中心体蛋白,85-KD; CEP85
卷曲螺旋结构域含有蛋白质 21;CCDC21
HGNC 批准的基因符号:CEP85
细胞遗传学定位:1p36.11 基因组坐标(GRCh38):1:26,234,200-26,278,808(来自 NCBI)
▼ 说明
CEP85 是一种中心体蛋白,通过与 NEK2(604043) 相互作用来调节中心体分离(Chen et al., 2015),并通过与 STIL(181590) 相互作用来调节中心粒复制(Liu et al., 2018)。
▼ 克隆与表达
Jakobsen 等人使用互补蛋白质组学方法(2011) 鉴定出人类 CEP85。在转染的人类细胞中,荧光标记的 CEP85 定位于纺锤体极的中心体。免疫荧光显微镜进一步显示,CEP85 弱定位于间期中心体,更清晰地定位于核仁。进入有丝分裂后,CEP85 从核仁重新定位并积聚在纺锤体极处。
陈等人(2015) 报道称,762 个氨基酸的人 CEP85 蛋白含有 2 个卷曲螺旋结构域。CEP85 的直系同源物在真核生物中非常保守,包括小鼠、非洲爪蟾、斑马鱼和鸡。Western blot 分析表明 CEP85 在人类细胞系中普遍表达。HeLa 细胞的内源性 CEP85 水平在整个细胞周期中保持恒定。CEP85 定位于转染的 U2OS 细胞的中心体,中心体定位需要氨基酸 434 至 476。
▼ 测绘
Gross(2020) 根据 CEP85 序列(GenBank BC064528) 与基因组序列(GRCh38) 的比对,将 CEP85 基因对应到染色体 1p36.11。
▼ 基因功能
陈等人(2015) 发现 CEP85 与转染的人类细胞中心粒近端的 NEK2(NEK2A) 亚型 A 相互作用并共定位。这种相互作用需要 NEK2A 的 C 端区域和 CEP85 的氨基酸 257 至 433,作者将其称为 NEK2A 结合域(NBD)。NEK2A 和 CEP85 形成了包围母体和子体中心粒近端的颗粒网状结构。CEP85 作为 NEK2A 的拮抗剂发挥作用,并抑制中心体分离中的 NEK2A 激酶活性。NBD 和 CEP85 的中心体定位域都是有效抑制人类细胞中心体分离所必需的。
刘等人(2018) 发现 CEP85 通过直接与 STIL 相互作用来正向调节中心粒的复制。与 CEP85 的相互作用对于 STIL 在中心体的募集和稳定性以及随后在中心粒复制过程中激活 PLK4(605031) 至关重要。CEP85 和 STIL 的相互作用是通过 STIL 的 N 端结构域和 CEP85 的 C 端卷曲螺旋结构域促进的。X 射线晶体学和突变分析表明,蛋白质通过高度保守的界面相互作用,显示出 2:2 的结合比,STIL 的 1 个 N 末端结构域与平行 CEP85 二聚体的 2 条卷曲螺旋链中的每一条结合。