肌营养不良蛋白； DMD

此条目中代表的其他实体：

• 包含 APO-肌营养不良蛋白 1

HGNC 批准的基因符号：DMD

细胞遗传学位置：Xp21.2-p21.1 基因组坐标（GRCh38）：X:31,119,218-33,339,459（来自 NCBI）

▼ 描述

DMD 基因编码肌营养不良蛋白，这是一种大肌肉蛋白，在 Duchenne（310200） 和 Becker（300376） 肌营养不良症中发生突变，定义为肌肉组织进行性退化并由此导致无力。

▼ 克隆和表达

对杜氏肌营养不良症和贝克尔肌营养不良症的研究促成了人类反向遗传学（更好地描述为位置克隆）的首次成功尝试之一（另一种疾病是慢性肉芽肿病（306400），它也是 X 连锁的，并于 1986 年进行了定位克隆。）导致临床疾病的基因突变的发现和随后的分析导致了编码蛋白肌营养不良蛋白的发现。这个新词为通过人类疾病基因的定位克隆发现的蛋白质命名开创了先例：例如，亨廷顿蛋白、艾默林和阿塔辛。

伍德等人（1987） 指出杜氏肌营养不良症的基因，符号为 DMD（与用于杜氏肌营养不良症的缩写相同）编码约 16 kb 的 mRNA；因此，如果该信息编码单个蛋白质，其大小约为 500 kD。当时已知的肌肉中最大的蛋白质是星云蛋白（550 kD） 和肌联蛋白（超过 1000 kD）。两种蛋白均位于 A 带（肌节由肌球蛋白粗丝组成的区域）和 I 带（肌节包含附着在 Z 线上的肌节蛋白细丝的区域）的交界处。伍德等人（1987） 发现，在所有 30 名 DMD 患者中，被识别为星云蛋白（161650） 的条带不存在或极其微弱，而在所有对照中，这条条带都是清晰的，在对照肌肉中看到的所有其他蛋白质的条带在 DMD 患者的肌肉中也同样突出。具体而言，titin（188840） 在对照肌肉和 DMD 肌肉中同样突出。作者认为，nebulin 可能是 DMD 中的缺陷基因产物；现在已知情况并非如此。

福斯特等人（1987） 得出结论，nebulin 和 titin 在 DMD 中正常表达；单克隆抗体在 3 个 DMD 肌肉活检的冰冻切片上显示正常染色模式。Pernelle 等人的观察证实了这一发现（1988），他研究了一名 Xp21.2 间质缺失儿童的肌原纤维蛋白电泳图谱，以及与甘油激酶缺乏、先天性肾上腺发育不全和严重智力低下相关的杜氏肌营养不良表型。

霍夫曼等人（1987） 对人类胎儿骨骼肌和成年小鼠心脏的 14-kb DMD 转录本的大约 25% 进行了测序。两个物种的核酸和预测的氨基酸序列几乎90%同源。氨基酸序列表明该蛋白质产物可能在肌肉中发挥结构作用，但 mRNA 的丰度和组织分布表明 DMD 蛋白不是星云蛋白。当 nebulin 基因定位于 2 号染色体时，这一点得到了最终证实（参见 161650）。

Koenig（1987） 最初根据序列相似性提出，DMD 中突变的基因可能是编码α-肌节蛋白的基因。Hammonds（1987） 发现 DMD 蛋白与鸡 α-肌节蛋白之间存在相似性。α-肌节蛋白是平滑肌和骨骼肌中肌节蛋白丝的正常成分，可能参与丝内 F-肌节蛋白的交联以及将细胞骨架的丝状元件连接到细胞膜。α-辅肌节蛋白分为 2 个结构域，一个结合肌节蛋白的氨基末端结构域，以及一个羧基末端重复结构域，该重复结构域以反平行方式二聚化形成杆（Koenig 等，1988）。

霍夫曼等人（1987） 通过使用针对反映小鼠 cDNA 的 2 个不同区域的融合蛋白的多克隆抗体，鉴定了人和小鼠 DMD 基因座的蛋白质产物。这种蛋白质称为抗肌营养不良蛋白，大小约为 400 kD，约占横纹肌总蛋白的 0.002%；它与骨骼肌中的三元连接有关，因此可能与钙离子稳态有关。在胃平滑肌中也检测到了该蛋白质。肌肉型和脑型肌营养不良蛋白亚型都是由 14 kb mRNA 翻译而来的 427 kD 蛋白质。

科尼格等人（1988） 报道了抗肌营养不良蛋白 cDNA 的完整序列。该基因编码 3,685 个氨基酸的蛋白质产物，具有 4 个不同的结构域，并与血影蛋白和 α-辅肌节蛋白具有许多相同的特征。作者预测该蛋白质很可能呈大约 150 nm 长的棒状。

抗肌营养不良蛋白的 C 末端由该基因的高度保守的选择性剪接区域编码。比斯等人（1992） 使用基因 3-prime 区域中不寻常的缺失案例来揭示肌营养不良蛋白分子的功能。一名患有婴儿期 DMD 和认知障碍（提示中枢神经系统疾病）的患者被发现有 1,824 bp 的内部 3 引物基因组缺失，该缺失精确切除了抗肌营养不良蛋白富含半胱氨酸和选择性剪接的 COOH 末端结构域。免疫细胞化学分析显示肌膜处有肌营养不良蛋白染色。这一经验和其他报道的 COOH 末端缺失的发现表明，富含半胱氨酸的结构域赋予肌营养不良蛋白重要的功能。

