富含半胱氨酸的分泌蛋白 3; CRISP3
- 特定颗粒蛋白,28-KD; SGP28
HGNC 批准的基因符号:CRISP3
细胞遗传学定位:6p12.3 基因组坐标(GRCh38):6:49,727,376-49,744,388(来自 NCBI)
▼ 说明
哺乳动物 CRISP 家族的成员,例如 CRISP3,其特征在于其 16 个半胱氨酸残基形成 8 个分子内二硫键。 CRISP3 似乎仅存在于人类、马和小鼠中(Udby 等,2005)。
▼ 克隆与表达
凯尔德森等人(1996) 从人中性粒细胞的胞吐物质中分离出 CRISP3 蛋白,他们将其称为 SGP28,并从人骨髓 cDNA 文库中获得了全长 cDNA。 推导的蛋白质含有 245 个氨基酸,富含半胱氨酸。 去糖基化实验表明 CRISP3 可能在 asp239 处被糖基化。 推导的蛋白质的N端19个氨基酸被预测为信号肽。 然而,纯化蛋白的 N 端氨基酸测序表明,在去除信号肽后,在包装到颗粒中之前可能会发生翻译后 N 端修剪 13 个氨基酸。 CRISP3 蛋白与人 TPX1(CRISP2; 187430) 以及大鼠和小鼠精子包被糖蛋白 Aeg(参见 CRISP1, 601193) 具有显着相似性。 人中性粒细胞的亚细胞分离证明 CRISP3 定位于特定颗粒中。
Kratzschmar 等人孤立地(1996) 从人类睾丸 cDNA 文库中克隆了 CRISP3。 推导的 245 个氨基酸的蛋白质包含 20 个氨基酸的 N 端信号肽,产生 225 个氨基酸的成熟蛋白质。 成熟的 CRISP3 含有 16 个半胱氨酸(所有这些半胱氨酸在 CRISP 家族成员中都是保守的)和 1 个潜在的 N-糖基化位点。 人类 CRISP3 与人类 CRISP2 关系最密切,氨基酸同一性为 72%。 Northern blot分析显示,人类CRISP3转录物分布广泛,主要存在于唾液腺、胰腺和前列腺中,附睾、卵巢、胸腺、结肠和睾丸中含量较少。
Udby 等人使用免疫印迹分析和 ELISA(2005)证明人CRISP3在精浆溶液中是游离的并且与前列腺体不相关。 去糖基化实验证实精浆中的CRISP3是一种N联糖蛋白。 免疫组织化学和原位杂交显示 CRISP3 在整个人类男性生殖道的分泌上皮细胞中表达,其中在附睾尾和输精管壶腹中表达尤其高。 进一步检查表明,附睾下游器官很可能是精浆CRISP3的主要来源。
▼ 基因功能
莱恩等人(2007) 鉴定了人类 CRISP3 基因中的雄激素反应元件。 定量 RT-PCR 分析显示,在补充有脱氢表雄酮(DHEA) 的培养物中,下颌下腺细胞中 CRISP3 上调。 此外,DHEA 治疗增加了人类唇唾液腺中 CRISP3 mRNA 的水平。
▼ 生化特征
CRISP3 与 β-微精蛋白(MSMB; 157145)(一种 10 kD 精浆蛋白)形成紧密复合物。 Ghasriani 等人使用多维 NMR 分析(2009) 研究了人类 MSMB 和 CRISP3 之间的相互作用。 他们发现,只有 MSMB 的一侧(包括 β 链 1、4、5 和 8)受到复合物形成的影响,表明 β 链 1 和 8 形成了主要的结合表面。 基于这些数据和作为 CRISP3 模型的 triflin 晶体结构,作者提出了 MSMB-CRISP3 复合物的模型。
▼ 测绘
Gross(2018) 根据 CRISP3 序列(GenBank BC069580) 与基因组序列(GRCh38) 的比对,将 CRISP3 基因对应到染色体 6p12.3。