移受到抑制以及胆固醇在内体/溶酶体中积累。 ORP9S缺乏PH结构域，表现为显性失活变体，其过度表达导致蛋白质转运完全停止并抑制细胞生长。 Ngo 和 Ridgway（2009）得出结论，ORP9 通过介导 ER 和反式高尔基体/TGN 之间的甾醇转运来维持早期分泌途径的完整性。

▼ 基因结构

通过序列分析，Lehto 等人（2001）确定OSBPL9基因包含19个外显子。贾沃斯基等人（2001）发现它至少包含22个外显子。

Wyles 和 Ridgway（2004）确定 OSBPL9 基因包含 24 个外显子，其中包括位于外显子 4 和外显子 5 之间的替代外显子，他们将其称为“外显子 5-prime”。 ORP9S 转录物是由“外显子 5-prime”剪接产生的。到外显子 6，预计会导致翻译起始外显子 8。

▼ 测绘

通过序列分析，Lehto 等人。 Jaworski 等（2001）将 OSBPL9 基因对应到 1 号染色体（2001）改进了对染色体 1p34.2-p32.2 的定位。