祖布日卡-加恩等人（1988） 发现，针对源自人肌营养不良蛋白 cDNA N 末端区域的合成肽和融合蛋白的抗体与正常人肌肉活检低温切片上骨骼肌肌膜中存在的抗原发生强烈反应。这种免疫反应性在 DMD 患者的肌纤维中不存在或减少，但在患有其他肌病的患者的肌纤维中却显得正常。这些发现表明肌营养不良蛋白与肌膜相关，而不是与三联征相关。祖布日卡-加恩等人（1988） 推测肌营养不良蛋白通过将内部细胞骨架的元素锚定到表面膜来增强肌膜。

Worton（1994） 指出，目前尚不清楚肌营养不良蛋白在为骨骼肌膜提供强度方面是否发挥纯粹的机械作用，或者其作用是否更为微妙。例如，抗肌营养不良蛋白的生物学作用可能是维持糖蛋白复合物的特定空间分布。从其氨基酸序列来看，肌营养不良蛋白与血影蛋白和其他细胞骨架蛋白相似：更像是两端都有球状结构域的工字梁，中间由棒状部分连接。在 NH2 末端，肌营养不良蛋白与细胞质肌节蛋白丝（不是收缩装置的肌节蛋白）结合；在另一端，它与蛋白质和糖蛋白的复合物结合，与肌膜上的肌营养不良蛋白共纯化。该复合物的成分称为肌营养不良蛋白相关蛋白（DAP）和肌营养不良蛋白相关糖蛋白（DAG）。这些化合物根据其分子量分别命名为：25DAP、35DAG、43DAG、50DAG、59DAP 和 156DAG。59DAP 似乎位于细胞内部并直接与肌营养不良蛋白结合。156DAG，也称为肌营养不良聚糖或 DAG1（128239），似乎完全位于细胞外，被糖基团覆盖，并与层粘连蛋白（细胞外基质的主要成分）结合。

石川樱井等人（2004） 分析了肌营养不良蛋白的 C 端结合结构域，并证明 β-肌营养不良聚糖结合活性是由包含 ZZ 结构域的跨越氨基酸 3026-3345 的肌营养不良蛋白片段表达的。ZZ 结构域与肌营养不良蛋白片段中的 EF1 结构域结合，以增强结合活性。ZZ 结构域中的半胱氨酸残基 3340 对于肌营养不良蛋白与 β-肌营养不良聚糖的结合至关重要。石川樱井等人（2004） 表明，在 DMD 的情况下，由于 Lenk 等人报道的错义突变 C3340Y（300377.0026）（1996），突变可能导致肌营养不良蛋白和β-肌营养不良聚糖解离，并伴随无法将肌营养不良蛋白固定在细胞膜下。

非肌肌营养不良蛋白

Chelly 等人使用 cDNA-PCR 方法检测和定量微量 mRNA（1988, 1989） 发现在每种细胞类型中组织特异性基因的转录基础水平普遍存在。他们称这种现象为非法转录。Sarkar 和 Sommer（1989） 将其称为异位转录，并表明淋巴母细胞、淋巴细胞和成纤维细胞具有正常组织特异性 mRNA 的真实版本。谢莉等人（1991）扩展了这些观察结果，证明异常转录本，例如肌营养不良症患者中截短的DMD转录本，同样可以在非肌肉培养细胞中以真实的形式得到证明。显然，这为诊断遗传异常和研究 mRNA 水平上基因缺陷的定性后果提供了有用的材料。

卡普兰等人（1992） 列出了 17 个已被记录非法转录的基因；其中 9 例被用于诊断遗传性疾病。Roberts 等人的报告建议谨慎使用异位转录（1993）缺乏忠诚度。他们描述了 50% 的人外周血淋巴细胞异位肌营养不良蛋白转录物中包含一个新的外显子。该新序列类似于癌胚抗原基因家族（114890）成员的3-prime非翻译区中的保守区域，并且位于DMD基因的第一个内含子内。这与异位转录本中预期的体内剪接行为存在显着背离，并表明异位转录本的处理方式与其组织特异性对应物类似的假设可能存在例外。也许有人会认为，非法抄本的制作会涉及到不忠行为。

大脑中肌营养不良蛋白 mRNA 的发现可以解释 DMD 患者的智力迟钝（Chamberlain 等，1988）。大脑中的肌营养不良蛋白是由与肌肉中使用的启动子不同的启动子转录的。谢莉等人（1990）证明抗肌营养不良蛋白基因的脑型启动子对神经元具有高度特异性。相比之下，肌肉型启动子在更广泛的细胞类型中具有活性，不仅包括横纹肌和平滑肌，还包括较小程度的神经胶质细胞，可能还包括神经元。

在大脑中，肌营养不良蛋白亚细胞定位于突触后密度，这是一种盘状结构，据信通过锚定突触后受体和转导信号来稳定突触。金等人（1995） 证明，杜氏肌营养不良症患者大脑中突触后密度中不存在 427-kD 肌营养不良蛋白，但在年龄匹配的对照者大脑中却存在。

