T框 转录因子 22； TBX22

T框22

HGNC 批准的基因符号：TBX22

细胞遗传学位置：Xq21.1 基因组坐标（GRCh38）：X:80,014,753-80,031,774（来自 NCBI）

▼ 克隆与表达

通过使用源自染色体 Xq12-q21 的基因组克隆序列进行计算机分析，Laugier-Anfossi 和 Villard（2000）鉴定了 TBX22 基因。TBX22编码一个400个氨基酸的蛋白质，N端区域包含一个DNA结合T框结构域，相对于其他已知的T框结构域，该结构域具有缺失20个氨基酸的独特特征。TBX22 转录本仅在人类胎儿 cDNA 文库中发现。

▼ 基因结构

TBX22 基因包含 7 个外显子，跨度为 8.7 kb（Laugier-Anfossi 和 Villard，2000）。

安德烈欧等人（2007）指出 TBX22 基因包含 8 个编码外显子，他们鉴定了一个新的非编码外显子，称为外显子 0，位于外显子 1 上游约 10 kb 处。外显子 0 的转录起始位点位于活性启动子的下游，驱动优先在人类胚胎组织中表达的 TBX22 转录本。

▼ 测绘

TBX22 基因的序列在源自染色体 Xq12-q21 的基因组克隆序列中被鉴定（Laugier-Anfossi 和 Villard，2000）。

▼ 基因功能

布雷布鲁克等人（2002）确定在人类早期发育中，TBX22 在腭架中表达，并且在升高到舌头上方的水平位置之前最高。在舌根系带区域也检测到了 TBX22 mRNA，该区域对应于 CPX 患者中所见的舌强直。作者鉴定了直系同源小鼠 Tbx22 基因，并记录了 E12.5-E17.5 小鼠胚胎中类似的表达模式。

安德烈欧等人（2007）发现 TBX22 作为转录阻遏蛋白，能够通过远端 TBX22 启动子自动调节其表达，类似于 TBX5（601620）。他们提供了 TBX22 经历 SUMO1（601912）缀合的直接证据，并表明这种修饰是转录抑制所必需的。TBX22 中的显性抑制结构域位于 N 末端区域，该区域还包含 SUMO1 附着的残基（lysine-63）。TBX22 特异性 T 框因子结合元件（TBE）是基于 AGGTGTGA 近乎完美副本的回文。

▼ 分子遗传学

布雷布鲁克等人（2001）在分离 X 连锁腭裂和舌强直的家族的 TBX22 基因中鉴定出 6 种不同的突变，包括错义、剪接位点和无义突变（参见 CPX；303400）。

布雷布鲁克等人（2002）报告了另外 2 例伴有舌强直的腭裂家族病例，其中存在新的错义和插入突变（300307.0007 和 300307.0008），每例都发生在 DNA 结合 T 框结构域内。

马卡诺等人（2004）对大量腭裂患者样本中的 TBX22 基因进行了分析，没有对遗传或舌强直进行预选。他们在北美和巴西队列的 200 名患者中发现了 5 名编码突变，另外还有 4 个假定的剪接位点突变。他们还鉴定了先前未报告的 CPX 家族中的突变，并对先前报告的家族病例进行了综合基因型/表型分析。男性经常同时表现出腭裂和舌强直（78%），女性携带者比例较小。家族内的突变可能导致仅腭裂、仅舌强直或两者，表明这些缺陷是表型谱的不同部分。

为了研究它们对 DNA 结合、亚细胞定位和转录活性的影响，Andreou 等人（2007）研究了 10 种不同的错义突变，这些突变在表型上相当于功能丧失等位基因。DNA 结合分析表明，在与 DNA 主链的预测接触点处或附近的错义突变会损害稳定的 DNA-蛋白质相互作用。作者表明，TBX22 具有转录抑制因子的功能，并且 TBX22 错义突变会导致抑制活性受损。未观察到对 TBX22 核定位的影响。安德烈欧等人（2007）发现 TBX22 是小型泛素样修饰剂 SUMO1（601912）的靶标，并且这种修饰是 TBX22 阻遏活性所必需的（SUMO1 基因的破坏导致口面裂（601912.0001）。）尽管赖氨酸 63 处的 SUMO 附着位点位于 T 框结构域的上游，但在所有致病性 X 连锁腭裂错义突变中始终发现 SUMO1 修饰缺失。这暗示了将 SUMO 结合丧失与 TBX22 功能丧失联系起来的一般机制。口面部裂以其复杂的病因和可变的外显率而闻名，涉及遗传和环境风险因素。苏酰化过程也受到类似环境压力的影响并深受其影响。因此，安德烈欧等人（2007）表明 SUMO 修饰可能代表调节正常颅面发育的共同途径，并参与孟德尔和特发性口面裂的发病机制。

