A 解整合素和金属蛋白酶结构域 8； ADAM8

人类白细胞分化抗原；CD156

HGNC 批准的基因符号：ADAM8

细胞遗传学位置：10q26.3 基因组坐标（GRCh38）：10:133,262,423-133,276,868（来自 NCBI）

▼ 描述

ADAM 家族的成员，例如 ADAM8，是参与细胞外基质重塑、细胞迁移和膜结合信号分子加工的细胞表面蛋白酶。它们的特征是解整合素和金属蛋白酶结构域，分别赋予粘合特性和蛋白水解活性（Hernandez 等人的总结，2010）。

▼ 克隆与表达

吉山等人（1997）使用小鼠 Adam8 cDNA（Yoshida 等，1990）作为探针，从人粒细胞和细胞系 THP-1 cDNA 文库中分离出 ADAM8 cDNA。ADAM8的核苷酸序列与Adam8的核苷酸序列显示出65.6％的同源性。Northern 印迹分析表明，ADAM8 在单核细胞、粒细胞、巨噬细胞和 B 细胞系中以 3.1 kb 的信息表达，但在 T 细胞系中不表达。ADAM8 编码的 824 个氨基酸的蛋白质与 Adam8 具有 61.7% 的同一性，并包含预测的 16 个氨基酸信号肽、637 个氨基酸胞外区、25 个氨基酸跨膜区和 146 个氨基酸胞质区。ADAM8 的胞外区域显示出与出血性蛇毒蛋白显着的氨基酸序列同源性，包括金属蛋白酶和解整合素结构域。

埃尔南德斯等人（2010）表明全长 ADAM8 包含 N 端信号肽，随后是可切割的前结构域、金属蛋白酶结构域、解整合素结构域、富含半胱氨酸的区域、EGF（131530）样结构域、跨膜结构域、和细胞质C末端尾部。ADAM8 的胞外域中还有 4 个潜在的 N-糖基化位点。Hernandez 等人使用半定量 RT-PCR（2010）在 H460 和 A549 人肺肿瘤细胞系和原代正常支气管上皮细胞中鉴定出 2 个 ADAM8 剪接变体，命名为 δ-18a 和 δ-14-prime。δ-18a 变体包括替代外显子 18a。它编码一个推导的 745 个氨基酸的蛋白质，该蛋白质在 EGF 样结构域后与全长 ADAM8 不同，并包含一个额外的 C 端 N 糖基化位点。变体 δ-14-prime 保留内含子 14，它引入了移码和过早终止密码子。它编码一个推导的 539 个氨基酸的蛋白质，该蛋白质在终止前与富含半胱氨酸的结构域中的全长 ADAM8 不同。δ-14-prime 同工型保留了全长 ADAM8 中发现的 3 个 N-糖基化位点。δ-18a 和 δ-14-prime 都不具有跨膜结构域。蛋白质印迹分析检测到全长 ADAM8 的加工后和催化活性形式，表观分子质量约为 90 kD。检测到 ADAM8 的分泌形式，表观分子质量约为 65 kD。转染H460和A549细胞后，δ-18a和δ-14-prime的表观分子质量分别约为70和68 kD。它编码一个推导的 539 个氨基酸的蛋白质，该蛋白质在终止前与富含半胱氨酸的结构域中的全长 ADAM8 不同。δ-14-prime 同工型保留了全长 ADAM8 中发现的 3 个 N-糖基化位点。δ-18a 和 δ-14-prime 都不具有跨膜结构域。蛋白质印迹分析检测到全长 ADAM8 的加工后和催化活性形式，表观分子质量约为 90 kD。检测到 ADAM8 的分泌形式，表观分子质量约为 65 kD。转染H460和A549细胞后，δ-18a和δ-14-prime的表观分子质量分别约为70和68 kD。它编码一个推导的 539 个氨基酸的蛋白质，该蛋白质在终止前与富含半胱氨酸的结构域中的全长 ADAM8 不同。δ-14-prime 同种型保留了全长 ADAM8 中发现的 3 个 N-糖基化位点。δ-18a 和 δ-14-prime 都不具有跨膜结构域。蛋白质印迹分析检测到全长 ADAM8 的加工后和催化活性形式，表观分子质量约为 90 kD。检测到 ADAM8 的分泌形式，表观分子质量约为 65 kD。转染H460和A549细胞后，δ-18a和δ-14-prime的表观分子质量分别约为70和68 kD。蛋白质印迹分析检测到全长 ADAM8 的加工后和催化活性形式，表观分子质量约为 90 kD。检测到 ADAM8 的分泌形式，表观分子质量约为 65 kD。转染H460和A549细胞后，δ-18a和δ-14-prime的表观分子质量分别约为70和68 kD。蛋白质印迹分析检测到全长 ADAM8 的加工后和催化活性形式，表观分子质量约为 90 kD。检测到 ADAM8 的分泌形式，表观分子质量约为 65 kD。转染H460和A549细胞后，δ-18a和δ-14-prime的表观分子质量分别约为70和68 kD。

使用原位杂交，Kelly 等人（2005）在胚胎第 8.5 天检测到 Adam8 在蜕膜和滋养层衍生物中的母体细胞中表达，但在胚胎本身中没有表达。在后期，Adam8在胚胎组织中以瞬时和阶段特异性的方式表达，主要在中枢神经系统、性腺、软骨原基和上皮、邻近大血管的组织以及淋巴管内皮细胞中。成年 Adam8 +/- 小鼠的 X-gal 染色显示肺、唾液腺和肾上皮细胞中的表达。

▼ 基因功能

Higuchi 等人（1996）发现表达缺乏跨膜和细胞质区域的可溶性 Adam8 的转基因小鼠在接触性超敏反应中表现出增强的炎症反应，表明 Adam8 在骨髓单核细胞的浸润中发挥作用。

Hernandez 等人使用实时 PCR（2010）发现与正常支气管上皮细胞相比，小细胞肺癌细胞系中 δ-14-prime 的表达上调。δ-18a 在某些腺癌细胞系中表达上调。全长 ADAM8、δ-18a 或 δ-14-prime 的转染增加了 H460 和 A549 细胞对化学引诱剂的侵袭性，而通过小干扰 RNA 敲低 ADAM8 则降低了侵袭性。从过度表达 δ-14-prime 的细胞（而非过度表达 δ-18a 或全长 ADAM8）收集的条件培养基可诱导小鼠骨髓巨噬细胞中的破骨细胞分化。δ-14-prime 还增加了促破骨细胞因子的分泌。

▼ 基因结构

Hernandez 等人（2010）确定 ADAM8 基因包含 24 个编码外显子，包括替代外显子 18a。

▼

通过荧光原位杂交作图，Yoshiyama 等人（1997）将 ADAM8 定位于染色体 10q26.3，该区域与包含 Adam8 的小鼠 7 号染色体区域同线性（Higuchi 等人，1996）。

▼ 动物模型

Kelly 等人（2005）发现敲除 Adam8 对小鼠没有明显影响。