巴尔等人（1990） 鉴定了从 DMD 基因转录的 6.5-kb mRNA，它似乎是许多非肌肉组织（包括大脑）中的主要 DMD 基因产物，并且显然受到不同启动子的调节。博伊斯等人（1991） 分离出大脑中编码肌营养不良蛋白替代 5 素末端的基因组区域。替代启动子的物理图谱表明，它距离肌肉中使用的启动子 5-prime 超过 90 kb，距离它所剪接的外显子 2 超过 400 kb。Boyce 等人认为，两个启动子之间的物理距离较大，再加上它们已知的组织选择性（1991）在某些患者中，肌营养不良蛋白启动子的缺失可能会导致脑或肌肉选择性肌营养不良蛋白表达的减少。他们发现了一个这样的个体，其肌营养不良蛋白肌肉启动子（300377.0002）被特异性缺失，从而导致贝克尔肌营养不良症，并且他们预测大脑启动子的特异性缺失可能是X连锁智力低下的原因之一。Scott 等人使用来自 DMD 基因 5 素端的探针（1988） 在正常肌肉和 DMD 肌肉中都发现了 mRNA，特别是在再生肌纤维中。转录本 5-prime 末端信号的发现表明，采样的 DMD 患者中没有一个具有真正的无效突变。特别是在肌肉纤维再生方面。转录本 5-prime 末端信号的发现表明，采样的 DMD 患者中没有一个具有真正的无效突变。特别是在肌肉纤维再生方面。转录本 5-prime 末端信号的发现表明，采样的 DMD 患者中没有一个具有真正的无效突变。

莱德芬等人（1992） 克隆了 6.5-kb mRNA 的完整编码序列，并在细胞提取物的蛋白质印迹中鉴定了与克隆 cDNA 的体外翻译产物共迁移的蛋白质。这种蛋白质与肌营养不良蛋白有很大不同，似乎是 DMD 基因的主要产物。它在一些非肌肉组织中的水平与肌肉中抗肌营养不良蛋白的含量相当。在骨骼肌提取物中检测不到它。它包含肌营养不良蛋白的 C 端和富含半胱氨酸的结构域、N 端的 7 个附加氨基酸以及 C 端结构域中通过选择性剪接形成的一些修饰。它缺乏血影蛋白样重复序列的整个大结构域和肌营养不良蛋白的肌节蛋白结合 N 端结构域。如前所述，来自 DMD 基因的 14 kb 肌营养不良蛋白转录本编码 427 kD 蛋白质，

Dp71 由肌营养不良蛋白的 2 个 C 末端结构域组成，是 DMD 基因的主要非肌肉产物，也是成人大脑的主要产物。为了研究由内部启动子控制的 Dp71 的可能功能及其在发育过程中的表达，Sarig 等人（1999）通过用β-半乳糖苷酶报告基因替换其第一个且独特的外显子和伴随内含子的一部分，特异性地使其表达失活。Dp71缺失小鼠胚胎和组织的X-Gal染色揭示了Dp71启动子在各种组织的发育和分化过程中具有非常阶段和细胞类型特异性的活性，包括神经系统、眼睛、肢芽、肺、血管、触须和毛囊。

布莱克等人（1992） 描述了来自 DMD 基因座的 4.8-kb 转录本，该转录本广泛表达，但在无法检测到肌营养不良蛋白的神经鞘瘤细胞中特别丰富。测序表明，4.8-kb 转录物与肌营养不良蛋白的羧基末端共享外显子，但 5 素非翻译区不包含在肌营养不良蛋白转录物中。布莱克等人（1992） 建议将 4.8-kb 基因产物称为 apo-dystropin-1，因为它的表达与肌营养不良蛋白 14-kb mRNA 不同，尽管它是从相同基因座转录的。他们在大鼠神经胶质瘤细胞系中鉴定出了第二个羧基末端编码转录本（apo-dystropin-2）。廷斯利等人（1993）克隆并测序了2。

Ahn 和 Kunkel（1993） 在一篇综述中指出，大 DMD 基因的表达受到复杂的转录和剪接控制。至少 5 个孤立的启动子以细胞特异性和发育控制的方式指定其各自的替代第一外显子的转录。三个启动子表达全长肌营养不良蛋白，而 C 末端附近的 2 个启动子以相互排斥的方式表达最后一个结构域。C 末端的六个外显子交替剪接，产生几种替代形式。抗肌营养不良蛋白的遗传、生化和解剖学研究表明，其巨大的结构多样性促进了许多不同的功能。

Torelli 和 Muntoni（1996） 报道说，外显子 4 可以在骨骼肌和心肌中剪接，并且外显子 4 的缺失显然不会产生功能后果。他们指出，已发表的证据表明肌营养不良蛋白转录物中缺少许多其他外显子，例如 Rafael 等人报道的外显子 71-74（1994） 和 England 等人报道的外显子 17-48（1990），也可能与肌营养不良蛋白功能相容。Torelli 和 Muntoni（1996） 建议该信息可用于构建小基因以克隆到病毒载体中。

巴克等人（1987） 报道了 2 个家庭，其中 pERT87（DXS164） 缺失被女性遗传给了超过 1 个后代，而她们的白细胞中没有显示出突变的证据。在其中一个家庭中，巴克等人（1987）表明该缺失在两个同胞中是相同的，因此表明该缺失发生在早期种系增殖的有丝分裂期间。Darras 和 Francke（1987） 描述了类似的情况。他们研究了一个 4 代家庭，其中的男性由于基因内缺失而患有 DMD。一名女性的 5 个女儿中，有 2 个存在这种缺失，而她本人并没有这种缺失。单倍型分析表明，缺失的染色体是从未受影响的父亲遗传的。科沃恩等人（1991）正如其他研究人员报道的那样，证明了抗肌营养不良蛋白基因缺失的种系嵌合现象。达拉斯等人（1988） 在 32 个家庭中的 3 个中发现了生发嵌合现象：在一个家庭中，一名受影响的男性将 DMD 基因的部分缺失遗传给了他 5 个女儿中的 2 个，这通过 RFLP 分析得到了证明（Darras 和 Francke，1987），并通过 cDNA 分析得到了证实；以及 2 个女性性腺嵌合体家族。Darras 和 Francke（1988） 描述了正常 DMD 基因中限制性片段和多态性的标准模式，并提出了一种诊断方法，用于上述 32 个 DMD/BMD 家族的缺失分析。

