TOPBP1-交互检查点和复制调节蛋白; TICRR

15 号染色体开放解读码组 42；C15ORF42
TRESLIN
SLD3，酵母，同源物

HGNC 批准的基因符号：TICRR

细胞遗传学位置：15q26.1 基因组坐标（GRCh38）：15:89,575,469-89,628,023（来自 NCBI）

▼ 说明

Treslin 参与 DNA 复制的启动（Kumagai 等，2010）。

▼ 克隆与表达

Kumagai 等人通过在数据库中搜索与 Xenopus Treslin 相似的序列，然后对 HeLa 细胞 cDNA 文库进行 PCR（2010）克隆了全长人类 C15ORF42，他们将其称为 Treslin。推导的 1,909 个氨基酸的人类蛋白与青蛙蛋白有 42% 的同一性，并且都包含大量的丝氨酸/苏氨酸原基序，这些基序构成了 CDK（参见 CDK2；116953）催化磷酸化的共有位点的核心。Treslin 在脊椎动物和一些海洋无脊椎动物中高度保守，但在酵母、线虫或苍蝇中则不然。蛋白质印迹分析在 U2OS 人骨肉瘤细胞系中检测到 Treslin 的表观分子质量为 220 kD。

Sansam 等人通过分离人类细胞系（2010）表明 Treslin（他们称之为 TICRR）定位于细胞核。HeLa 细胞裂解物的蛋白质印迹分析显示 TICRR 的表观分子质量为 250 kD。磷酸酶处理增加了 TICRR 的迁移率，表明它是一种磷蛋白。

▼ 基因功能

Kumagai 等人使用蛋白质下拉实验（2010）发现非洲爪蟾 Topbp1（607760）与非洲爪蟾卵提取物中的 Treslin 相互作用。Treslin 与染色质复制相关，并与对 DNA 复制至关重要的 Topbp1 区域相互作用。Treslin 与 Topbp1 的关联依赖于 Cdk2，并且 Treslin 对于将 Cdc45（CDC45L；603465）加载到复制起点至关重要。通过小干扰 RNA 敲低 U2OS 细胞中的 Treslin 会导致增殖缺陷，导致细胞明显增大、细胞在进入 S 期之前积累、抑制 DNA 复制以及 CDC45 不与染色质结合。Treslin 耗尽的 U2OS 细胞不会发生细胞凋亡，尽管 Treslin 敲除的 HeLa 细胞中细胞凋亡广泛。耗尽 Treslin 的 U2OS 细胞积累磷酸化 H2AX（H2AFX；601772），DNA 损伤标记，但未显示检查点激酶 CHK1（CHEK1；603078）的激活。熊谷等人（2010）得出结论，Treslin 调节 DNA 复制启动的关键步骤。

Zegerman 和 Diffley（2010）表明，酿酒酵母检查点激酶 Rad53（604373）抑制 CDK 和 DDK（Dbf4 依赖性激酶；参见 603311）依赖性途径，其作用多余地阻止进一步的起源激发。Rad53 通过磷酸化 Dbf4 直接作用于 DDK，而 CDK 途径则被 Rad53 介导的下游 CDK 底物 Sld3（人 Treslin 的直系同源物）磷酸化所阻断。这使得 CDK 在 DNA 损伤存在的情况下在 S 期保持活跃，这对于防止 Mcm2-7（参见 116945）重新加载到已经发射的起点上至关重要。Zegerman 和 Diffley（2010）得出结论，他们的结果解释了检查点如何调节起源放电，并证明 S 内检查点减缓 S 期主要是由于抑制起源放电。

洛佩兹-莫斯克达等人（2010）表明复制起始蛋白 Sld3 被 Rad53 磷酸化，并且这种磷酸化与 Cdc7 激酶调节亚基 Dbf4 的磷酸化一起阻断酿酒酵母中的晚期起源放电。暴露于 DNA 损伤剂后，表达 Sld3 和 Dbf4（Sld3-m25 和 Dbf4-m25）非磷酸化等位基因的细胞通过不适当地激发晚期复制起点，比野生型细胞更快地进入 S 期。Sld3-m25 Dbf4-m25 细胞在复制抑制剂羟基脲存在下生长不良，并积累多个 Rad52（600392）病灶。此外，Sld3-m25 Dbf4-m25 细胞从短暂阻断到复制的恢复以及随后在 DNA 损伤检查点处停滞的过程被延迟。洛佩兹-莫斯克达等人。

Sansam 等人使用细胞分级分离和免疫沉淀法（2010）表明HeLa细胞TICRR与染色质相关并与TOPBP1形成复合物。磷酸酶和 DNase 处理没有改变 TICRR 和 TOPBP1 之间的相互作用。斑马鱼 Ticrr 与人 TOPBP1 共沉淀，表明其功能得以保留。

布斯等人（2013）确定 MDM2 结合蛋白（MTBP; 605927）是在整个细胞周期中与 treslin/TICRR 相互作用的因子。布斯等人（2013）表明，通过小干扰 RNA（siRNA）消除 MTBP，可通过阻止原点激发期间 CMG 全解旋酶（CDC45，603465；MCM，参见 116945；GINS，参见 610608）的组装来抑制 DNA 复制。尽管 MTBP 与 p53（191170）肿瘤抑制因子的功能有关，Boos 等人（2013）发现无论细胞的 p53 状态如何，DNA 复制都需要 MTBP。布斯等人（2013）提出 MTBP 与 treslin/TICRR 一起作用，整合来自细胞周期和 DNA 损伤反应途径的信号，以控制人类细胞中 DNA 复制的启动。

▼ 测绘

Hartz（2010）根据 C15ORF42 序列（GenBank AK074727）与基因组序列（GRCh37）的比对，将 C15ORF42 基因对应到染色体 15q26.1。

▼ 动物模型

桑萨姆等人（2010）发现斑马鱼 Ticrr 基因的丢失会导致胚胎死亡。DNA 损伤后，Ticrr 破坏消除了 G2/M 检查点，细胞继续进入有丝分裂。Ticrr 破坏也会损害 S 期进展并导致染色质过早凝结。