RAD50 相互作用蛋白 1； RINT1

HGNC 批准的基因符号：RINT1

细胞遗传学位置：7q22.3 基因组坐标（GRCh38）：7:105,532,201-105,567,677（来自 NCBI）

▼ 说明

RINT1 基因编码一种与 NRZ 复合体中的 ZW10（603954）和 NBAS（608025）相互作用的蛋白质，该蛋白参与 ER 和高尔基体之间囊泡转移过程中转移囊泡的对接和融合（Cousin 等人总结， 2019）。

▼ 克隆与表达

使用 RAD50（604040）的 C 末端片段作为人类 B 细胞 cDNA 文库的酵母 2 杂交筛选中的诱饵，Xiao 等人（2001）克隆 RINT1。推导的 792 个氨基酸的蛋白质具有多个亮氨酸七肽重复序列，形成 N 末端卷曲螺旋区域。人类细胞系的蛋白质印迹分析检测到 87-kD RINT1 双联体。进一步的实验表明，较高分子量的蛋白质可能是从上游非 AUG 起始密码子翻译而来的。

通过免疫组织化学分析，Lin 等人（2007）发现RINT1在内质网（ER）、高尔基体以及人HeLa和U2OS细胞的中心体中表达。

▼ 测绘

通过基因组序列分析，Xiao 等人（2001）将 RINT1 基因定位到染色体 7q22.1。

▼ 基因功能

使用截短的蛋白质，Xiao 等人（2001）发现 RAD50 的第二个亮氨酸七肽重复序列和 RINT1 的氨基酸 257 至 792 是 RAD50-RINT1 相互作用所必需的。 RINT1 仅在 S 晚期和 G2/M 期结合 RAD50，表达 N 末端截短的 RINT1 蛋白的人乳腺癌细胞表现出有缺陷的辐射诱导的 G2/M 检查点。肖等人（2001）得出结论，RINT1 可能在 DNA 损伤后的细胞周期控制中发挥作用。

孔等人（2006）发现 RBL2（180203）和 RINT1 对于人类成纤维细胞的端粒长度控制至关重要，任一蛋白质的丢失都会导致端粒更长。他们提出，RBL2 通过 RINT1 与 RAD50 形成复合物，以阻断不依赖于端粒酶的端粒延长。

Lin 等人利用 RNA 干扰（2007）发现 HeLa 细胞中 RINT1 的缺失导致中心粒周围定位的丧失和高尔基体的分散，同时与间期的中心体扩增同时发生。在同步细胞中，RINT1 缺陷导致有丝分裂进入时出现多种异常，包括早期有丝分裂期间的异常高尔基体动力学和末期重组缺陷、多个纺锤体极的形成以及染色体的错误分离。有丝分裂细胞由于压倒性的细胞缺陷而经历细胞死亡。林等人（2007）得出结论，RINT1 对于维持高尔基体和中心体的动态完整性至关重要。

转运囊泡与靶膜的对接和融合需要膜束缚因子和膜融合因子，或 SNARE（可溶性 N-乙基马来酰亚胺敏感因子附着蛋白受体）。荒崎等人（2013）指出，RINT1 作为 ER 系链复合体的一个组成部分，与 ER 上的 SNARE 相互作用。该束缚复合物还包括 ZW10（603954）和 NAG（NBAS; 608025）。 Arasaki 等人利用免疫沉淀和结合研究（2013）发现 RINT1 还与跨高尔基体网络（TGN）处的八聚体 COG 复合物（参见 COG1, 606973）相互作用，并且 COG 复合物在 TGN 处结合 SNARE。在 TGN，RINT1 直接与 COG 组件 COG1 和 SNARE 组件突触融合蛋白-16（STX16；603666）交互。与 ER 处的 ZW10 和 TGN 处的 COG1 相互作用需要 RINT1 相同的 N 端结构域，这表明存在一种转换机制。人类细胞系中 RINT1 的敲低抑制了内体到反高尔基体囊泡的转移，并导致 TGN 标记蛋白重新分布到内体。