Norman 和 Harper（1989） 得出结论，2.5% 的 Duchenne/Becker 基因杂合子有症状。他们估计女性人群中表现携带者的患病率为十万分之一，这一指趾与常染色体隐性肢带型肌营养不良症的患病率相当。如果雄性和雌性配子的突变率相等，那么携带新突变 DMD 基因的女孩数量应该是男孩的两倍；其中 2.5% 预计会出现这种症状，表现为孤立病例，并导致与肢带营养不良混淆。Norman 和 Harper（1989） 提出，患有近端肌无力、肌酸激酶严重升高和小腿肥大的女性，其中肌肉活检显示原发性肌肉疾病，无其他原因，如线粒体细胞病或糖原累积病，

昆克尔等人（1985） 使用消减杂交方法克隆纯合子或半合子染色体缺失患者中缺失的特定 DNA 片段。他们将该方法应用于 Francke 等人报道的 Xp 微小间质缺失患者的 DNA（1985）。巴克等人（1985） 使用一系列 11 个 RFLP 标记，桥接 DMD 基因座，距离在 3 到 20 cM 之间。其中十个是匿名（任意）DNA 片段，一个是鸟氨酸转氨甲酰酶（OTC；300461）。在 DMD 携带者中检测到双重交叉，并在妊娠 12 周时诊断出受影响的男性胎儿，准确率可能超过 99%。雷等人（1985） 使用 rRNA 序列作为探针来克隆跨越 X;21 易位中易位断点的区域（Verellen-Dumoulin 等人，1984）。21p 的断裂位于核糖体 RNA 基因簇内。来自克隆 X 染色体部分的序列检测到与 DMD 基因密切相关的 RFLP，并揭示了一些患有 DMD 的男性的染色体缺失。在 9 个案例中的 7 个中，Boyd 和 Buckle（1986） 在 Xp21.2 中发现了断点，但在另外 2 个案例中，断点似乎在 Xp21.1 中。内文等人（1986） 报道了患有 DMD 的女性中的 X;5（p21.2;q31.2） 易位。他们将 8 份早期报告制成表格。1.内文等人（1986） 报道了患有 DMD 的女性中的 X;5（p21.2;q31.2） 易位。他们将 8 份早期报告制成表格。1.内文等人（1986） 报道了患有 DMD 的女性中的 X;5（p21.2;q31.2） 易位。他们将 8 份早期报告制成表格。

博德鲁格等人（1987） 对 Verellen-Dumoulin 等报道的 X;21 易位案例中的交换点进行了克隆、限制性图谱和测序（1984）。发现易位是相互的，但不保守。易位的染色体中缺少少量DNA；来自 X 染色体的 71 或 72 个碱基对以及来自 21 号染色体上 28S 核糖体基因的 16 至 23 个碱基对。虽然已经在分子细节上研究了许多与肿瘤相关的易位，但这可能是在核苷酸水平上研究结构性易位的第一个实例。截至本报告发布时，已有 20 例已知的 DMD-BMD 女性病例存在 X 常染色体易位，断点位于 Xp21。博德鲁格等人（1987）注意到在衍生的 X 染色体上的断点附近存在 CGGC 四核苷酸，该四核苷酸在 21 号染色体上重复了 6 次，在 X 染色体上重复了一次。尽管不确定这种有限的同源性是否可以用作易位的解释，但它可能是参与易位过程的酶的识别位点。

谢莉等人（1988） 描述了与杜氏肌营养不良、甘油激酶缺乏和肾上腺发育不全相关的染色体 Xp21 缺失。结合使用脉冲场凝胶电泳和使用连接至 DMD 基因座的多个探针的 Southern 印迹分析来完善该区域的图谱信息。数据与 4 兆碱基缺失一致，表明 GK 和 AHC 基因座位于 J66-H1 的远端和 L1 的近端。在该儿童以及其他 5 个 DMD 肌肉样本的 SDS 聚丙烯酰胺凝胶肌肉提取物的银染色中，发现在人星云蛋白区域迁移的条带。

费纳等人（1991） 鉴定了抗肌营养不良蛋白基因上游“脑”启动子周围的（CA）-n 多态性。由于这些重复序列具有高度多态性，PIC 值范围为 0.586 至 0.768，因此它们对于 DMD 家族的连锁分析应该很有用。

Towbin 等人使用针对肌营养不良蛋白 N 末端部分制备的抗肌营养不良蛋白抗体（1991） 证明 X 连锁扩张型心肌病（CMD3B; 302045） 患者的骨骼肌中肌营养不良蛋白丰度较低，但肌营养不良蛋白正常。使用 C 末端抗体的结果在心肌和骨骼肌中均正常。

张等人（2007） 鉴定了 7 个嵌入肌营养不良蛋白内含子中的新隐性外显子，这些外显子是从 DMD 患者淋巴细胞中分离出的肌营养不良蛋白 mRNA 中扩增出来的。新的外显子被指定为 1b、1c、18a、29a、63a、67a 和 77a。详细的表征表明，迄今为止确定的 14 个隐秘外显子较短，剪接受体和供体概率得分较低，并且通常比真实外显子弱。然而，神秘的外显子可能具有生理作用，因为它们保留在 mRNA 中。