Suphapeetiporn 等人在 53 名无亲属关系的泰国非综合征性腭裂患者中进行了研究（2007）鉴定了 4 名患者，每名患者的 TBX22 基因均具有不同的潜在致病性突变（参见例如 300307.0010）。其中两名患者被发现有这种疾病的家族史。作者得出结论，TBX22 突变是泰国人群非综合征性孤立性腭裂的一个原因。

Pauws 等人在 80 名孤立性腭裂患者、57 名腭裂/舌强直患者和 295 名对照患者中进行了研究（2009）发现 TBX22 基因启动子区域的 2 个 SNP 与舌强直性腭裂之间存在显着关联：rs7055763 的 -575A 等位基因赋予比值比（OR）为 5.3（p = 5.6 x 10（-6）） rs41307258 的 -144A 等位基因的 OR 为 6.2（p = 1.8 x 10（-5））。这些 SNP 与孤立性腭裂之间没有显着关联。鲍斯等人（2009）鉴定了 4 个启动子区单倍型，其中只有 1 个与腭裂伴舌强直相关。功能表达研究表明，包含 rs41307258 的 -144A 等位基因的风险单倍型导致启动子活性降低约 45%。鲍斯等人（2009）表明，这种风险单倍型与其他遗传和/或环境因素相结合，可能会导致表型变异，并为腭裂提供一种新的致病机制，特别是在舌强直患者中。

在一个患有 CHARGE 样阿布鲁佐-埃里克森综合征（ABERS; 302905）的家庭中，Pauws 等人（2013）分析了候选基因 TBX22，并鉴定了一个内含子序列变异（300307.0011），该变异与疾病分离，并且在 dbSNP 数据库或 539 条对照染色体中未发现。对具有经典 X 连锁腭裂表型的新患者的筛查在不相关的患者中鉴定出 2 个剪接位点突变（参见例如 300307.0004）。

Packham 和 Brook（2003）回顾了与 T框基因突变相关的人类疾病：Holt-Oram 综合征（HOS; 142900）、尺乳综合征（UMS; 181450）、DiGeorge 综合征（DGS; 188400）、 ACTH 缺乏（201400），腭裂伴舌强直。

▼ 动物模型

鲍斯等人（2009）培育了一只 Tbx22 缺失小鼠，该小鼠表现出粘膜下腭裂（SMCP）和舌强直，与人类表型相似，少数表现出明显的腭裂。口鼻膜也持续存在，或者在一些小鼠中部分破裂，导致后鼻孔闭锁。口鼻缺陷导致约 50% 的 Tbx 缺失小鼠产后死亡。后硬腭的膜内骨形成显着减少，导致与 SMCP 相关的经典切迹。由于成骨细胞成熟延迟，腭间质凝结后骨化严重减少。鲍斯等人（2009）表明 Tbx22 可能在后硬腭的成骨模式中发挥重要作用，而不是在腭架闭合中发挥主要作用。

▼ 等位基因变异体（11 个选定示例）：

.0001 腭裂伴强直性舌炎
TBX22，IVS6，GC，+1

在一个冰岛家庭中，腭裂和舌强直分离（参见 CPX；303400），Braybrook 等人（2001）在 TBX22 基因的内含子 6 的 +1 位置发现了 G 到 C 的颠换。在 21 名受影响的男性和 15 名携带者女性中发现了这种变异，但在 39 名未受影响的同胞、50 条不相关的冰岛染色体或 200 条非冰岛染色体中没有发现这种变异。四名不表达的女性为突变杂合子，这与之前在冰岛（18%）和不列颠哥伦比亚本土家庭（25%）的携带者女性中发现的非外显率一致。

.0002 腭裂伴舌吻强直
TBX22，THR260MET

在来自不列颠哥伦比亚省的一个本地亲属中，Braybrook 等人是最早描述的患有孟德尔模式固有的腭裂伴强舌症（见 303400）的亲属之一（Bjornsson 等，1989）（2001）在 TBX22 基因的外显子 5 的核苷酸 785 处鉴定出 C 到 T 的转变，导致密码子 260 处苏氨酸到甲硫氨酸的取代。

.0003 腭裂伴舌吻强直
TBX22、GLY118CYS

Braybrook 等人在来自加拿大马尼托巴省的一个伴有舌强直的腭裂家庭中（参见 303400）（2001）鉴定了 TBX22 基因第 359 位核苷酸处的 G-T 颠换，导致密码子 118 处甘氨酸变为半胱氨酸。突变位置发生在 T框结构域内进化保守残基处存在于所有其他含有 T 框的基因中，因此可能导致 DNA 结合受损。

