RAD9、RAD1 和 HUS1 相互作用的核孤儿 1； RHNO1

RHINO
12 号染色体开放解读码组 32； C12ORF32

HGNC 批准的基因符号：RHNO1

细胞遗传学位置：12p13.33 基因组坐标（GRCh38）：12:2,876,264-2,889,523（来自 NCBI）

▼ 克隆与表达

Kim 等人利用表达谱来鉴定在乳腺癌发生过程中上调的基因，然后对乳腺癌细胞进行 PCR（2010）克隆了C12ORF32。数据库分析揭示了缺少外显子 2 的 C12ORF32 剪接变体，该外显子包含全长转录本中的起始密码子。这个短转录本缺少长 ORF。 Northern 印迹分析检测到乳腺癌细胞中 1.9 kb 和 1.6 kb C12ORF32 转录物的强劲表达，而在正常组织（主要是睾丸、前列腺、卵巢、胸腺和小肠）中的表达要低得多。乳腺癌细胞系的蛋白质印迹分析揭示了 16 kD C12ORF32 蛋白，而不是预测的 35 kD 全长蛋白。这种 16-kD 蛋白似乎是全长 C12ORF32 的加工形式，仅包含 N 端氨基酸 1 至 144。C12ORF23 蛋白定位于间期细胞的细胞核，并且在有丝分裂时更广泛地分散。

Cotta-Ramusino 等人使用小干扰 RNA（siRNA）筛选来鉴定 U2OS 骨肉瘤细胞中 DNA 损伤反应的成分（2011）鉴定了 C12ORF32，他们将其称为 RHINO。推导的 238 个氨基酸蛋白具有假定的 N 端 DNA 结合结构域和 3 个潜在的 ATM（607585）/ATR（601215）磷酸化位点。

▼ 基因功能

金等人（2010）发现通过 RNA 干扰消除乳腺癌细胞中的 C12ORF32 会抑制细胞生长，这可能是由于抑制了 G1/S 转变和随后的细胞死亡。

科塔-拉穆西诺等人（2011）发现 RHINO 在 thr33 上被磷酸化，并在 U2OS 细胞中 DNA 损伤时定位于核灶。通过 siRNA 敲低 RHINO 导致检查点绕过和对电离辐射、丝裂霉素 C 和喜树碱的敏感性。 RHINO 耗竭的程度与检查点和同源重组缺陷相关。对用表位标记的 RHINO 免疫沉淀的蛋白质进行质谱和蛋白质印迹分析，鉴定出 RAD9（RAD9A; 603761）、RAD1（603153）和 HUS1（603760），即 9-1-1 复合物的 3 个亚基。 9-1-1 复合物充当 DNA 损伤特异性夹子，结合 ATR 激活剂 TOPBP1（607760）、E3 泛素连接酶 RAD18（605256）和 E2 缀合酶 UBC13（UBE2N; 603679）。 RHINO 假定的 N 端 DNA 结合结构域内的 7 个氨基酸基序的突变阻断了 RHINO 与 9-1-1 复合物的相互作用，但没有阻断 RHINO 与 TOPBP1 的相互作用，并干扰了 RHINO 在 DNA 损伤位点的定位。科塔-拉穆西诺等人（2011）得出结论，RHINO/9-1-1/TOPBP1 轴促进对 S 期病变发生的 DNA 损伤反应。

▼ 基因结构

金等人（2010）确定 C12ORF32 基因包含 3 个外显子，其中第一个是非编码外显子。

▼ 测绘

Hartz（2011）根据 RHNO1 序列（GenBank BC005106）与基因组序列（GRCh37）的比对，将 RHNO1 基因定位到染色体 12p13.33。