▼ 进化

Sabeti 等人（2007） 报告了对国际 HapMap 项目第二阶段超过 300 万个多态性的分析。该分析揭示了 300 多个强大的候选区域，这些区域似乎最近经历了自然选择。对 22 个最强区域的检查突出显示了 3 个案例，其中共同生物过程中的 2 个基因显然在同一群体中经历了正选择：LARGE（603590） 和 DMD，两者都与西非拉沙病毒感染有关；SLC24A5（609802） 和 SLC45A2（606202），均与皮肤色素沉着有关，在欧洲；EDAR（604095） 和 EDA2R（300276） 均涉及亚洲的毛囊发育。

▼ 基因功能

普罗赫涅维奇等人（2009） 指出，肌营养不良蛋白（128240） 和肌营养不良蛋白以相似的亲和力结合肌节蛋白，但分子接触不同。肌营养不良蛋白利用 2 个低亲和力肌节蛋白结合位点，而肌营养不良蛋白利用连续肌节蛋白结合结构域。利用瞬态磷光各向异性，他​​们表明这两种蛋白质都限制了振幅并增加了肌节蛋白弯曲和扭曲的速率。然而，肌营养不良蛋白在降低肌节蛋白扭转刚度方面比肌营养不良蛋白具有更大的作用，特别是在肌节蛋白饱和度较高的情况下。与肌营养不良蛋白一样，肌营养不良蛋白对肌节蛋白聚集或成束没有影响。普罗赫涅维奇等人（2009） 假设，除了稳定肌节蛋白丝免于解聚之外，肌营养不良蛋白和肌营养不良蛋白还对肌节蛋白丝由于拉伸或扭曲而断裂提供了更大的抵抗力。

▼ 分子遗传学

摩纳哥等人（1986） 从 DMD 基因附近分离出超过 200 kb 的 DNA，并在 Southern 印迹中寻找跨物种 DNA 同源性。他们认为任何表达的外显子都会表现出进化保守性，并发现了 2 个候选探针，它们与所有测试哺乳动物的 DNA 杂交。其中一种探针 pERT-25 与胎儿肌肉 RNA 样本中存在的 16 kb 转录物发生反应，但无法用培养的人类成肌细胞或 HeLa 细胞的 mRNA 检测到。使用 pERT-25 筛选胎儿肌肉 cDNA 文库后分离出短的互补 DNA 克隆，可识别分布在 DMD 区域超过 110 kb DNA 的外显子。外推表明候选DMD基因可能有1至200万个碱基长。长达 16 KB 的信使 RNA 此前仅在 1 个实例中被发现，即 载脂蛋白 B（107730）。Bakker 和 Pearson（1986） 发现由于减数分裂重组导致突变频率异常高，导致重复/缺陷。尽管数据没有达到通常接受的统计显着性水平，但研究结果非常有启发性。在 DMD 基因座区域使用 DNA 标记可以识别重组。

科尼格等人（1987） 得出结论，DMD 转录物由至少 60 个外显子组成；转录本的前半部分由至少 33 个外显子组成，跨度近 1000 kb，其余部分至少有 27 个外显子，它们可能分布在类似的距离上。在 104 名 DMD 男孩中，有 53 名男孩发现 DNA 缺失。大多数缺失集中在单个基因组片段中，对应于仅 2 kb 的转录本。Worton（1987） 发现了 DMD 基因座的重复和缺失。这些可能是通过这个非常大的基因内的不平等交换而产生的。

丁尼生等人（1995） 指出 DMD 基因有 79 个外显子，跨度至少为 2,300 kb（2.3 Mb）。他们在肌肉细胞培养物中诱导表达后监测了该基因 4 个区域的转录积累。定量 RT-PCR 结果表明，转录 1,770 kb 大约需要 12 小时（平均延伸率为每 6 秒 2.4 kb），推断完整基因的转录时间为 16 小时。剪接转录本和总转录本的累积概况表明，转录本在转录完成之前在 5-prime 末端进行剪接，为共转录剪接提供了有力的证据。

