复制蛋白 A2，32-KD； RPA2

RPA32
REPA2

HGNC 批准的基因符号：RPA2

细胞遗传学定位：1p35.3 基因组坐标（GRCh38）：1:27,891,524-27,914,797（来自 NCBI）

▼ 克隆与表达

复制蛋白 A（参见 RPA1；179835）是一种 3 亚基单链 DNA（ssDNA）结合蛋白，已从人类细胞中分离出来，并被发现对于乳多空病毒 SV40 的体外复制至关重要。埃尔迪勒等人（1990）从 HeLa 细胞 DNA 文库中克隆了 RPA 的 32 kD 亚基。开放解读码组预测蛋白质含有 270 个氨基酸，包括 N 末端蛋氨酸残基。N 末端区域尤其富含甘氨酸和丝氨酸。

▼ 生化特征

为了研究 RPA32 在多种 DNA 修复途径中的功能，Mer 等人（2000）确定了人 RPA32 C 端区域（氨基酸 172 至 270）的 3 维溶液结构，包括游离的和与包含 UNG2（607752） RPA 结合区域（氨基酸 73 至 88）的 16 氨基酸肽片段复合的。高分辨率核磁共振成像表明 UNG2、XPA（191525）和 RAD52（600392）与 RPA32 的相互作用界面相似。作者提出了一种基于竞争的蛋白质开关机制，用于在 DNA 损伤位点组装必需的蛋白质。

▼ 基因功能

ATR（601215）-ATRIP（606605）蛋白激酶复合物的功能对于细胞对复制应激和 DNA 损伤的反应至关重要。Zou 和 Elledge（2003）证明，与单链 DNA（ssDNA）结合的 RPA 复合物是 ATR 募集到 DNA 损伤位点以及人类细胞中 ATR 介导的 CHK1（603078）激活所必需的。在体外，RPA 刺激 ATRIP 与单链 DNA 的结合。ATRIP 与 RPA 包被的单链 DNA 的结合使 ATR-ATRIP 复合物能够与 DNA 结合，并刺激与 DNA 结合的 RAD17（603139）蛋白的磷酸化。此外，Ddc2（ATRIP 的芽殖酵母同源物）以 RPA 依赖性方式被特异性招募至双链 DNA 断裂。RPA 检查点缺陷突变体 rfa1-t11，在体内和体外将 Ddc2 募集至单链 DNA 方面都有缺陷。Zou 和 Elledge（2003）得出结论，RPA 包被的单链 DNA 是 DNA 损伤位点的关键结构，它招募 ATR-ATRIP 复合物并促进其识别磷酸化底物和启动检查点信号传导。

激活诱导胞苷脱氨酶（AID; 605257）是一种 ssDNA 脱氨酶，是免疫球蛋白基因体细胞超突变和类别转换重组所需的。类别转换重组涉及通过转换区域进行转录，从而在 R 环内生成 ssDNA。乔杜里等人（2004）描述了 AID 靶向含有体细胞超突变基序的体外转录底物的机制。他们表明，AID 的靶向活性是由于 RPA，一种参与复制、重组和修复的 ssDNA 结合异嵌合蛋白。RPA 的 32-kD 亚基与来自活化 B 细胞的 AID 特异性相互作用，其方式似乎依赖于翻译后 AID 修饰。乔杜里等人（2004）得出结论认为 RPA 是参与免疫球蛋白多样化的新因素，

李等人（2010）发现含有 PPP4C（602035）和 PPP4R2（613822）的二聚体蛋白磷酸酶 4（PPP4）复合物可使 RPA2 去磷酸化，调节其在 DNA 双链断裂反应中的作用。PPP4C 在体外有效地使磷酸-RPA2 去磷酸化。在人类细胞系中沉默 PPP4R2，或引入无法与 PPP4C 相互作用的 PPP4R2 突变体，会改变 RPA2 磷酸化的动力学和模式。PPP4R2 的耗尽通过必需因子 RAD51 的低效加载阻碍同源重组，导致 G2-M 检查点延长和对 DNA 损伤的超敏反应。表达拟磷酸化 RPA2 突变体的细胞具有相似的表型，表明 PPP4 介导的 RPA2 去磷酸化对于有效的 DNA 损伤反应是必要的。

▼ 测绘

Umbricht 等人使用来自啮齿动物-人类杂交细胞系的基因组 DNA 进行 PCR 扩增。Umbricht 等人（1993）将 REPA2 基因定位到 1 号染色体。通过 PCR 扩增 1 号染色体的体细胞杂交体并通过荧光原位杂交，Umbricht 等人（1994）将 RPA2 对应到 1p35。