富含亮氨酸重复序列和 WD 重复序列结构域蛋白 1； LRWD1

起源识别复合物相关蛋白； ORCA
兽人相关蛋白质
着丝粒蛋白 33

HGNC 批准的基因符号：LRWD1

细胞遗传学位置：7q22.1 基因组坐标（GRCh38）：7:102,464,984-102,473,168（来自 NCBI）

▼ 说明

LRWD1 似乎在复制前复合物的组装和 DNA 复制的启动中发挥着关键作用（Shen et al., 2012）。 LRWD1 也可能在精子发生过程中充当中心体蛋白（Teng et al., 2010）。

▼ 克隆与表达

Lin 等人使用微阵列分析来识别精母细胞成熟停滞（参见 270960）或仅支持细胞综合征（参见 400042）男性睾丸中下调的基因，然后进行数据库分析（2006）鉴定了 LRWD1。推导的 647 个氨基酸的蛋白质包含富含亮氨酸的重复结构域和色氨酸-天冬氨酸（WD）重复结构域。 RT-PCR 对 8 种人体组织仅检测到 LRWD1 在睾丸中表达。在成年小鼠中也检测到类似的表达。在小鼠睾丸中，Lrwd1 于出生后第 35 天开始表达。

滕等人（2010）从睾丸 cDNA 文库中克隆了小鼠 Lrwd1。推导的 648 个氨基酸蛋白具有 N 端富含亮氨酸的重复区域和 4 个 C 端 WD40 结构域。小鼠和人类 LRWD1 具有 81.4% 的氨基酸一致性。 Northern 和 Western blot 分析仅在小鼠睾丸中检测到 Lrwd1。该蛋白质的表观分子量约为71 kD。小鼠睾丸的免疫组织化学分析显示精母细胞和精细胞中的细胞质 Lrwd1 染色。在精子中，Lrwd1 集中在中心体所在的头颈区域。即使在成熟的精子中，Lrwd1 在失去可识别的中心体后仍保留其在头颈区域的定位。在小鼠精母细胞系中，在整个细胞周期中，Lrwd1 与 γ-微管蛋白（参见 191135）共定位于中心体区域。

▼ 基因功能

Teng 等人使用小鼠精母细胞的相互免疫沉淀分析（2010）发现 Lrwd1 直接与 γ-微管蛋白相互作用。

DNA 复制的启动需要在有丝分裂晚期和 G1 中组装复制前复合物（pre-RC），并依次加载起点识别复合物（参见 ORC1；601902）、CDC6（602627）、CDT1（605525）和 MCM2 -7 复合体（参见 MCM2；116945）到复制起点。 DNA 复制开始后，前 RC 被分解，CDT1 和 CDC6 从起点释放以防止再复制。 Shen 等人使用人类细胞系（2012）表明 LRWD1（他们称之为 ORCA）是预 RC 组装和复制启动所必需的。通过小干扰 RNA 敲低 ORCA 会减少 ORC 和 MCM2-7 与染色质的关联，并导致细胞周期进展失败至 S 期。 ORCA 在细胞周期中与不同的前 RC 成分动态相关：它在 G1 期与 ORC 和 CDT1 相关，在 S 期与 ORC（2-5）和 CDT1 抑制剂 geminin（GMNN; 602842）相关，在 S 期与 ORC（2- 5）、有丝分裂期间磷酸化的CDT1和磷酸化的geminin。 ORCA 直接与 ORC2（601182）、CDT1 和 geminin 相互作用，ORC2 是 ORCA 稳定性所必需的。 Geminin 的过度表达降低了 CDT1 对 ORCA 的亲和力，并且 ORCA 和 CDT1 之间关联的丧失似乎是在 G1 期末分解 pre-RC 的关键步骤。

▼ 基因结构

林等人（2006）确定 LRWD1 基因包含至少 14 个外显子，跨度约为 8.3 kb。

▼ 测绘

通过基因组序列分析，Lin 等人（2006）将 LRWD1 基因定位到染色体 7q22.1。他们将小鼠 Lrwd1 基因定位到染色体 5G2。