OPA 相互作用蛋白 5； 开放IP5
- MIS18 动粒蛋白 B：MIS18B
- MIS18，S. Pombe，同源物，B
- MIS18-β
HGNC 批准的基因符号：OIP5
细胞遗传学位置：15q15.1 基因组坐标（GRCh38）：15:41,309,273-41,332,591（来自 NCBI）
▼ 说明
MIS18A（618137）、MIS18B（OIP5） 和 MIS18 结合蛋白-1（MIS18BP1；618139） 形成 MIS18 复合物。MIS18 介导新合成的着丝粒蛋白 A（CENPA; 117139） 加载到着丝粒（Fujita et al., 2007）。
▼ 克隆与表达
淋病奈瑟菌混浊相关（Opa） 蛋白是参与淋球菌粘附和侵入人体细胞的外膜蛋白家族。Opa 表达似乎是淋球菌疾病所必需的。Williams 等人使用酵母 2-杂交系统以淋病奈瑟菌 Opa 蛋白为诱饵筛选 HeLa 细胞 cDNA 文库（1998） 鉴定了编码 Opa 相互作用蛋白 1（OIP1 或 TRIP6；602933）、OIP2（606019）、OIP3（PK3；179050）、OIP4（PRAME；606021）和 OIP5 的部分 cDNA。部分 OIP5 cDNA 编码预测的 231 个氨基酸肽，该肽可能是较长蛋白质的 C 末端。OIP5 包含一簇碱性残基和一个半胱氨酸基序。
通过在数据库中搜索粟酒裂殖酵母 Mis18 的直系同源物，Fujita 等人（2007） 鉴定了人类 MIS18A 和 MIS18B，他们分别将其称为 MIS18-α 和 MIS18-β。作者还在其他哺乳动物和鸡中鉴定出了 2 个 Mis18 直向同源物，而在鱼、青蛙和黑粉菌黑粉菌中只鉴定出了 1 个直向同源物。在线虫、果蝇或酿酒酵母中未发现 Mis18 直向同源物。Mis18 直向同源物均具有包含半胱氨酸和甘氨酸残基的保守基序，该基序在每个蛋白质中重复两次，以及 1 个保守酪氨酸。人 MIS18-β 与人 MIS18-α 具有 26% 的氨基酸同一性。免疫印迹分析在 HeLa 细胞中检测到内源性 29-kD 蛋白质。免疫荧光分析显示，MIS18-β 定位于转染的 HeLa 细胞的末期 G1 着丝粒。
▼ 测绘
Gross（2018） 根据 OIP5 序列（GenBank BC015050） 与基因组序列（GRCh38） 的比对，将 OIP5 基因对应到染色体 15q15.1。
▼ 基因功能
Fujita 等人使用质谱、免疫沉淀以及酵母 2 和 3 杂交分析（2007） 发现人类 MIS18-α、MIS18-β 和 MIS18BP1 形成 MIS18 复合物。免疫荧光分析证实，所有 3 种蛋白质以细胞周期依赖性方式共定位于 HeLa 细胞的着丝粒上。共定位发生在后期/末期开始的有丝分裂退出期间，并且蛋白质在 G1 早期保持相关。对粟酒裂殖酵母 Mis18 蛋白的分析也显示着丝粒定位与人类 MIS18 相似。HeLa 细胞中 RNA 干扰介导的敲低分析表明，人类 MIS18 复合物对于中期排列和正确的染色体分离至关重要。3 个 MIS18 蛋白的着丝粒定位对于随后从头合成的 CENPA 的招募至关重要。突变分析表明，MIS18-α 的保守基序是 MIS18 蛋白的正确定位和功能所必需的。组蛋白脱乙酰酶的抑制以剂量依赖性方式增强了 MIS18 耗尽的细胞中新合成的 CENPA 的募集，这表明着丝粒组蛋白在 CENPA 沉积在着丝粒上之前需要被乙酰化。此外，MIS18-α、MIS18-β 和 MIS18BP1 在着丝粒定位方面相互依赖。敲低 3 种 MIS18 蛋白中的任何一种都会消除新合成的 CENPA 的着丝粒募集，随后出现染色体错位、后期错误分离和间期微核等缺陷。组蛋白脱乙酰酶的抑制以剂量依赖性方式增强了 MIS18 耗尽的细胞中新合成的 CENPA 的募集，这表明着丝粒组蛋白在 CENPA 沉积在着丝粒上之前需要被乙酰化。此外，MIS18-α、MIS18-β 和 MIS18BP1 在着丝粒定位方面相互依赖。敲低 3 种 MIS18 蛋白中的任何一种都会消除新合成的 CENPA 的着丝粒募集，随后出现染色体错位、后期错误分离和间期微核等缺陷。组蛋白脱乙酰酶的抑制以剂量依赖性方式增强了 MIS18 耗尽的细胞中新合成的 CENPA 的募集，这表明着丝粒组蛋白在 CENPA 沉积在着丝粒上之前需要被乙酰化。此外，MIS18-α、MIS18-β 和 MIS18BP1 在着丝粒定位方面相互依赖。敲低 3 种 MIS18 蛋白中的任何一种都会消除新合成的 CENPA 的着丝粒募集，随后出现染色体错位、后期错误分离和间期微核等缺陷。和MIS18BP1在着丝粒定位方面相互依赖。敲低 3 种 MIS18 蛋白中的任何一种都会消除新合成的 CENPA 的着丝粒募集，随后出现染色体错位、后期错误分离和间期微核等缺陷。和MIS18BP1在着丝粒定位方面相互依赖。敲低 3 种 MIS18 蛋白中的任何一种都会消除新合成的 CENPA 的着丝粒募集，随后出现染色体错位、后期错误分离和间期微核等缺陷。
