起源识别复合体，子单元 2; ORC2

起源识别复合体，亚基 2，酿酒酵母，
ORC2-LIKE 的同源物；ORC2L

HGNC 批准的基因符号：ORC2

细胞遗传学位置：2q33.1 基因组坐标（GRCh38）：2:200,908,977-200,963,660（来自 NCBI）

▼ 克隆与表达

起源识别复合物（ORC） 是在酿酒酵母中发现的一种多蛋白组合，它与 ARS（自主复制序列）共有序列结合，ARS 是一种 DNA 基序，是酵母复制起源的重要组成部分。ORC 结合也与某些酵母基因座的转录沉默有关。ORC 的一个组成部分是一种称为 ORC2 的 72 kD 蛋白质，其突变会破坏 HMR-E 沉默子的沉默，并导致细胞周期停滞在 G1 晚期和 DNA 复制起始之间。高原等人（1996） 从小鼠胚胎干细胞文库和人胎盘文库中分离出 cDNA，其预测的 577 个氨基酸蛋白与酵母序列相似。小鼠和人类的 ORC2L（ORC2 样）蛋白序列与酵母 ORC2 的相似度分别为 47.9% 和 46.3%。Northern 印迹显示睾丸中 ORC2L 表达水平最高。

加文等人（1995） 使用简并 PCR 克隆了酵母 ORC2 基因的人类同源物，并将其命名为 HsORC2。加文等人（1995） 表明 HsORC1（ORC1L; 601902） 和 HsORC2 基因产物可以免疫共沉淀，并得出结论，它们在体内形成复合物。

大谷等人（1996） 指出 HsORC2 的表达在细胞增殖的不同阶段不受调节。

▼ 测绘

高原等人（1996）通过荧光原位杂交将ORC2L基因定位到2q33。

▼ 基因功能

DNA 复制的启动需要在有丝分裂晚期和 G1 期组装复制前复合物（pre-RC），并依次加载 ORC、CDC6（602627）、CDT1（605525） 和 MCM2-7 复合物（参见 MCM2；116945）到复制起点。DNA 复制开始后，前 RC 被分解，CDT1 和 CDC6 从起点释放以防止再复制。Shen 等人使用人类细胞系（2012） 表明 ORCA（LRWD1; 615167） 是预 RC 组装和复制启动所必需的。通过小干扰 RNA 敲低 ORCA 会减少 ORC 和 MCM2-7 与染色质的关联，并导致细胞周期进展失败至 S 期。ORCA 在细胞周期中与不同的前 RC 成分动态相关：它在 G1 期与 ORC 和 CDT1 相关，在 S 期与 ORC（2-5） 和 CDT1 抑制剂 geminin（GMNN; 602842） 相关，在 S 期与 ORC（2- 5）、有丝分裂期间磷酸化的CDT1和磷酸化的geminin。ORCA 直接与 ORC2、CDT1 和 geminin 相互作用，ORC2 是 ORCA 稳定性所必需的。Geminin 的过度表达降低了 CDT1 对 ORCA 的亲和力，并且 ORCA 和 CDT1 之间关联的丧失似乎是在 G1 期末分解 pre-RC 的关键步骤。

▼ 分子遗传学

达尔等人（2001）在结肠癌细胞系中使用同源重组将编码ORC2基因起始子ATG的第三外显子替换为新霉素磷酸转移酶基因。这种亚等位性突变使 ORC2 蛋白水平降低了 90%。细胞周期的 G1 期延长，但对 MYC（190080） 或 β-珠蛋白（141900） 细胞复制起点的利用没有影响。携带ORC2突变的细胞无法支持带有Epstein-Barr病毒（EBV）oriP复制子的质粒的复制，并且可以通过重新引入ORC2来挽救这种缺陷。ORC2 与细胞中的 oriP 特异性相关，很可能是通过其与 EBV 核抗原 1 的相互作用实现的。Geminin（602842） 是一种哺乳动物复制起始复合物抑制剂，可抑制 oriP 的复制。因此，从病毒复制起点进行复制需要ORC和人类复制起始装置。