CLASPIN; CLSPN

CLASPIN，爪蟾，同源物

HGNC 批准的基因符号：CLSPN

细胞遗传学位置：1p34.3 基因组坐标（GRCh38）：1:35,720,213-35,769,978（来自 NCBI）

▼ 克隆与表达

Kumagai 和 Dunphy（2000）鉴定了一种爪蟾蛋白，他们将其命名为 claspin，它与爪蟾 Chk1（CHEK1; 603078）结合。通过在 EST 数据库中搜索与 Xenopus claspin 相关的序列，他们鉴定出了人类同源物。人 claspin 的全长 cDNA 序列编码预测的 1,332 个氨基酸的多肽，与非洲爪蟾 claspin 49% 相同。

▼ 基因功能

Kumagai 和 Dunphy（2000）发现，在 DNA 模板存在的情况下，claspin 与爪蟾 Chk1 的结合高度升高，从而触发爪蟾卵提取物中细胞周期的检查点停滞。非洲爪蟾 Chk1 在检查点反应过程中被磷酸化，这种磷酸化导致非洲爪蟾 Chk1 的激活。鸡蛋提取物中的 claspin 的免疫耗竭消除了非洲爪蟾 Chk1 的磷酸化和激活。此外，claspin 耗尽的提取物无法响应 DNA 复制阻断而阻止细胞周期。这些发现表明 claspin 是非洲爪蟾 Chk1 的重要上游调节因子。

李等人（2003）表明非洲爪蟾 claspin 在 S 期以受调控的方式与染色质结合。 claspin 与染色质的结合取决于复制前复合物和 Cdc45（603465），但不取决于复制蛋白 A（RPA；179835）。这些依赖性表明 claspin 的结合发生在复制起点处 DNA 初始解旋前后。相比之下，Atr（601215）和 Rad17（603139）都需要 Rpa 才能与 DNA 结合。 Claspin、Atr 和 Rad17 均孤立地与染色质结合。这些发现表明 claspin 在 S 期 DNA 复制监测中发挥作用。

Chini 和 Chen（2003）观察到，人 claspin 是一种细胞周期调节蛋白，在 S/G2 期达到峰值。 Claspin 定位于细胞核，并在复制应激或其他类型的 DNA 损伤后与 CHK1 相关。 Claspin 因复制应激而被磷酸化，并且磷酸化似乎是 claspin 和 CHK1 之间的关联所必需的。此外，claspin 与检查点蛋白 ATR 和 RAD9 相互作用（603761）。由于 ATR 和 RAD9-RAD1（603153）-HUS1（603760）复合物参与 CHK1 激活，作者假设 claspin 可能是将这些分子结合在一起的接头。小干扰RNA下调claspin可抑制CHK1响应复制应激的激活，增强羟基脲诱导的染色质过早凝结，抑制紫外线诱导的DNA合成减少，并降低细胞存活率。

尤等人（2004）表明，在检查点响应期间，非洲爪蟾 claspin 在 thr906 上磷酸化，为 PLK1（602098）的非洲爪蟾同源物 Plx1 创建对接位点。这种相互作用促进 Plx1 对 ser934 上的 claspin 进行磷酸化。尤等人（2004）指出，在长时间的间期停滞后，尽管存在不完全复制的 DNA，但经 aphidicolin 处理的鸡蛋提取物通常会经历适应并进入有丝分裂。在此过程中，claspin 从染色质解离，Chk1 失活。相比之下，含有 thr906-to-ala 或 ser934-to-ala 取代的 claspin 突变体的阿非迪霉素处理的提取物无法进行适应。在这种适应缺陷的条件下，claspin 在染色质上大量积累，而 Chk1 的活性并未降低。这些结果表明 claspin 的 Plx1 依赖性失活导致 DNA 复制检查点反应的终止。

王等人（2006）发现磷酸化的 RAD17 与 claspin 相互作用并调节其磷酸化。 RAD17 的磷酸化对于不同的 DNA 损伤剂的反应是不同的，并且在羟基脲暴露引起的应激中尤其重要。

梅兰等人（2006）和 Peschiaroli 等人（2006）发现 claspin 在有丝分裂开始时被降解。 Claspin 降解是由其与 BTRC（603482）的相互作用和被 BTRC（603482）泛素化触发的。 BTRC-claspin 相互作用是磷酸化依赖性的，需要 claspin N 末端的 PLK1 活性和 BTRC 降解基序的完整性。梅兰等人（2006）发现，通过突变降解基序中的保守丝氨酸或通过 BTRC 敲低使 claspin 与 BTRC 解偶联，可以稳定有丝分裂中的 claspin、CHK1 去磷酸化受损以及从 DNA 损伤或复制应激造成的细胞周期停滞恢复期间延迟 G2/M 转变。。无法降解 claspin 使得在经过 G2/M 转变后暴露于 DNA 损伤的细胞中 CHK1 部分重新激活。佩斯基亚罗利等人（2006）发现无法结合 BTRC 的稳定 claspin 突变体的表达会延长 CHK1 的激活，从而减弱 DNA 复制应激反应的恢复并显着延迟进入有丝分裂。

▼ 测绘

Kumagai 和 Dunphy（2000）根据 claspin 序列（GenBank AF297866）和 1 号染色体克隆 RP4-555P23（GenBank AL139143）之间的序列相似性，将人类 claspin 基因定位到 1p34.3-p34.1。