钴胺素结合内在因子； CBLIF

胃内在因素； GIF
IF

HGNC 批准的基因符号：CBLIF

细胞遗传学位置：11q12.1 基因组坐标（GRCh38）：11:59,829,273-59,845,499（来自 NCBI）

▼ 克隆与表达

休伊特等人（1991）使用大鼠 cDNA 克隆作为探针分离出人胃内因子 cDNA 克隆。预测氨基酸序列的比较显示人类和大鼠 GIF 之间有 80% 的同一性。

▼ 测绘

通过对一组人/小鼠体细胞杂交体的分析，Hewitt 等人（1991）将 GIF 基因定位到人类 11 号染色体。基因组 DNA 的 Southern 分析表明存在单个人类 IF 基因。

通过荧光原位杂交和小鼠/仓鼠体细胞杂交分析，Fernandes 等人（1998）将Gif基因定位到小鼠19号染色体上。人类11q13和小鼠19号染色体之间的高度同线性表明人类GIF基因位于11q13。

▼ 生化特征

晶体结构

安徒生等人（2010）提出了在 3.3 埃分辨率下测定的 GIF-钴胺素和 cubilin（CUBN; 602997）-GIF-cubilin 结合区域之间复合物的晶体结构。该结构深入了解了几个 CUB（补体 C1r/C1s、Uegf、Bmp1）结构域如何共同充当模块化配体结合区域，以及 2 个相距较远的 CUB 结构域如何通过以钙依赖性方式结合 2 个 GIF 结构域来拥抱 cubilin 分子。这种双点模型为 cubilin 如何间接诱导配体-受体偶联提供了可能的解释。最后，钙结合 CUB 结构域和低密度脂蛋白受体（LDLR；606945）-A 型模块的比较表明，碱性配体精氨酸/赖氨酸残基与钙配位酸性天冬氨酸/谷氨酸的静电配对是一种常见的结构。钙依赖性配体-受体相互作用的主题。

▼ 分子遗传学

戈登等人（2004）对 5 名内因子缺乏症患者（IFD; 261000）以及其中 4 名患者的父母的 GIF 基因的所有外显子进行了测序。在所有受试者中均发现 GIF 基因的 1 个或两个拷贝中密码子 5（68A-G）的第 2 位发生单核苷酸取代，并在 2 名患者中观察到了其他变化。当 COS-7 细胞用含有正常或突变 cDNA 的质粒转染时，分泌的 GIF 蛋白具有相似的分泌速率和对胃蛋白酶降解的敏感性。三名受试者为错义突变纯合子，将密码子 5 从 CAG（谷氨酰胺）更改为 CGG（精氨酸）（Q5R；609342.0001）。 3 名受试者的突变为纯合子，2 名受试者为杂合子，其中 1 名显然是第五个密码子位置 1 和 2 处的复合杂合子。另一位位置 2 杂合的患者有 1 个未受影响的杂合亲本。大多数父母的这种碱基交换都是杂合的，证实了先天性 IF 缺陷的常染色体隐性遗传模式。编码 GIF 的 cDNA 在碱基对 g.68A-G 处发生突变。表达的 IF 的表观大小、分泌速率和对胃蛋白酶水解的敏感性与天然内因子相似。在来自德国和西班牙的 2 个对照人群中，68A-G 的等位基因频率分别为 0.067 和 0.038。戈登等人（2004）得出的结论是，Q5R 变异不是该表型的原因，而是与先天性 IF 缺陷相关，可以作为这种疾病遗传的标志。

Yassin 等人对一名患有严重贫血和钴胺素（Cbl）缺乏症的 11 岁女孩进行了研究（2004）鉴定出 GIF 基因编码区的 4 个碱基缺失（609342.0002）。骨髓显示出明显的巨幼细胞形态，席林试验表明无法吸收 Cbl，但可通过共同施用内因子来纠正。五胃泌素给药诱导胃酸分泌，但根据 Cbl 结合和其他测试确定，胃液缺乏内因子。