哈特等人（1987） 研究了 33 名贝克肌营养不良症患者的 DNA。发现其中 3 个在 DXS164 中存在缺失，表明其频率与 DMD 中的缺失频率大致相同。在 2 例显示大量缺失的病例中，其中 1 例处于 BMD 临床谱的严重末端。Monaco 和 Kunkel（1987） 回顾了 DMD/BMD 轨迹的工作。缺失的总体发生率（6.5%） 与其他 X 连锁疾病如 Lesch-Nyhan 综合征、鸟氨酸转氨甲酰酶缺乏症（311250） 和血友病 A 中发现的频率相似。来自保守区人类基因组序列中潜在 5-prime 和 3-prime 剪接位点的方向（Monaco 等，1986）以及该序列与 DXS 限制性图谱的关系164个先前已定位在短臂上的位点，DMD基因的转录方向预计是从着丝粒到短臂末端。Monaco 和 Kunkel（1987） 预测对应于 cDNA 克隆的外显子平均大小小于 150 bp，平均内含子大小为 16 kb。根据 cDNA 克隆的长度与它们杂交的 DXS164 位点基因组 DNA 的比率，我们可以推断出 16 kb 的大转录本可能对应于多达 1 至 2 百万 bp 的基因组 DNA。这大约相当于人类基因组的 0.05% 和大肠杆菌基因组的二分之一。使用脉冲场凝胶电泳和在稀有位点切割的限制性内切酶进行的长距离作图表明，X;6 和 X;11 易位断点相距超过 1,000 kbp。Monaco 和 Kunkel（1987） 预测对应于 cDNA 克隆的外显子平均大小小于 150 bp，平均内含子大小为 16 kb。根据 cDNA 克隆的长度与它们杂交的 DXS164 位点基因组 DNA 的比率，我们可以推断出 16 kb 的大转录本可能对应于多达 1 至 2 百万 bp 的基因组 DNA。这大约相当于人类基因组的 0.05% 和大肠杆菌基因组的二分之一。使用脉冲场凝胶电泳和在稀有位点切割的限制性内切酶进行的长距离作图表明，X;6 和 X;11 易位断点相距超过 1,000 kbp。Monaco 和 Kunkel（1987） 预测对应于 cDNA 克隆的外显子平均大小小于 150 bp，平均内含子大小为 16 kb。根据 cDNA 克隆的长度与它们杂交的 DXS164 位点基因组 DNA 的比率，我们可以推断出 16 kb 的大转录本可能对应于多达 1 至 2 百万 bp 的基因组 DNA。这大约相当于人类基因组的 0.05% 和大肠杆菌基因组的二分之一。使用脉冲场凝胶电泳和在稀有位点切割的限制性内切酶进行的长距离作图表明，X;6 和 X;11 易位断点相距超过 1,000 kbp。根据 cDNA 克隆的长度与它们杂交的 DXS164 位点基因组 DNA 的比率，我们可以推断出 16 kb 的大转录本可能对应于多达 1 至 2 百万 bp 的基因组 DNA。这大约相当于人类基因组的 0.05% 和大肠杆菌基因组的二分之一。使用脉冲场凝胶电泳和在稀有位点切割的限制性内切酶进行的长距离作图表明，X;6 和 X;11 易位断点相距超过 1,000 kbp。根据 cDNA 克隆的长度与它们杂交的 DXS164 位点基因组 DNA 的比率，我们可以推断出 16 kb 的大转录本可能对应于多达 1 至 2 百万 bp 的基因组 DNA。这大约相当于人类基因组的 0.05% 和大肠杆菌基因组的二分之一。使用脉冲场凝胶电泳和在稀有位点切割的限制性内切酶进行的长距离作图表明，X;6 和 X;11 易位断点相距超过 1,000 kbp。

塔弗里·吉罗等人（2009） 描述了法国 DMD 基因突变数据库，其中包括 2,411 个条目，其中包含在 2,046 名男性患者和 38 名表达女性患者中发现的 2,084 个孤立突变事件。这相当于法国每百万人中 39 人被基因诊断为“肌营养不良症”的估计频率。数据库中的突变包括1,404个大缺失、215个大重复和465个小重排，其中39.8%是无义突变。大约 24% 的突变是从头发生的。研究发现，法国 BMD 的真实发生率几乎是 DMD 的一半（43%）。

在评估 DMD 突变的 624 个指示病例中，Oshima 等人（2009） 报道在 238 个（38.1%） 样本中检测到基因组重排。检测到缺失188例（79.0%），其中单外显子缺失31例，多外显子缺失157例。大多数缺失位于该基因的外显子 45 和 52 之间以及外显子 8 和 13 之间。在 44 例（18.5%） 病例中检测到重复，其中 12 例涉及单外显子，32 例涉及多外显子。在 6 例（2.5%） 病例中检测到复杂的重排。其余386例结果正常。大岛等人（2009） 选择了 15 个独特的重排，其中没有一个具有共同的断点，并使用阵列 CGH 和 MLPA 分析来评估重排的机制。其中十四个缺失在断点处具有微同源性和小插入，与 DNA 损伤和修复后的非同源末端连接（NHEJ） 机制一致。对 3 个复杂的基因内 DMD 基因重排的分析确定了几个可能导致基因组不稳定的特征，包括与重复序列对齐的断点、涉及茎环结构的倒位/删除、复制依赖性叉停顿和模板切换（FoSTeS） 以及导致二次删除的重复。

竹岛等人（2010） 报道了日本 DMD/BMD 数据库中患者的基因组、cDNA 和染色体分析结果。所有442名患者均发现DMD基因突变，其中缺失和重复分别占270例（61%）和38例（9%）；无义突变或剪接位点突变分别占 69 例（16%） 和 24 例（5%）；34 例（8%） 病例中存在小缺失/插入突变。X染色体异常2例，异常改变6例。93% 的缺失和 66% 的重复突变病例均遵循阅读框规则。诱导外显子跳跃被认为是治疗肌营养不良症的首要任务。

删除

DMD 基因最常见的致病突变类型是 1 个或多个外显子的缺失，在大约 60% 至 65% 的患者中发现这种突变（Oshima 等，2009）。

戈斯佩等人（1989） 描述了一个患有 X 连锁肌痛和痉挛的非凡家庭，其原因是与肌营养不良蛋白基因缺失相关的非进行性肌病，并且可能是由肌营养不良蛋白基因缺失引起的。九名受影响的男性家庭成员的静息血清肌酸激酶水平较高，肌肉组织发育良好，小腿肥大，但没有肌肉无力的证据。症状从童年开始，并且没有进展。肌电图检查结果与肌病一致，而肌肉活检显示非特异性肌病变化，没有糖原或脂质储存的证据。DNA 分析显示肌营养不良蛋白基因的前三分之一被删除。蛋白质印迹分析显示，肌营养不良蛋白比正常蛋白小，但蛋白质含量没有减少。

