RAS 2 激酶抑制剂； KSR2

HGNC 批准的基因符号：KSR2

细胞遗传学位置：12q24.22-q24.23 基因组坐标（GRCh38）：12:117,453,012-117,968,990（来自 NCBI）

▼ 克隆与表达

Channavajhala 等人通过数据库分析，然后对人类睾丸 cDNA 文库进行 PCR（2003）克隆了KSR2。 预测的 829 个氨基酸蛋白质的分子量约为 105 kD。 与 KSR1（601132） 类似，KSR2 似乎缺少 CA1 域。 KSR2 与 KSR1 有 61% 的氨基酸同一性。 Northern印迹分析显示表达主要在肾脏和大脑中。 免疫共沉淀研究表明，KSR2 与 MAPK 通路的成分相互作用，包括 RAF（RAF1; 164760）、MEK（MAP2K1; 176872） 和 ERK（MAPK3; 601795）。

▼ 基因功能

Channavajhala 等人（2003） 表明全长 KSR2 和 KSR2 的 C 端催化结构域均与 COT 相关（MAP3K8; 191195）。 在 HEK-293T 细胞中，KSR2 与 COT 共转染可导致 COT 介导的 ERK 激活以剂量依赖性方式减少； 然而，RAF 介导的 ERK 激活并未因与 KSR2 共表达而显着减弱，表明该效应是选择性的。 荧光素酶报告基因检测显示，KSR2 抑制 COT 诱导的 NF-kappa-B（164011） 激活，但不抑制 IKKB（603258） 介导的 NF-kappa-B 激活。 体外激酶测定表明，KSR2 负向调节 COT 的激酶活性。 COT 激酶活性调节 HeLa 细胞中 IL8（146930） 的产生，KSR2 的共表达显着减少 COT 诱导的 IL8 产生。

Channavajhala 等人（2005） 表明，在 HEK293T 细胞中共转染 KSR2 与 MEKK3（MAP3K3；602539） 显着降低 MEKK3 介导的 ERK 激活，但不影响其他 MAP3K 的 ERK 激活。 KSR2 还显着降低 IL1B（147720） 介导的促炎途径中 MEKK3 诱导的 NF-kappa-B 激活至接近背景水平，并下调 MEKK3 诱导的 IL8 产生以响应 IL1B 刺激。 Channavajhala 等人（2005） 得出结论，KSR2 特异性调节 MEKK3 和 COT 的活性，但不调节 MAP3K 家族其他成员的活性。

▼ 生化特征

晶体结构

布伦南等人（2011） 综合结构和生化研究来了解 KSR 如何促进 MEK 的刺激性 Raf 磷酸化。 他们从人 KSR2 激酶结构域（KSR2（KD）） 与兔 MEK1（176872） 复合物的晶体结构中发现，KSR2 激酶结构域和 MEK1 之间的相互作用是由各自的激活片段和 C 叶 α-G 螺旋介导的。 与 BRAF（164757） 类似，KSR2 通过涉及 arg718 的侧对侧界面进行自关联，arg718 是在遗传筛选中被鉴定为 Ras 信号传导抑制因子的残基。 ATP 与 KSR2（KD） 催化位点结合，Brennan 等人（2011） 通过体外测定和化学遗传学证明了 KSR2 激酶对 MEK1 的活性。 在KSR2（KD）-MEK1复合物中，两种激酶的激活片段相互约束，并且KSR2采用非活性构象。 BRAF 变构刺激 KSR2 的激酶活性，这依赖于侧对侧 KSR2-BRAF 异二聚体的形成。 此外，KSR2-BRAF 异二聚化通过 KSR2 介导的 BRAF 信号中继释放 MEK 磷酸化激活片段，导致 BRAF 诱导的 MEK 磷酸化增加。 布伦南等人（2011） 提出 KSR 与顺式调节 Raf 分子相互作用，诱导 MEK 构象转换，通过反式单独的催化 Raf 分子促进 MEK 磷酸化。