Tanner 等人发现，在 7 个家庭中，由于放射性钴胺素吸收测试结果不确定，曾被诊断为 Imerslund-Grasbeck 综合征（261100），但他们的 cubilin（CUBN; 602997）或 AMN（605799）基因突变呈阴性（2005）鉴定了 GIF 基因（609342.0002-609342.0007）中 6 个不同突变的纯合性。坦纳等人（2005）提出，CUBN、AMN 和 GIF 基因的突变分析可能是钴胺素吸收障碍的诊断方法，而不是放射性钴胺素吸收试验。

▼ 等位基因变异体（7 个精选示例）：

.0001 先天性内在因素缺陷，易感
CBLIF、GLN5ARG

戈登等人（2004）研究了 5 名先天性内因子缺乏症（IFD; 261000）患者，并在所有患者中发现了 GIF 基因密码子 5 中相同的变体 68A-G，将成熟蛋白在残基 5 处从谷氨酰胺改变为精氨酸。三名受试者对于该碱基交换，有 2 名是纯合的，2 名是杂合的。由于 GIF 基因突变并转染 COS-7 细胞产生的内因子的表观大小、分泌速率和对胃蛋白酶水解的敏感性与天然 GIF 相似，Gordon 等人（2004）的结论是，序列畸变不是表型的原因，但可以作为该疾病遗传的标志。在 2 个对照人群（德国人和西班牙人）中，第 68 位核苷酸从 A 变为 G 的频率分别为 0.067 和 0.038。

坦纳等人（2005）分析了一组 176 个无关对照中 GIF 基因的外显子 1，发现 68A 等位基因有 140 个纯合子，68G 等位基因有 6 个纯合子，以及 30 个杂合子，导致观察到的 68G 等位基因频率为 0.119。他们认为 68G 多态性的纯合性在 IFD 中没有临床意义。

.0002 内在因素缺乏
CBLIF、4-BP DEL、183GAAT

在一名患有严重贫血和钴胺素缺乏症的 11 岁女孩中（IFD; 261000），Yassin 等人（2004）鉴定出 GIF 基因外显子 2 中跨越位置 104 至 107 的 4 bp 缺失（c183_186delGAAT）作为遗传性内因子缺乏的基础。

Tanner 等人在非洲（几内亚比绍）家庭的一名患有遗传性内因子缺乏症的受影响成员中（2005）鉴定了 183delGAAT 突变的纯合性，导致密码子 61 发生移码，预计会导致功能丧失。父母的突变是杂合的。

.0003 内在因素缺乏
CBLIF、IVS1DS、G-A、+1

Tanner 等人在法国家庭的 2 名患有遗传性内因子缺乏症（IFD; 261000）的受影响成员中（2005）鉴定了 GIF 基因内含子 1 供体剪接位点 +1 处 G 到 A 转变的纯合性，预计会导致功能丧失。父母的突变是杂合的。

.0004 内在因素缺乏
CBLIF、IVS1AS、G-A、-1

Tanner 等人对 2 个患有遗传性内因子缺乏症（IFD; 261000）的科威特家庭的 7 名受影响成员进行了研究（2005）鉴定了 GIF 基因内含子 1 受体剪接位点 -1 处 G-A 转换的纯合性，该转换破坏了共有序列，并预计会导致功能丧失。父母的突变是杂合的。

.0005 内在因素缺乏
CBLIF、SER46LEU

Tanner 等人在土耳其家庭的 4 名患有遗传性内因子缺乏症（IFD; 261000）的受影响成员中（2005）鉴定了 GIF 基因外显子 2 中 137C-T 转变的纯合性，用亮氨酸（S46L）取代了保守的丝氨酸残基 46。父母的突变是杂合的。

.0006 内在因素缺乏
CBLIF，1-BP DEL 161A

Tanner 等人在患有遗传性内因子缺乏症（IFD; 261000）的土耳其家庭的受影响成员中（2005）鉴定出 GIF 基因外显子 2 中 1 bp 缺失（161delA）的纯合性，导致密码子 54 发生移码，预计会导致功能丧失。父母的突变是杂合的。

.0007 内在因素缺乏
CBLIF，1-BP INS，1175T

Tanner 等人在患有遗传性内因子缺乏症（IFD; 261000）的土耳其家庭的受影响成员中（2005）鉴定了 GIF 基因外显子 8 中 1 bp 插入（1175insT）的纯合性，导致密码子 393 发生移码，预计会导致功能丧失。父母的突变是杂合的。