血栓烷 A2 受体、血小板; TBXA2R

HGNC 批准的基因符号:TBXA2R

细胞遗传学定位:19p13.3 基因组坐标(GRCh38):19:3,594,507-3,606,875(来自 NCBI)

▼ 说明

TBXA2R 基因编码血栓素 A2 受体,它是 G 蛋白偶联受体家族的成员。它通过与血栓素 A2(TXA2) 相互作用诱导血小板聚集,在止血中发挥重要作用(Hirata 等人总结,1994)。Thromboxane A2 是一种花生四烯酸代谢物,是血小板聚集的有效刺激剂以及血管和呼吸平滑肌的收缩剂。TXA2 被认为是心肌梗塞、中风和支气管哮喘等疾病的介质(Ushikubi 等人,1989 年总结)。

▼ 克隆与表达

牛久等人(1989) 使用 TXA2 的稳定类似物纯化了 TXA2 的细胞表面受体。Hirata 等人使用与其部分氨基酸序列相对应的寡核苷酸探针(1991)从人胎盘中获得了编码该受体的cDNA,并从培养的人巨核细胞白血病细胞中获得了部分cDNA克隆。胎盘 cDNA 编码 343 个氨基酸的蛋白质,具有 7 个假定的跨膜结构域。在 COS-7 细胞中表达的蛋白质与药物的结合亲和力与血小板受体相同,在非洲爪蟾卵母细胞中表达的蛋白质在激动剂刺激下打开钙离子激活的氯离子通道。Northern 印迹分析和 2 个克隆的核苷酸序列表明,血小板和血管组织中存在相同形式的血栓素 A2 受体。

▼ 基因功能

人类 TXA2 受体的两种亚型已被克隆:一种来自胎盘,另一种来自内皮,分别称为 TXR-α 和 TXR-β。这些亚型仅在 C 末端尾部有所不同。平田等人(1996) 发现这两种亚型都存在于人类血小板中。在培养细胞中表达的两种亚型表现出相似的配体结合特征和磷脂酶 C 激活,但腺苷酸环化酶活性的调节相反:TXR-α 激活腺苷酸环化酶,而 TXR-β 抑制它。

▼ 基因结构

努辛等人(1993)报道TBXA2R基因以单拷贝存在于基因组中,跨度超过15kb,包含3个外显子,被2个内含子分开。内含子 1 存在于 5-prime 非编码区,距离 ATG 起始位点上游 83 bp,长度为 6.3 kb。内含子2长度为4.3 kb,位于第六跨膜区末端,从而将其与下游编码序列(包括第七跨膜区和3-prime非翻译区)分开。通过快速扩增 5-prime cDNA 末端,Nusing 等人(1993) 确定了从 2 个不同的推定启动子区域开始的转录起始位点。

▼ 测绘

Schwengel 等人利用转录的 3-prime 非翻译 DNA 序列多态性(1993) 通过在一系列人类/啮齿类单染色体体细胞杂交体中进行 PCR 扩增,将 TBXA2R 基因定位于 19 号染色体。连锁图谱使 TBXA2R 最接近 D19S120,在 DNA 的 CEPH 组中,最大 lod = 19.55,theta = 0.05。多点连锁分析将 TBXA2R 置于 19p13.3 端粒末端的标记 D19S120 和 PMS207 之间。

Nusing 等人利用克隆基因组 DNA 与中期染色体的荧光原位杂交(1993)证明TBXA2R基因位于19p13.3。邓肯等人确认了地图位置(1995),他还注意到 12q24.3-q24.4 和 15q25-q26 处有少量原位杂交信号。

武藤等人(1994) 使用人类 TXA2 受体的小鼠同源物作为 cDNA 探针,使用一组来自种间杂交的 DNA 样本,将小鼠基因(Tbxa2r) 定位到 10 号染色体。最佳基因顺序表明 TBXA2R 位于 Myb 远端、Pah 近端。

▼ 分子遗传学

Hirata 等人在患有常染色体显性血小板型出血性疾病(BDPLT13;614009)的 2 个不相关家族的受影响成员中,其特征是血小板对 TBXA2 的反应缺陷(1994) 鉴定了 TBXA2R 基因的杂合突变(R60L; 188070.0001)。

芒福德等人(2010) 得出结论,TBXA2R 基因突变的杂合性足以在体外引起异常血小板功能反应,但不足以在体内引起临床上显着的功能障碍。

宇野木等人(2000) 对日本患者基因组 DNA 中的 29 个可能的支气管哮喘候选基因进行了单核苷酸多态性(SNP) 调查。他们在其中的 14 个基因中鉴定出了 33 个 SNP,其中只有 4 个以前被报道过。他们还对 585 名支气管哮喘患者和 343 名正常对照者进行了这些 SNP 的关联研究。33 个 SNP 中只有 1 个与支气管哮喘呈正相关:TBXA2R 基因中的 924T-C 多态性,最常见于成年患者。

▼ 动物模型

TXA2 的作用是由 G 蛋白偶联的血栓素-前列腺素(TP) 受体介导的。TP受体与心血管疾病的发病机制有关。为了研究 TP 受体的生理功能,Thomas 等人(1998) 通过基因靶向产生了 TP 受体缺陷小鼠。Tp -/- 动物按预期数量繁殖和存活,并且它们的主要器官系统正常。在 Tp -/- 小鼠的组织中无法检测到血栓素激动剂结合。这些小鼠的出血时间延长,并且在接触 TXA2 激动剂后,它们的血小板不会聚集。尽管 ADP 刺激的聚集是正常的,但胶原蛋白刺激后的聚集反应也延迟。总之,Tp -/- 小鼠患有轻度出血性疾病,并且血管对 TXA2 和花生四烯酸的反应发生改变。

