仅 F框 蛋白质 15； FBXO15

FBX15

HGNC 批准的基因符号：FBXO15

细胞遗传学位置：18q22.3 基因组坐标（GRCh38）：18:74,073,368-74,147,834（来自 NCBI）

▼ 说明

F框 蛋白家族的成员，例如 FBXO15，其特征在于具有大约 40 个氨基酸的 F框 基序。SCF 复合物由 SKP1（601434）、滞蛋白（参见 CUL1；603134）和 F框 蛋白形成，充当蛋白泛素连接酶。F框 蛋白通过 F 框与 SKP1 相互作用，并通过其他蛋白质相互作用域与泛素化靶标相互作用（Jin et al., 2004）。

▼ 克隆与表达

Winston 等人使用 SKP1 作为酵母 2 杂交筛选中的诱饵，并通过搜索 EST 数据库（1999） 鉴定了几种 F 框蛋白，包括小鼠 Fbx15。推导的蛋白质在其 N 末端一半包含一个 F 框。

通过 EST 数据库分析，Tokuzawa 等人（2003） 确定小鼠 Fbx15 主要在胚胎干（ES） 细胞和早期小鼠胚胎中表达。RT-PCR 检测到睾丸和卵巢中的表达，但未检测到任何其他成年小鼠组织中的表达。对小鼠 ES 细胞系进行蛋白质印迹分析，检测到 Fbx15 的表观分子质量为 55 kD。

▼ 基因功能

温斯顿等人（1999） 表明，体外翻译的小鼠 Fbxo15 在体外结合测定和转染的人胚胎肾细胞中与 SKP1 相互作用。

通过小鼠 ES 细胞系的蛋白质印迹分析，Tokuzawa 等人（2003） 确定 Fbx15 的表达在视黄酸诱导的分化过程中下调。ES 细胞中 Oct3/Oct4（PO5F1; 164177） 的失活也导致 Fbx15 表达快速消失。报告基因分析表明，这种 ES 细胞特异性表达需要位于转录起始位点上游的 18 bp 增强子元件。增强子包含一个八聚体样基序和一个相邻的 Sox（参见 SOX2；184429）结合基序。任一基序的删除或点突变都会消除增强子活性。当 Oct3/Oct4 和 Sox2 共表达时，18 bp 片段在小鼠成纤维细胞中变得活跃。凝胶迁移率变化测定证明了 Oct3/Oct4 和 Sox2 与 Fbx15 增强子序列的协同结合。

通过逆转录病毒介导引入 4 种转录因子 Oct3/4（164177）、Sox2（184429）、c-Myc（190080） 和 Klf4（602253），以及后续的转录因子，可以从小鼠成纤维细胞生成诱导多能干（iPS） 细胞Fbx15 表达的选择（Takahashi 和 Yamanaka，2006）。这些 iPS 细胞（以下称为 Fbx15 iPS 细胞）在形态、增殖和畸胎瘤形成方面与胚胎干（ES） 细胞相似。然而，它们在基因表达和DNA甲基化模式方面有所不同，并且无法产生成年嵌合体。冲田等人（2007） 表明，与 Fbx15 iPS 细胞相比，选择 Nanog（607937） 表达会导致具有种系活性的 iPS 细胞具有增加的 ES 细胞样基因表达和 DNA 甲基化模式。4 个转基因在 Nanog iPS 细胞中被强烈沉默。冲田等人（2007） 从 7 个 Nanog iPS 细胞克隆中获得了成体嵌合体，其中一个克隆通过种系传递到下一代。

韦尼格等人（2007） 孤立证明转录因子 Oct4、Sox2、c-Myc 和 Klf4 可以诱导体细胞基因组表观遗传重编程至胚胎多能状态。与 Fbx15 激活选择相反（Takahashi 和 Yamanaka，2006），重新激活内源性 Oct4（Oct4-neo） 或 Nanog（Nanog-neo） 位点的成纤维细胞孤立于饲养细胞生长，表达正常的 Oct4、Nanog 和 Sox2 RNA和蛋白质水平，通过许多标准在表观遗传学上与 ES 细胞相同，并且能够产生可行的嵌合体，有助于种​​系，并在注射到四倍体囊胚后产生可行的妊娠晚期胚胎。

▼ 测绘

金等人（2004） 指出 FBXO15 基因对应到染色体 18q22.3，小鼠 Fbxo15 基因对应到染色体 18E4.0。

▼ 动物模型

德泽等人（2003） 发现 Fbx15 缺失的纯合小鼠没有表现出明显的发育缺陷并且具有生育能力。Fbx15 null ES细胞表现出正常的形态、增殖和分化。