解旋酶，DNA，B； HELB

DNA解旋酶B
HDHB

HGNC 批准的基因符号：HELB

细胞遗传学位置：12q14.3 基因组坐标（GRCh38）：12:66,302,493-66,343,643（来自 NCBI）

▼ 说明

DNA 复制、修复、重组和转录需要解开 DNA 双螺旋结构。 DNA 解旋酶，例如 HELB，是催化 DNA 解旋的 DNA 依赖性 ATP 酶（Tada 等，2001）。

▼ 克隆与表达

田田等人（2001）克隆小鼠Helb。推导的 1,074 个氨基酸的蛋白质具有 7 个保守的解旋酶基序，计算的分子量为 121.5 kD。通过 SDS-PAGE 检测，Helb 的表观分子质量为 130 kD。

Taneja 等人使用小鼠 Helb 搜索 EST 数据库，然后对 HeLa 和 HEK293 细胞 RNA 进行 RT-PCR（2002）克隆了人类 HELB，他们将其称为 HDHB。推导的 1,087 个氨基酸蛋白具有 7 个解旋酶基序，包括 Walker A 和 Walker B 基序，这是 superfamily-1 解旋酶的特征。它包含 9 个潜在的磷酸化位点。 RT-PCR 分析检测到所有检查组织中都有 HELB 表达，其中睾丸和胸腺中的水平最高。在几种人类细胞系和人类包皮成纤维细胞中也检测到表达。转染昆虫细胞的蛋白质印迹分析检测到表观分子质量为 180 kD 的 HELB。

▼ 基因功能

田田等人（2001）在源自小鼠乳腺癌细胞系的温度敏感突变细胞中发现了 Helb 中的点突变，当在不允许的温度（39 摄氏度）下孵育时，该细胞表现出细胞生长降低和 DNA 依赖性 ATP 酶活性。在不允许的温度下，突变细胞的生长停滞发生在 S 期早期，表明 Helb 在 S 期早期发挥作用。

Taneja 等人使用昆虫细胞中表达的重组蛋白（2002）发现 HDHB 在单链 DNA（ssDNA）或具有单链 5-prime 和 3-prime 尾部的 DNA 叉状底物存在的情况下具有强大的 ATPase 活性。它对双链 DNA 或 RNA 几乎没有活性。 ATP 和脱氧 ATP 均支持 HDHB 针对叉结构的解旋活性，但其他核糖或脱氧核糖核苷三磷酸不支持。使用 Mg（2+）或 Mn（2+）可以检测到解旋酶活性，但不能使用其他二价阳离子来检测。 HDHB 显示出 5 素数到 3 素数的解旋极性。在 RPA（RPA1；179835）存在的情况下，HDHB 刺激人 DNA 聚合酶 α-引物酶（参见 176635）从 M13 ssDNA 合成 RNA 引物。 HDHB 的 Walker A 或 Walker B 基序内的失活突变不会消除 HDHB 与聚合酶 α-引物酶亚基 p180（POLA1；312040）或 p68（POLA2）的共沉淀。然而，Walker A 或 Walker B 基序内的突变导致显性失活 HDHB 蛋白，当注射到 G1 早期的 HeLa 细胞中时，该蛋白会干扰野生型 HDHB 并抑制 G1/S 转变。

古勒等人（2012）发现化学或紫外线照射诱导的 DNA 损伤导致几种人类细胞系中可溶性核 HDHB 募集到染色质，主要是在 S 期。 RPA70（RPA1）沉默可减少 HDHB 在染色质上的积累。突变分析和蛋白质相互作用测定表明，RPA70 N 端寡核苷酸/寡糖结合折叠结构域的基本裂缝与 HDHB Walker A 基序 C 端高度保守的酸性残基相互作用。 HDHB 的敲低增加了羟基脲暴露引起的复制应激，并使细胞对喜树碱诱导的 DNA 损伤敏感。古勒等人（2012）假设 RPA70 将 HDHB 招募到 DNA 损伤位点，并且 HDHB 在复制应激恢复中发挥作用。

▼ 基因结构

塔内贾等人（2002）指出 HELB 基因包含超过 13 个外显子。

▼ 测绘

塔内贾等人（2002）指出 HELB 基因定位于染色体 12q13。