纳尔迪等人（2016） 发现人类 MIS18A 和 MIS18B 通过其保守的 C 端卷曲螺旋结构域相互作用形成异四聚体。卷曲螺旋结构域足以介导 MIS18A 和 MIS18B 的同源二聚化和异源多聚化。异四聚体的形成是与 MIS18BP1 相互作用和 MIS18 复合物着丝粒定位所必需的。MIS18A 和 MIS18B 单独或一起，通过其卷曲螺旋结构域直接与染色质组装因子 HJURP（612667） 相互作用。梯度沉降和 HEK293T 细胞体内分析证实，MIS18A-MIS18B 复合物通过直接结合 HJURP 的着丝粒靶向结构域将 HJURP 招募到着丝粒，并将 CENPA 沉积在中心体。HJURP 的结合破坏了 MIS18A-MIS18B 异四聚体，将其还原为异二聚体。对 HeLa 细胞的研究表明，一旦 MIS18A-MIS18B 复合物在末期末期与着丝粒结合，它就不会主动周转并且不会被替换，直到 HJURP 结合破坏该复合物并将其从着丝粒中移除。活细胞成像显示，CENPA 水平在各代之间保持相对恒定，因为相对于现有 CENPA 的数量，新的 CENPA 沉积在每个细胞周期中。对过表达 MIS18A-MIS18B 的 U2OS 细胞着丝粒处存在的 CENPA 量的评估表明，MIS18 的可用性决定了每个细胞周期加载的 CENPA 量。它不会主动更新，也不会被替换，直到 HJURP 结合破坏了复合物并将其从着丝粒中移除。活细胞成像显示，CENPA 水平在各代之间保持相对恒定，因为相对于现有 CENPA 的数量，新的 CENPA 沉积在每个细胞周期中。对过表达 MIS18A-MIS18B 的 U2OS 细胞着丝粒处存在的 CENPA 量的评估表明，MIS18 的可用性决定了每个细胞周期加载的 CENPA 量。它不会主动更新，也不会被替换，直到 HJURP 结合破坏了复合物并将其从着丝粒中移除。活细胞成像显示，CENPA 水平在各代之间保持相对恒定，因为相对于现有 CENPA 的数量，新的 CENPA 沉积在每个细胞周期中。对过表达 MIS18A-MIS18B 的 U2OS 细胞着丝粒处存在的 CENPA 量的评估表明，MIS18 的可用性决定了每个细胞周期加载的 CENPA 量。
Spiller 等人通过 HeLa 细胞中的表达分析（2017） 表明 MIS18BP1 的 N 末端区域足以与 MIS18A-MIS18B 直接相互作用形成 MIS18 复合物。体外测试证实，MIS18A 的 MeDiY 结构域（而不是 MIS18B 的 MeDiY 结构域）直接与 MIS18BP1 的 N 末端区域相互作用。然而，MIS18A-MIS18B MeDiY 异二聚体比单独的 MIS18A MeDiY 更牢固地结合 MIS18BP1，表明 MIS18A MeDiY 在 MIS18B MeDiY 存在的情况下与 MIS18BP1 进行额外的接触，或者 MIS18B MeDiY 增强了 MIS18A MeDiY 与 MIS18BP1 的结合。作者确定，4 个 MIS18A 拷贝和 2 个 MIS18B 拷贝形成异六聚体，该异源六聚体结合 2 个 MIS18BP1 拷贝，形成异源八聚体 MIS18 复合物。MIS18A-MIS18B异六聚体由通过MIS18A和MIS18B的C端α螺旋结构域形成的异三聚体组装而成，然后通过MeDiY二聚化界面组装成异六聚体，这也是结合MIS18BP1的2个拷贝形成MIS18异八聚体以及CENPA在着丝粒处沉积所必需的。MIS18BP1 N 端区域内的两个共有 CDK1（116940） 磷酸化位点直接参与 MIS18A-MIS18B 结合，表明 MIS18 复合物组装和着丝粒定位可能由 CDK1 以细胞周期依赖性方式调节。这也是结合 MIS18BP1 的 2 个拷贝以形成 MIS18 异源八聚体以及 CENPA 在着丝粒处沉积所必需的。MIS18BP1 N 端区域内的两个共有 CDK1（116940） 磷酸化位点直接参与 MIS18A-MIS18B 结合，表明 MIS18 复合物组装和着丝粒定位可能由 CDK1 以细胞周期依赖性方式调节。这也是结合 MIS18BP1 的 2 个拷贝以形成 MIS18 异源八聚体以及 CENPA 在着丝粒处沉积所必需的。MIS18BP1 N 端区域内的两个共有 CDK1（116940） 磷酸化位点直接参与 MIS18A-MIS18B 结合，表明 MIS18 复合物组装和着丝粒定位可能由 CDK1 以细胞周期依赖性方式调节。
