FEM1 同系物 B; FEM1B

FEM1，线虫，同系物，B
凋亡途径中的 FEM1 样蛋白，α
F1A-α
KIAA0396

HGNC 批准的基因符号：FEM1B

细胞遗传学位置：15q23 基因组坐标（GRCh38）：15:68,277,745-68,295,862（来自 NCBI）

▼ 克隆与表达

Ishikawa 等人通过对从尺寸分级的脑 cDNA 文库中获得的克隆进行测序（1997）克隆了 FEM1B，他们将其命名为 KIAA0396。 RT-PCR 分析检测到所有检查的成体组织中 FEM1B 表达较低。

文图拉-霍尔曼等人（1998）克隆小鼠 Fem1b。推导的 627 个氨基酸蛋白与秀丽隐杆线虫 Fem1 具有 30% 的氨基酸同一性，与小鼠 Fem1a（613538）具有 39% 的氨基酸同一性。 Fem1b 具有 7 个 N 末端锚蛋白（参见 612641）重复序列和一个在 Fem1 同源物中高度保守的中心结构域。 Northern 印迹分析检测到 2.5 kb Fem1b 转录物在睾丸中大量表达，而在其他组织中几乎没有表达。在所有其他检查组织以及第 7 至 17 天之间的小鼠胚胎中均检测到 7.2-kb 转录物的较弱表达。第 17 天胚胎也强烈表达 1.9-kb Fem1b 转录物。动物园印迹分析在人类、猴子、大鼠、狗和牛中检测到了 Fem1b 直系同源物。

Chan 等人使用小鼠 Fas 的胞质结构域（TNFRSF6；134637）作为人 B 细胞 cDNA 文库的酵母 2 杂交筛选中的诱饵，然后进行数据库分析和人下丘脑 cDNA 文库的筛选（1999）克隆了 FEM1B，他们将其称为 F1A-α。推导的 627 个氨基酸蛋白质的计算分子量为 70 kD。陈等人（1999）还克隆了小鼠 F1a-α，它与人类 F1A-α 仅存在 8 个残基不同。与秀丽隐杆线虫 Fem1 一样，小鼠和人类 F1A-α 都有 6 个 N 末端锚蛋白重复序列。人体组织的 Northern 印迹分析检测到 5.5-和 7.5-kb 转录物的普遍表达。仅在睾丸中检测到 1.35 和 2.5 kb 的转录本。

Sun 和 Shieh（2009）报道，全长 627 个氨基酸的 FEM1B 蛋白在其 N 端半部包含 6 个锚蛋白重复序列，在其 C 端半部包含 von Hippel-Lindau（VHL; 608537）框。细胞分级实验表明，荧光标记的 FEM1B 主要与细胞质区室分开，但也在细胞核部分中检测到。

▼ 基因功能

陈等人（1999）发现 F1A-α 在人类细胞系中过度表达时会诱导细胞凋亡。突变分析显示，跨越 F1A-α 氨基酸 82 至 342 的区域（包括 5 个锚蛋白重复序列和紧邻这些重复序列的远端区域）对于 F1A-α 凋亡功能至关重要。 F1A-α 需要被半胱天冬酶-3（CASP3; 600636）样蛋白酶切割才能发挥其凋亡功能，并且 F1A-α 诱导的细胞凋亡可以被半胱天冬酶抑制剂阻断。 F1A-α 在 asp342 之后被切割，产生约 38 和 32 kD 的 F1A-α 片段。免疫沉淀分析显示，F1A-α 的蛋白水解裂解允许 F1A-α 片段与死亡受体（例如 Fas 和 TNFR1）结合（TNFRSF1A；191190）。 BCLXL（600039）和半胱天冬酶-9（CASP9; 602234）和 FADD（602457）的显性失活突变体可阻断 F1A-α 的凋亡功能，表明这些分子在 F1A-α 信号转导中发挥作用。

Sun 和 Shieh（2009）使用酵母 2 杂交分析表明，人 FEM1B 与复制检查点蛋白 CHK1（CHEK1; 603078）相互作用，并通过蛋白质下拉测定和 HCT116 人结肠癌细胞的免疫共沉淀分析证实了这种相互作用。。突变分析显示，FEM1B 中的 2 个孤立区域介导与 CHK1 的相互作用，一个位于 N 末端结构域，另一个位于中心区域。体外激酶测定将 FEM1B 鉴定为 CHK1 底物。通过喜树碱（CPT）药理学诱导复制应激增加了位于裂解 HCT116 细胞核部分的 FEM1B 比例。 FEM1B 的敲低会干扰对 CPT 诱导的复制应激的多种反应，包括 CHK1 的磷酸化和激活、RAD9（603761）的染色质关联、RAD17（603139）的磷酸化和 ATR（601215）的激活，从而导致 CHK1 介导的复制受损保护细胞免受复制压力。 Sun 和 Shieh（2009）得出结论，FEM1B 充当连接 CHK1 和 RAD9 的桥梁，从而促进复制应激诱导的检查点信号传导。

▼ 测绘

通过辐射混合分析，Ishikawa 等人（1997）将 FEM1B 基因对应到 15 号染色体。 Gross（2010）根据 FEM1B 序列（GenBank AF178632）与基因组序列（GRCh37）的比对，将 FEM1B 基因对应到染色体 15q23。

Ventura-Holman 等人使用种间回交分析（1998）将小鼠 Fem1b 基因定位到 9 号染色体。