程等人(2002) 证明,损伤诱导的血管增殖和血小板活化在 PGI2 受体遗传缺陷(600022) 的小鼠中增强,但在 TXA2 受体遗传缺陷或接受 TXA2 受体拮抗剂治疗的小鼠中受到抑制。在缺乏这两种受体的小鼠中,对血管损伤的增强反应被消除。因此,PGI2 调节体内血小板-血管相互作用,并特别限制对 TXA2 的反应。这种相互作用可能有助于解释与选择性 COX2 抑制剂相关的不良心血管效应,与阿司匹林和非甾体类抗炎药不同,COX2 抑制剂抑制 PGI2,但不抑制 TXA2。

鹿岛等人(2003) 使用 Tbxa2r 缺陷的小鼠来研究 TBXA2R 在免疫系统中的作用。他们发现,在小鼠脾脏和胸腺中高度表达的 Tbxa2r 在幼稚 T 细胞上表达,但在记忆 T 细胞上不表达。Tbxa2r -/- 小鼠表面上是正常的,但随着年龄的增长,它们出现了明显的颈部淋巴结肿大,并伴有淋巴结带状结构的破坏。这些小鼠的接触超敏反应也增强了。用 TBXA2R 激动剂处理细胞可增加初始 T 细胞的随机趋化作用,并抑制树突状细胞(DC) 与 T 细胞的粘附以及 DC 依赖性 T 细胞增殖。鹿岛等人(2003) 得出结论,TBXA2-TBXA2R 信号传导负向调节 DC-T 细胞相互作用。

▼ 等位基因变异体(3 个选定示例):

.0001 血小板型出血性疾病,13,对
TBXA2R、ARG60LEU敏感

Hirata 等人在患有常染色体显性血小板型出血性疾病 13(BDPLT13;614009)的 2 个不相关家族的受影响成员中,其特征是血小板对 TBXA2 的反应有缺陷(1994) 鉴定了 TBXA2R 基因中的杂合 179G-T 颠换,导致第一个细胞质环中的 arg60-to-leu(R60L) 取代。1个家系的先证者为突变纯合子,表型稍重。Ushikubi 等人已报告了这些家庭(1987) 和 Fuse 等人(1993) 分别证明,尽管对凝血酶的反应正常,但血小板对 TBXA2 及其类似物的聚集反应受损。Hirata 等人在中国仓鼠卵巢细胞中表达突变受体(1994)显示尽管配体结合亲和力正常,但激动剂诱导的第二信使形成减少。

平田等人(1996) 表明,人类 TXA2 受体 TXR-α 同工型的 R60L 突变体已被证明会损害磷脂酶 C 的激活,也会损害腺苷酸环化酶的刺激,而具有相同突变的 TXR-β 保留其抑制腺苷酸环化酶的活性。

.0002 出血性疾病,血小板型,13,对
TBXA2R、ASP304ASN的敏感性

Mumford 等人在一名患有轻度粘膜皮肤血小板型出血性疾病 13(BDPLT13;614009)的 14 岁白人男孩中,其特征是血小板对 TBXA2 的反应有缺陷(2010) 鉴定出 TBXA2R 基因中的杂合 910G-A 转变,导致跨膜结构域 7 中由 asp304 变为 asn(D304N)。患者的父亲也携带该突变,但没有出血症状。对男孩及其父亲的血小板进行的体外研究显示,花生四烯酸和 TBXA2R 激动剂的聚集和 ATP 分泌反应受损。CHO 细胞的体外功能表达研究显示突变蛋白的表面膜表达正常,但与野生型相比,TBXA2R 激动剂的结合显着降低,细胞内钙水平显着降低(超过 85%)。与功能丧失一致。Mumford 等人注意到男孩与其父亲之间的表型差异(2010) 推测男孩表现出的临床出血表型代表了杂合 D304N 突变与额外的未识别的止血缺陷相结合的影响。芒福德等人(2010) 得出结论,TBXA2R 基因突变的杂合性足以在体外引起异常血小板功能反应,但不足以在体内引起临床上显着的功能障碍。芒福德等人(2010) 得出结论,TBXA2R 基因突变的杂合性足以在体外引起异常血小板功能反应,但不足以在体内引起临床上显着的功能障碍。芒福德等人(2010) 得出结论,TBXA2R 基因突变的杂合性足以在体外引起异常血小板功能反应,但不足以在体内引起临床上显着的功能障碍。

.0003 出血性疾病,血小板型,13,对
TBXA2R、VAL241GLY的敏感性

Flamm 等人发现,在体外血小板对 TBXA2 反应有缺陷的个体中,这与对血小板型出血性疾病 13(BDPLT13;614009) 的易感性一致(2012) 鉴定了 TBXA2R 基因外显子 2 中的杂合 T 至 G 颠换,导致靠近内膜的受体第三个细胞内环中高度保守的残基处 val241 至甘氨酸(V241G) 取代。体外功能表达研究显示突变受体表达正常,但响应 TBXA2 激动剂的钙动员和聚集受损。由于通过 ADP 的 G 蛋白信号传导是正常的,Flamm 等人(2012) 得出结论,该突变导致 TBXA2R 与 Gq 的异常偶联,导致钙动员受损。该个体的血小板还表现出对抗凝剂阿司匹林和吲哚美辛的反应受损,这两种药物抑制血栓素 A2 的产生。该人没有自我报告的出血倾向。