环指蛋白128； RNF128

与淋巴细胞无能相关的基因；GRAIL

HGNC 批准的基因符号：RNF128

细胞遗传学位置：Xq22.3 基因组坐标（GRCh38）：X:106,693,838-106,797,016（来自 NCBI）

▼ 说明

RNF128 是内吞途径中的 I 型跨膜锌环指蛋白，充当 E3 泛素连接酶（例如 UBE3A 601623）。RNF128 的表达限制 T 淋巴细胞激活诱导的白细胞介素 2（IL2；147680） 和 IL4（147780） 的产生（Anandasabapathy 等，2003）。

▼ 克隆与表达

Anandasabapathy 等人使用差异显示来检测 T 细胞无反应性诱导早期表达的转录本差异（2003） 鉴定了小鼠和人类 RNF128，他们将其命名为 GRAIL。Northern 印迹分析揭示了在通电但未静息或激活的小鼠 T 细胞克隆以及脑、肾、心脏、肝脏、卵巢、睾丸和胸腺中的表达。蛋白质印迹分析显示无反应性 T 细胞中表达 66 kD 蛋白。衣霉素处理将蛋白质降低至 46 kD，表明 GRAIL 被糖基化。预测的 428 个氨基酸的 GRAIL 蛋白与小鼠 Grail 97% 相同，并且包含锌环指、跨膜、卷曲螺旋和蛋白酶相关结构域。共聚焦免疫荧光和免疫组织化学分析显示，GRAIL 以不对称的核周点状方式表达，与内质网驻留 GRP78（HSPA5; 138120）、高尔基驻留 突触融合蛋白-5（STX5A; 603189） 以及晚期内体 GTPase RAB7 部分共定位（ 602298）。

▼ 基因功能

通过功能、结合和突变分析，Anandasabapathy 等人（2003） 证明GRAIL 的环指结构域与E2 泛素结合酶（例如UBE2N；603679）结合，在无源条件下充当E3 泛素连接酶，并介导细胞因子基因转录的抑制。他们得出的结论是，GRAIL 是诱导无反应表型的关键参与者，并且鉴于其保守性和广泛的表达模式，可能在改变不同细胞环境中的细胞命运中发挥关键作用。

通过酵母 2-杂交分析，Soares 等人（2004） 表明 GRAIL 与 OTB1 结合（608337）。尽管OTB1被发现具有去泛素化活性，但它未能使多泛素化的GRAIL去泛素化。免疫沉淀和共表达分析表明，OTB1（而非 OTB1 同工型 OTB1ARF1）与 USP8（603158） 的 C 端 UCH 催化结构域结合，形成与 GRAIL 的三分子复合物。苏亚雷斯等人（2004） 研究了表达 OTB1 替代形式的 T 细胞受体转基因小鼠的细胞。表达 OTB1 的细胞含有可忽略量的 Grail，增殖良好，并在抗原刺激后产生大量白细胞介素 2（IL2；147680）。相比之下，表达 OTB1ARF1 的细胞含有大量 Grail，且功能无能、增殖不良且不产生 Il2。苏亚雷斯等人（2004） 得出结论，T 细胞中 OTB1 和 OTB1ARF1 的平衡是调节 GRAIL 稳定性和次级淋巴器官免疫反应结果的重要因素。

Lin 等人使用免疫印迹分析（2009） 证明了 GRAIL 在幼鼠和人 CD4（186940） T 淋巴细胞中的表达。他们发现，CD4 T 细胞激活后，OTUB1 被表达，GRAIL 被降解，从而允许增殖继续进行。使用 CTLA4（123890）-Ig、抗 IL2 或雷帕霉素（所有这些药物均以 MTOR（FRAP1；601231）为靶点）预防 OTUB1 表达，可维持 GRAIL 并抑制 CD4 T 细胞增殖。林等人（2009） 得出结论，一条通路依次连接 CD28（186760） 共刺激、IL2 表达、IL2R（IL2RA; 147730） 信号传导和 MTOR 激活，作为通过调节 OTUB1 和 GRAIL 表达的幼稚 CD4 T 细胞增殖的重要要求。

▼ 测绘

Gross（2011） 根据 RNF128 序列（GenBank AF394689） 与基因组序列（GRCh37） 的比对，将 RNF128 基因对应到染色体 Xq22.3。