▼ 分子遗传学

Cousin 等人在 3 名患有婴儿肝衰竭综合征 3（ILFS3; 618641）的无关儿童中进行了研究（2019）鉴定了 RINT1 基因（610089.0001-610089.0005）中的复合杂合突变。这些突变是通过全外显子组测序发现的，并通过桑格测序证实，与家族中的疾病分开。所有 3 名患者的 1 个等位基因上均携带 2 个剪接位点突变中的 1 个，预计将导致过早终止和功能丧失，而另一个等位基因要么是错义突变，要么是框内缺失，假设具有一些残留活性亚等位基因。与对照组相比，患者成纤维细胞的 RINT1 蛋白水平降低，高尔基体形态异常，碎片增加，提示存在转移缺陷。细胞质 LC3（601242）也增加，表明自噬体清除率降低。

▼ 动物模型

林等人（2007）发现 Rint1 的纯合缺失在小鼠胚胎第 5 至 6 天时是致命的，并导致离体囊胚生长失败。大约 81% 的 Rint1 +/- 小鼠在 24 个月的平均寿命期间死于各种器官的肿瘤。

▼ 等位基因变异体（5 个精选示例）：

.0001 婴儿肝衰竭综合征 3
RINT1、IVS9DS、G-A、+1

Cousin 等人在 2 名不相关的婴儿肝衰竭综合征 3（ILFS3; 618641）患者（患者 1 和患者 3）中进行了研究（2019）鉴定了 RINT1 基因中的复合杂合突变。两名患者的内含子 9（c.1333+1G-A, NM_021930）均携带 G 到 A 的转变，这在患者细胞中被证明会导致剪接位点缺陷、外显子 9 的跳跃以及导致早产的移码。终止和无义介导的 mRNA 衰减。每个患者的另一个等位基因均携带不同的突变：患者 1 在外显子 12 中存在符合读框 6 bp 的缺失（c.1853_1858del6; 610089.0002），导致 2 个保守残基（Val618_Lys619del）的缺失，而患者 3 的c. 外显子 9 中的 1109T-C 转换，导致保守残基处由 leu370 变为 pro（L370P；610089.0003）。导致 L370P 突变的核苷酸取代在论文正文中给出为 c.1109C-T。这些突变是通过全外显子组测序发现的，并通过桑格测序证实，与家族中的疾病分开。与对照组相比，患者成纤维细胞的 RINT1 蛋白水平降低，高尔基体形态异常（提示转移缺陷），细胞质 LC3（601242）增加，提示自噬体清除率降低。

.0002 婴儿肝衰竭综合症 3
RINT1、6-BP DEL、NT1853

讨论 RINT1 基因外显子 12 中的框内 6-bp 缺失（c.1853_1858del6, NM_021930），导致 2 个保守残基（Val618_Lys619del）的缺失，该残基在婴儿期患者的复合杂合状态中被发现Cousin 等人提出的肝衰竭综合征 3（ILFS3；618641）（2019），参见 610089.0001。

.0003 婴儿肝衰竭综合症 3
RINT1、LEU370PRO

用于讨论 RINT1 基因外显子 9 中的 c.1109T-C 转变（c.1109T-C，NM_021930），导致 leu370 到 pro（L370P）取代，这是在患者的复合杂合状态中发现的Cousin 等人患有婴儿肝衰竭综合征 3（ILFS3; 618641）（2019），参见 610089.0001。

.0004 婴儿肝衰竭综合征 3
RINT1、IVS9DS、G-T、+1

Cousin 等人对一名患有婴儿肝衰竭综合征 3（ILFS3; 618641）的 8 岁东亚裔女孩（患者 2）进行了研究（2019）鉴定了 RINT1 基因中的复合杂合突变：内含子 9（c.1333+1G-T，NM_021930）中的 G 到 T 颠换，预计会导致剪接位点缺陷、外显子 9 的跳跃、移码、提前终止以及外显子 8 中的 c.1102G-A 转换，导致保守残基处由 ala368 替换为 thr（A368T；610089.0005）。这些突变是通过全外显子组测序发现的，并通过桑格测序证实，与家族中的疾病分开。没有进行变异的功能研究和患者细胞的研究。

.0005 婴儿肝衰竭综合征 3
RINT1、ALA368THR

讨论 RINT1 基因外显子 8 中的 c.1102G-A 转换（c.1102G-A，NM_021930），导致 ala368 至 thr（A368T）取代，该取代在患者的复合杂合状态中发现Cousin 等人患有婴儿肝衰竭综合征 3（ILFS3; 618641）（2019），参见 610089.0001。