ARIADNE RBR E3 泛素蛋白连接酶 1; ARIH1

ARIADNE，果蝇，同源物，1
HHARI
UBCH7-结合蛋白； UBCH7BP

HGNC 批准的基因符号：ARIH1

细胞遗传学位置：15q24.1 基因组坐标（GRCh38）：15:72,474,330-72,602,987（来自 NCBI）

▼ 克隆与表达

Moynihan 等人使用酵母 2-杂交系统分离与泛素结合酶 UBCH7（UBE2L3; 603721） 相互作用的蛋白质，然后筛选胎儿脑 cDNA 文库（1999） 获得了编码 ARIH1 的 cDNA，他们将其命名为 HHARI（果蝇 ariadne 的人类同源物）。序列分析预测，这个由 557 个氨基酸组成的蛋白与果蝇 ariadne 蛋白有 72% 的同一性，在其 N 末端包含一个高酸性结构域和一个聚（甘氨酸）区，随后是 3 个富含 cys/his 的基序（2 RING 指和 IBR，或“在 RING 指”域之间）位于其中心区域。 Northern 印迹分析检测到 2.2-、2.7-和 6.5-kb 转录本的普遍表达。最小的转录物除了在睾丸中表达较弱外，在睾丸中表达占主导地位。

▼ 基因功能

Moynihan 等人使用结合分析（1999） 表明，ARIH1 通过 RING 指及其 IBR 基序，至少​​与 UBCH7 的 C 端 54 个残基以及 UBCH8（UBE2L6; 603890） 结合。 ARIH1 不与 UBCH1 或 UBCH5 相关（UBE2D1；602961）。

阿德利等人（2001）证实HHARI与293T和COS-7细胞中的UBCH7相互作用并共定位，特别是在核周区域。突变分析表明，HHARI 的 RING1 和 IBR 结构域以及它们之间的 20 个氨基酸间隔区是相互作用所必需的。将 HHARI 的 RING1 结构域从 RING-HC 结构域更改为 RING-H2 结构域消除了与 UBCH7 的相互作用。此外，用 CBL（165360） 或 Parkin（602544） 的 RING 结构域替换 HHARI 的 RING1 结构域消除了与 UBCH7 的相互作用，尽管这些 RING 结构域之间具有高度同源性。

温泽尔等人（2011） 表明，与许多通过 RING 转移泛素的泛素结合酶（E2） 不同，UBCH7 缺乏与赖氨酸内在的泛素连接酶（E3） 孤立的反应性，这解释了它对 HECT 的偏好。尽管缺乏赖氨酸反应性，UBCH7 仍表现出与 E3 的环中环（RBR） 家族（包括 Parkin（602544） 和 HHARI）的活性。 RBR 存在于所有真核生物中，可调节翻译和免疫信号传导等过程。 RBR 包含一个典型的 C3HC4 型 RING，后跟 2 个保守的 cys/his 富锌结合域、in- Between-RING（IBR） 和 RING2 域，它们共同定义了这个 E3 家族。温泽尔等人（2011） 表明，RBR 的功能类似于 RING/HECT 杂合体：它们通过 RING 结构域结合 E2，但通过专性硫酯连接的泛素转移泛素，需要 RING2 中的保守半胱氨酸残基。温泽尔等人（2011） 得出的结论是，他们的结果定义了 UBCH7 的 E3 功能核心，UBCH7 是一种参与细胞增殖和免疫功能的 E2，并表明了整个 E3 类的新机制。

Tan 等人使用免疫沉淀分析（2003） 表明 HHARI 通过 HHARI 的 RING1 结构域与 4EHP（605895） 相互作用。 UBCH7也与HHARI结合，但UBCH7和4EHP与HHARI的结合是相互排斥的。 Western blot分析表明HHARI与4EHP的相互作用促进HEK293T细胞中4EHP的多泛素化。

▼ 基因结构

通过基因组序列分析，Tan 等人（2000） 确定 ARIH1 及其 98% 相同的小鼠同源物包含 14 个外显子。

▼ 测绘

通过辐射混合分析，Moynihan 等人（1999） 将 ARIH1 基因定位到染色体 15q。通过 FISH，Tan 等人（2000） 将 ARIH1 基因定位到 15q24。