.0004 腭裂伴强直性舌炎
TBX22，IVS4DS，GA，+1

在一个患有腭裂并舌强直的巴西家庭中（参见 303400），Braybrook 等人（2001）在 TBX22 基因内含子 4 的外显子/内含子剪接处 GT 处鉴定出 G 到 A 的转变。

Marcano 等人在来自 X 连锁腭裂的第 4 代大家族的受影响个体中（2004）鉴定出TBX22基因中的IVS4+1G-A剪接位点突变；在 200 多条对照染色体中未检测到该变异。

在一个分离出 X 连锁腭裂的家族先证者中，后来证明代表了 Marcano 等人最初研究的家族的一个分支（2004），Pauws 等人（2013）鉴定了 IVS4+1G-A 突变。先证者患有粘膜下腭裂、舌强直、言语和语言发育迟缓以及左侧咽鼓管功能障碍。他的携带者母亲患有强直舌症，这种病在大家庭中广泛存在。家族中受影响的男性也有粘膜下或软腭裂。RT-PCR产物分析表明，该突变导致正确的供体剪接完全废除，转而采用从头剪接位点，从而导致框外剪接产物的产生，预计如果成功剪接至外显子5，该产物将提前终止。

.0005 腭裂伴强直性舌炎
TBX22，1-BP DEL，671C

在一个患有腭裂并舌强直的巴西家庭中（参见 303400），Braybrook 等人（2001）鉴定出 TBX22 基因第 671 位核苷酸处的胞嘧啶缺失，导致移码，在 4 个残基内引入提前终止密码子。

.0006 腭裂伴粘舌症
TBX22、GLU56TER

在一个伴有舌强直的腭裂家庭中（参见 303400），Braybrook 等人（2001）鉴定了 TBX22 基因第 173 位核苷酸处的 G-T 颠换，导致谷氨酸转变为残基 56 处的终止密码子。

.0007 腭裂伴粘舌症
TBX22、LEU214PRO

在一个患有舌强直（伴有或不伴有腭裂）的 3 代家庭中（参见 303400），Braybrook 等人（2002）在 TBX22 基因的第 641 位核苷酸处发现了 T 到 C 的转变，导致 DNA 结合 T 框基序中的亮氨酸 214 转化为脯氨酸（L214P）。

.0008 腭裂伴强直性舌炎
TBX22，3-BP DUP，583GCT

在一个患有舌强直（伴有或不伴有腭裂）的 4 代家庭中（参见 303400），Braybrook 等人（2002）在核苷酸 583 处鉴定出 GCT 的 3 bp 重复，导致在 DNA 结合 T 框结构域中的丝氨酸 194 之后插入一个额外的丝氨酸残基。

.0009 腭裂伴粘舌症
TBX22，ASN264TYR

在患有或不患有腭裂的强舌症家庭的受影响成员中（参见 303400），Marcano 等人（2004）在 TBX22 基因的外显子 5 中发现了 786A-T 颠换，导致 asn264 到 tyr（N264Y）突变。先证者仅患有腭裂，但母亲存在舌强直，提示腭裂具有典型的半显性 X 连锁遗传。

.0010 腭裂，X 连锁
TBX22，1-BP DEL，1252G

Suphapeetiporn 等人在一名患有软腭裂的泰国女孩（303400）中（2007）在 TBX22 基因中发现了 1 bp 缺失（1252delG），导致移码和过早终止。预计截短的蛋白质将保留 T框结构域，但突变可能会导致 mRNA 不稳定。她的父亲也携带这种突变，患有双裂悬雍垂。据报道，一位叔叔患有孤立性腭裂。

.0011 阿布鲁佐-埃里克森综合征（1 系列）
TBX22、IVS3AS、TA、-5

Pauws 等人最初由 Abruzzo 和 Erickson（1977）描述，来自患有 Abruzzo-Erickson 综合征（ABERS; 302905）家庭的 2 名受影响的兄弟和一名受影响的叔叔（2013）在外显子 4 的保守剪接受体共有序列内，鉴定了 TBX22 基因的内含子 3（c.593-5T-A）中的 -5T-A 颠换。该突变以杂合性存在于专性携带者母亲中，并且在 dbSNP 数据库或 539 条对照染色体中未发现。体外 mRNA 剪接测定显示，当使用突变构建体时，野生型构建体生成的 471 bp 片段显着减少或缺失。此外，RT-PCR产物的克隆序列分析表明，c.593-5T-A突变导致最上游隐性剪接位点产物显着增加，而几乎没有检测到野生型产物，表明该突变削弱或消除了野生型外显子4的受体剪接位点。