多里古齐等人（1993） 描述了一名 9 岁时出现劳力性肌痛和 2 次肌红蛋白尿发作史的患者。17岁时，患者出现全身肌肉肥大，但无肌无力。基因组 DNA 分析显示，从外显子 45 到外显子 48 的 HindIII 片段被删除。

Minetti 和 Bonilla（1992） 指出，女性杂合子肌肉活检标本中正常纤维和肌营养不良蛋白缺陷纤维的镶嵌图案不仅可见于 DMD 携带者，也可见于 Gospe 等人报道的家族性 X 连锁肌痛和痉挛综合征的携带者（1989），以及贝克型肌营养不良症的携带者。

Lindlof 等人使用 DNA 标记（1988）发现36%的Becker家族和8%的Duchenne家族存在缺失。他们的研究小组有 37 个 DMD 家族和 11 个 BMD 家族。den Dunnen 等人使用传统 Southern 印迹和场反转凝胶电泳（FIGE） 分析研究了 34 名 Becker 和 160 名杜氏肌营养不良症患者（1989） 发现了 128 个突变（65%）、115 个缺失和 13 个重复。他们确定 DMD 基因的大小约为 230 万个碱基对。内含子的大小从几千碱基到内含子44的160至180 kb不等。在Werner和Spiegler（1988）的研究中，先证者祖母的X染色体是正常的，表明母亲的缺失是一种新的突变。阅读等人（1988） 发现 60% 的 DMD 和 BMD 患者有 1 个或多个外显子缺失。所有 BMD 患者中有一半有 1 个特定的小组外显子缺失；同一组内较小的缺失会产生 DMD。

麦凯布等人（1989） 研究了首次报道的患有营养不良性肌病、甘油激酶缺乏和先天性肾上腺发育不全综合征的两兄弟中的一位。基因组探针未检测到该患者的缺失。利用 cDNA 探针，他们证明了从距 14 kb DMD cDNA 5 引物末端约 10.5 kb 的位置开始的缺失，并延伸至 DMD 基因的 3 引物末端。Mao 和 Cremer（1989） 表明，通过剂量效应，可以证明 DMD 患者女性亲属的携带者状态，显示 DMD cDNA 克隆内的缺失。林德洛夫等人（1989） 研究了 90 名无关的 DMD 或 BMD 患者。这些代表了芬兰一半以上的已知家庭。一半患者删除了 65 个包含外显子的 HindIII 片段中的 1 个或多个。使用12岁的轮椅年龄来区分DMD和BMD，他们发现缺失的患者比例相似。此外，缺失在家族性和散发性疾病中同样常见。他们发现，与 DMD 相比，BMD 更常见的是由基因 5 素末端缺失引起的。如果假设雌性减数分裂中 2 X 染色体之间的不等交换可以解释缺失的产生，那么重复应该以相同的频率产生。然而，与 DMD 患者中发现的高比例缺失相比，重复相对较少（Betecken 和 Muller，1989）。他们发现，与 DMD 相比，BMD 更常见的是由基因 5 素末端缺失引起的。如果假设雌性减数分裂中 2 X 染色体之间的不等交换可以解释缺失的产生，那么重复应该以相同的频率产生。然而，与 DMD 患者中发现的高比例缺失相比，重复相对较少（Betecken 和 Muller，1989）。他们发现，与 DMD 相比，BMD 更常见的是由基因 5 素末端缺失引起的。如果假设雌性减数分裂中 2 X 染色体之间的不等交换可以解释缺失的产生，那么重复应该以相同的频率产生。然而，与 DMD 患者中发现的高比例缺失相比，重复相对较少（Betecken 和 Muller，1989）。

鲍姆巴赫等人（1989） 发现，由于雌性配子突变（75%） 而受影响的男性中 DMD 基因缺失的频率高于由雄性配子突变（56%） 导致的男性。通过检查缺失位点两侧的信息丰富的 RFLP 来寻找重组证据，他们未能在所研究的 12 个案例中检测到与缺失形成相关的非法重组证据。

DMD 基因的部分基因缺失或重复约占杜氏肌营养不良症病例的 65%。这些突变聚集在 2 个热点：30% 位于基因近端部分的热点，约 70% 位于更远端的热点。通过比较 DMD 孤立病例和家族病例中观察到的突变谱，为嵌合病例的不同频率提供了孤立支持。Passos-Bueno 等人对来自巴西和荷兰的 473 名患者进行了一项 2 中心研究（1992） 发现，孤立病例中近端与远端缺失的比例为 1:3，家族病例中为 1:1。从这些数据中，他们得出结论，近端缺失可能发生在胚胎发育的早期，导致它们有更高的机会成为家族成员，而远端缺失发生较晚，并且更有可能仅导致孤立的病例。他们的研究结果表明，“近端”新突变体的复发风险增加约 30%，“远端”新突变体的复发风险增加约 4%。

