RNA 鸟嘌呤-7-甲基转移酶； RNMT

MET

HGNC 批准的基因符号：RNMT

细胞遗传学位置：18p11.21 基因组坐标（GRCh38）：18:13,726,673-13,764,556（来自 NCBI）

▼ 说明

在哺乳动物中，通过 2 种酶（双功能加帽酶 RNGTT（603512） 和 RNA 鸟嘌呤-7-甲基转移酶（RNMT））的连续作用，在新生前体 mRNA 上形成 5-prime 末端帽。 RNGTT 催化去除起始核苷酸的 γ-磷酸，并将 GMP 从 GTP 转移到所得的二磷酸末端。 RNMT 催化新形成末端的后续 N7 甲基化。末端 7-甲基鸟苷被帽结合蛋白识别，促进基因表达中的关键事件（Pillutla 等人总结，1998）。

▼ 克隆与表达

Pillutla 等人通过在 EST 数据库中搜索与酿酒酵母 RNA 鸟嘌呤-7-甲基转移酶同源的序列（1998） 鉴定了一种编码 RNMT 的人类 cDNA，他们将其称为 MET。预测的 476 个氨基酸 MET 蛋白包含几个已知甲基转移酶活性所需的保守基序。

Ishikawa 等人通过筛选人脑 cDNA 中编码大蛋白的 cDNA（1997） 鉴定了 KIAA0398，一种 RNMT cDNA。

冢本等人（1998） 分离了 3 个编码 RNMT 的人类 cDNA，他们将其命名为 HCMT1a、HCMT1b 和 HCMT1c，它们似乎是通过选择性剪接产生的。 HCMT1a和HCMT1b分别编码476和504个氨基酸的推导蛋白，并且仅在编码残基465之后的酶的C末端部分的区域不同。HCMT1c似乎编码与HCMT1a相同的多肽；然而，HCMT1c 的 3-prime 非编码区包含与 HCMT1a 和 HCMT1b 部分相对应的序列。 RT-PCR 检测了所有测试组织中 3 种 mRNA 的表达。

▼ 基因功能

皮卢特拉等人（1998） 发现重组人 MET 在体外表现出 RNA 鸟嘌呤-7-甲基转移酶活性，并与 RNGTT 和 RNA 聚合酶 II 的延伸形式形成三元复合物。

冢本等人（1998） 表明，在大肠杆菌中表达的重组人 HCMT1a 表现出 mRNA RNMT 活性，而重组 HCMT1b 则没有。

Gonatopoulos-Pournatzis 等人使用免疫沉淀分析（2011） 发现 RAM（FAM103A1; 614547） 在几种人类细胞系中与 RNMT1 相互作用。 HeLa 细胞提取物的凝胶过滤检测到约 200 kD 的高分子质量复合物中的 RAM 和 RNMT。未检测到 RAM 或 RNMT 单体。 RNA 带位移分析表明，RAM（而非 RNMT）与 RNA 而不是帽子结构相互作用。薄层色谱和定量磷酸成像表明，重组 RNMT（而非 RAM）以剂量依赖性方式催化帽甲基化。 RAM的添加增加了RNMT的帽甲基转移酶活性，并且等摩尔浓度的RAM和RNMT导致最高的帽甲基转移酶活性。突变分析显示，RAM 的氨基酸 1 至 55 与 RNMT 的甲基转移酶结构域相互作用，足以激活 RNMT 依赖性帽甲基化。 RAM 富含 asn 和 arg 的区域（氨基酸 56 至 90）结合 RNA。通过小干扰 RNA 敲低 HeLa 细胞中的 RAM，导致 RNMT 表达丧失和帽甲基转移酶活性丧失。 RAM 的敲低也会导致多核糖体的损失和蛋白质合成的减少，这与 mRNA 翻译的损失一致。 RNMT 的敲低导致 RAM 表达丧失，表明这两种蛋白质彼此稳定。戈纳托普洛斯-普纳齐斯等人（2011） 得出结论，RAM 对于 RNMT 帽甲基转移酶活性至关重要。

▼ 测绘

通过对辐射混合面板的分析，Pillutla 等人（1998）和石川等人。 Pillutla 等（1997） 将 RNMT 基因对应到 18 号染色体（1998） 使用荧光原位杂交将位置精确到 18p11.23-p11.22。