受体表达增强蛋白 6; REEP6

在息肉病 1-LIKE 1 中删除；DP1L1
TB2-LIKE 1；TB2L1
19 号染色体开放解读码组 32；C19ORF32

HGNC 批准的基因符号：REEP6

细胞遗传学定位：19p13.3 基因组坐标（GRCh38）：19:1,491,181-1,497,927（来自 NCBI）

▼ 克隆与表达

G 蛋白偶联受体（GPCR）向细胞表面膜的转运对于受体-配体识别至关重要。然而，哺乳动物 GPCR 气味受体（OR）在细胞中异源表达时，在细胞表面的表达较差。通过筛选诱导人胚胎肾细胞中表达的 OR 的细胞表面表达的基因，Saito 等人（2004）鉴定了小鼠和人类 REEP1（609139）。他们在数据库中搜索了 REEP1 的同源物，并鉴定了其他几个 REEP 基因，包括 REEP6。小鼠嗅上皮的原位杂交显示 Reep6 在支持细胞中表达，但在嗅觉神经元中不表达。

Sato 等人通过消减杂交来鉴定视网膜中表达的新小鼠基因（2005）克隆了Dp1l1。推导的 201 个氨基酸蛋白与小鼠和人类 DP1（DP1; 125265）具有 57% 的同一性。Northern blot分析检测到Dp1l1在小鼠视网膜和肝脏中高表达，在肾脏和睾丸中表达较低，RT-PCR显示在脾和肺中低表达。大脑中未检测到表达。原位杂交和免疫组织化学分析表明，Dp1l1 mRNA 和蛋白大量存在于视网膜神经节细胞（RGC）中。Dp1l1 以点状形式存在于细胞质中。佐藤等人（2005）得出结论，Dp1l1 是一种膜蛋白，可能在 RGC 的细胞内膜转移中发挥作用。

郝等人（2014）发现了小鼠 Reep6 的剪接变体，他们将其称为 Reep6.1，该变体在发育和成熟的视杆光感受器中特异性表达，但在肝脏中不表达。Reep6.1 包含外显子 5，它编码额外的 27 个残基线圈和环结构。Reep6.2 亚型缺乏外显子 5，在视网膜发育的早期阶段和肝脏中表达。这两种变体均未在大脑中表达。

Arno 等人通过 RT-PCR 在人类诱导多能干细胞衍生的 3D 类器官视杯中进行了研究（2016）观察到 REEP6.1 同工型的表达与光感受器发育的时间进程相关，并且 REEP6.1 是成熟视杯中存在的主要同工型（75%）。REEP6免疫反应性仅限于发育中的人视杆细胞感光细胞的细胞体和内节，并且在视杆外节或视锥细胞感光细胞中未检测到。

▼ 测绘

Hartz（2017）根据 REEP6 序列（GenBank AK058112）与基因组序列（GRCh38）的比对，将 REEP6 基因对应到染色体 19p13.3。

通过辐射混合分析，Sato 等人（2005）将小鼠 Dp1l1 基因定位到 10 号染色体上的一个区域，该区域显示出与人类染色体 19p13.3 同线性的同源性。

▼ 基因功能

缺乏 Nrl 基因（162080）的小鼠视网膜杆发育不完整或缺失，并且 S 锥光感受器显着增强。郝等人（2014）发现发育中和成年 Nrl -/- 小鼠缺乏 Reep6.1 的视网膜表达，而 Reep6.2 在早期视网膜和肝脏中表达完整。郝等人（2014）表明 Nrl 结合 Reep6 内含子 1 中的增强子元件，并与 Nono（300084）一起促进外显子 5 包含在 Reep6.1 转录本中。Nrl 对 Reep6.2 转录物的表达没有影响。

▼ 分子遗传学

Arno 等人在来自 5 个无关家族的 7 名患有常染色体隐性遗传色素性视网膜炎（RP77; 617304）的患者中（2016）鉴定了REEP6基因突变的纯合性或复合杂合性（参见例如609346.0001-609346.0004）。

