锌指蛋白 363； ZNF363

p53 诱导蛋白，含环 H2 结构域； PIRH2
雄激素受体 N 端结构域相互作用蛋白； ARNIP

HGNC 批准的基因符号：RCHY1

细胞遗传学位置：4q21.1 基因组坐标（GRCh38）：4:75,479,033-75,514,715（来自 NCBI）

▼ 克隆与表达

Beitel 等人使用人雄激素受体（AR; 313700） 的 N 末端作为小鼠神经母细胞瘤/脊髓杂交细胞 cDNA 文库的酵母 2 杂交筛选中的诱饵（2002）克隆了 Znf363，他们将其命名为 Arnip。通过数据库分析和 PCR，他们从前列腺癌 cDNA 文库中克隆了人类 ARNIP。推导的小鼠和人类蛋白质含有 261 个氨基酸。 ARNIP 包含一个 RING-H2（C3H2C3） 指结构域，该结构域能够协调锌离子和几个假定的磷酸化位点。 ARNIP 与小鼠 Arnip 具有 90.4% 的氨基酸同一性，并且与其他几种脊椎动物和无脊椎动物物种的 Arnip 具有显着的同源性。 C3H2C3 RING 基序中的所有半胱氨酸和组氨酸残基在物种之间都是保守的。对小鼠组织的 Northern 印迹分析检测到约 1.7 kb 的主要转录物在睾丸中表达最高水平，在肾脏中表达中等水平，在所有其他检查组织中表达水平较低。在几种小鼠和人类细胞系中也检测到表达，其中一些还表达约 1.3 kb 的小转录本。

冷等人（2003） 克隆了小鼠 Znf363 基因，他们将其称为 Pirh2。 Pirh2 编码包含 RING-H2 结构域的蛋白质，具有 261 个氨基酸，预计分子量为 30 kD。富含半胱氨酸的 RING 基序由协调 2 个锌离子的 8 个半胱氨酸和组氨酸的共有序列定义。对各种成年小鼠组织进行 Northern 印迹分析，检测到 1.7 和 1.6 kb 的转录本。肝脏中的表达最高，其次是睾丸和心脏。在肌肉和脾脏中检测到较低水平。

▼ 基因功能

通过酵母 2-杂交分析，Beitel 等人（2002） 证实了 ARNIP 和 AR N 末端之间的相互作用。转染 COS-1 细胞后，荧光标记的小鼠 Arnip 表现出点状细胞质或核周分布。与人 AR 共转染导致 Arnip 重新分布，以匹配在不存在或存在合成的不可代谢雄激素的情况下 AR 的分布。 AR 和 Arnip 之间的相互作用不依赖于激素，Arnip 不影响 AR 配体结合动力学，Arnip 也不在反式激活测定中调节 AR。然而，AR N 端和 C 端之间的相互作用在 Arnip 存在下减少。在特定泛素结合酶 Ubc4-1 存在的情况下，Arnip 的 RING-H2 结构域在体外也可充当泛素蛋白连接酶（参见 602962）。 RING-H2 结构域中的 Cys145 替换为 ala，消除了泛素连接酶活性。

冷等人（2003） 确定小鼠 Pirh2 基因受 p53（191170） 调节，并编码具有内在泛素蛋白连接酶活性的蛋白质。研究发现 Pirh2 与 p53 存在物理相互作用，并孤立于 Mdm2 促进 p53 泛素化（164785）。 Pirh2 的表达降低了 p53 蛋白的水平，而内源性 Pirh2 表达的消除则增加了 p53 的水平。此外，Pirh2 抑制 p53 功能，包括 p53 依赖性反式激活和生长抑制。冷等人（2003） 得出结论，Pirh2 通过物理相互作用和泛素介导的蛋白水解作用参与 p53 功能的负调节。因此，Pirh2 与 Mdm2 一样，参与控制 p53 功能的自动调节反馈环路。

使用酵母 2-杂交分析、蛋白质下拉分析和免疫共沉淀分析，Zhang 等人（2005） 表明人类 NTKLBP1（GORAB; 607983） 直接与 PRIH2 相互作用。突变分析显示 NTKLBP1 的 C 端卷曲螺旋结构域与 PIRH2 的 N 端结构域相互作用。

▼ 基因结构

贝特尔等人（2002） 确定 ZNF363 基因包含 9 个外显子，跨度 32 kb。

▼ 测绘

通过基因组序列分析和 FISH，Beitel 等人（2002） 将 ZNF363 基因定位到染色体 4q21。