▼ 动物模型

郝等人（2014）发现通过反义吗啉在斑马鱼中敲低 Reep6 表达会损害眼睛发育并导致异常的视网膜分层。通过短发夹 RNA 的电穿孔在新生小鼠视网膜中敲低 Reep6 似乎会导致感光细胞死亡。

阿诺等人（2016）建立了 Reep6 L135P 的小鼠敲入模型（见 609346.0001），并观察到纯合敲入小鼠具有存活力和生育能力，并且没有表现出明显的形态异常。纯合突变体视网膜的组织学分析显示，在 4 个月大时，厚度和形态发生了微妙的变化，到 6 个月大时，与杂合同窝出生的杂合突变体相比，纯合突变体的外核层显着变薄，核排数减少。SD-OCT 视网膜实时成像证实了这些发现。透射电子显微镜显示，出生后 20 天时，纯合子的视网膜层组织呈现正常外观，但与杂合子相比，纯合子在 6 个月大时，内层和外层的严重改变变得明显。4 个月大的纯合 L135P 敲入小鼠的电生理分析显示，与杂合子同窝对照小鼠相比，全视野暗视视网膜电图（ERG）上的视锥细胞活动正常，但 a 波和 b 波减少；6 个月大时，纯合子的 ERG 反应进一步降低。阿诺等人（2016）指出这些发现与视杆细胞感光功能障碍一致。

▼ 等位基因变异体（4 个选定示例）：

.0001 色素性视网膜炎 77
REEP6、LEU135PRO

在一名患有色素性视网膜炎（RP77; 617304）的 35 岁亚洲男性（EG76 家族）中，Arno 等人（2016）鉴定了 REEP6 基因中的复合杂合突变：外显子 4 中的 c.404T-C 转变（c.404T-C, NM_138393.1），导致 leu135 到 pro（L135P）取代，以及外显子 4 中的 1 bp 缺失（c.448delG；609346.0002），导致预计会导致的移码提前终止密码子（Ala150ProfsTer2）。在内部对照或公共变异数据库（包括 ExAC）中均未发现这两种突变。对人 SK-N-SH 神经母细胞瘤细胞稳态表达的分析显示，与野生型相比，L135P 突变体的蛋白质水平较低。阿诺等人（2016）建立了 Reep6 L135P 的小鼠敲入模型，并观察到与杂合子同窝对照相比，纯合子中视杆光感受器功能和存活率逐渐丧失。

.0002 色素性视网膜炎 77
REEP6，1-BP DEL，448G

讨论 REEP6 基因外显子 4 中的 1-bp 缺失（c.448delG, NM_138393.1），导致移码，预计会导致提前终止密码子（Ala150ProfsTer2），Arno 等人在色素性视网膜炎患者（RP77; 617304）的复合杂合状态中发现了这种情况（2016），参见 609346.0001。

.0003 色素性视网膜炎 77
REEP6，1-BP DUP，557C

Arno 等人对一名来自苏丹近亲家庭（GC18419 家族）的 54 岁男性患有色素性视网膜炎（RP77；617304）进行了研究（2016）在视网膜特异性 REEP6.1 转录物的外显子 5 中鉴定出 1 bp 重复（c.577dupC, NM_001329556.1）的纯合性，导致预计会导致过早终止密码子（Val187GlyfsTer131）的移码（该变体是规范 REEP6 转录本 REEP6.2 中的内含子（c.517+177dup）。）该突变以纯合性形式存在于受影响的兄弟中，但在约 1,000 名个体的内部对照数据集中或外显子组测序计划或 1000 基因组计划（第 1 阶段）数据库中未发现。

.0004 色素性视网膜炎 77
REEP6, PRO128LEU

在一名来自伊朗近亲家庭（GC20277 家族）的 32 岁男性中，患有色素性视网膜炎（RP77；617304），Arno 等人（2016）鉴定了 REEP6 基因外显子 4 中 c.383C-T 转换（c.383C-T, NM_138393.1）的杂合性，导致保守残基处 pro128 到 leu（P128L）取代。ExAC 数据库中未发现该突变。对人 SK-N-SH 神经母细胞瘤细胞稳态表达的分析显示，与野生型相比，P128L 突变体的蛋白质水平较低。