抗肌营养不良蛋白基因座的中心部分是导致 DMD 的优先缺失位点。例如，内含子 44 长 160-180 kb，是所有 DMD 缺失中约 30% 的一个断点位点（Baumbach 等，1989）。Pizzuti 等人通过对 DMD 患者的缺失连接片段进行测序，（1992） 证明内含子 43 中缺失的近端断点落在转座子样元件的序列内。该片段属于人类转座元件THE-1家族，通常以完整形式存在于DMD基因的内含子43中。缺失突变是母系遗传的，消除了三分之二的THE-1元件。另一名患有 DMD 的患者和同一 THE-1 元件内的近端断点映射被确定。THE-1 元素为 2。3 kb 长，两侧是 350 bp LTR，以序列 5-prime-GT 开始，以 CA-3-prime 结束（Paulson 等，1985）。尽管尚未发现与其他逆转录病毒序列的同源性，THE-1 元件仍被归类为逆转录转座子（Finnegan，1989）。完整的元素在基因组中出现了 10,000 次。

在患有 DMD 和细胞学平衡的体质相互易位 t（X;4）（p21.2;q31.22） 的女孩中，Giacalone 和 Francke（1992） 发现 DMD 基因在 18 kb 内含子 16 内被破坏。对跨越易位断点以及相应正常区域的克隆进行限制性图谱和测序表明，在衍生 X 染色体的形成过程中损失了大约 5 kb，其中从 4 号染色体上删除 4 至 6 bp。RFLP 和 Southern 分析表明，从头易位是父系起源，父亲的 X 染色体含有衍生 X 中删除的 DNA。删除和易位可能同时由涉及 3 个染色体断点的复杂重排事件引起。序列同源性的短区域存在于这 3 个位点。在正常 X 和 4 染色体上的易位断点处准确地发现了 5 bp 序列 GGAAT；该序列仅保留在衍生的 4 号染色体上。研究结果表明，可能有一种机制将这 3 个位点并置，并介导雄性减数分裂中非同源染色体之间的序列特异性断裂和重组。

胡普等人（1994） 发现患有杜氏肌营养不良症的 2 个表兄弟姐妹具有不同的肌营养不良蛋白单倍型和不同的缺失突变。在其中 1 个表亲中，有 2 个不连续的缺失：1 个位于 5 素数、近端缺失热点区域，另一个位于 3 素数、更远端的缺失热点区域。第二个表兄弟仅显示 5 个素数缺失。胡普等人（1994） 表明，每个产妇的母亲在同一条祖母 X 染色体上都携带两种缺失。两个表兄弟中的差异结果可以通过携带者的 1 个抗肌营养不良蛋白基因的 2 个删除区域之间的单一重组事件来解释，从而产生一个具有部分“修复”基因的儿子，该基因仅保留 5 素体缺失。

竹岛等人（1994） 报道了一名日本男孩，其临床症状介于杜氏肌营养不良症和贝克尔肌营养不良症之间。抗肌营养不良蛋白基因的外显子 3 至 41 存在较大的框内缺失，并且没有明显的与针对氨基末端的抗体的结合。作者推测，该疾病严重程度的增加可能是由于缺乏肌营养不良蛋白的肌节蛋白结合域。

蒙托尼等人（1993） 证明 X 连锁形式的扩张型心肌病（CMD3B; 302045） 是由于 DMD 基因（300377.0021） 的启动子区域和第一个外显子的缺失所致。

重复

Hu 等人在 2 名 DMD 患者和 1 名 BMD 患者中（1988）通过Southern印迹分析和透射光密度测定法发现了该基因座内的重复区域。在 2 例中，可以看到跨越重复连接点的新限制性片段，表明重复是串联排列的。通过遵循重复连接片段的分离，在这两个家族中显示了孟德尔遗传。他们表明，所有 3 个重复都是基因内部的，因此可以通过破坏外显子组织而导致遗传性疾病。

胡等人（1989） 报道了 3 个家庭，每个家庭都有一名患有杜兴氏或贝克尔肌营养不良症的男性，每个家庭都显示 DMD 基因内含有外显子的 DNA 片段在先证者、他们的母亲以及（其中 2 个病例）他们的姐妹中重复。通过 RFLP 和重复分析证明了重复的祖父起源。结果表明，不平等的姐妹染色单体交换（最有可能发生在先证者祖父的生殖细胞谱系中）是产生这些重复的原因，并且这种类型的染色体内重排在肌营养不良症基因中很常见。胡等人（1990） 鉴定了 10 个 DMD 基因部分重复的病例，非缺失病例的频率为 14%（10/72），或所有病例的频率为 6%（10/181）。他们在 4 个家庭中证明了重复的祖父母起源，在 1 个家庭中证明了祖父母起源。在所有 5 个家族中，重复均源自一条 X 染色体；因此，不平等的姐妹染色单体交换可能是重复的机制。

Angelini 等人在一名贝克尔型肌营养不良症患者中进行了研究（1990） 发现 DMD 基因有超过 400,000 bp 的重复。重复完全包含在基因内，并且重复的外显子预计位于框架内。在患者的肌肉中检测到肌营养不良蛋白作为约 600 kD 的单一种类，而正常值约为 400 kD，表明突变基因编码超过 100 个外显子的可翻译 mRNA，而正常值约为 70 个外显子。DNA 和蛋白质分析表明，母亲携带重复基因。这种肌营养不良蛋白基因及其编码的蛋白质（以该家族起源的意大利地区命名，称为肌营养不良蛋白弗留利）是截至报告发布时最大的特征。利用位于 DMD 基因两端的多态性位点，阿布斯等人（1990） 估计在大约 2 Mb 的基因组长度上，基因内重组率接近 0.12（置信区间，0.041-0.226）。

Hu 和 Worton（1992） 回顾了部分基因重复作为人类疾病的原因。研究血红蛋白的 Ingram（1961） 认为基因复制是进化的重要机制（1962） 研究了触珠蛋白基因，Ohno（1970） 则进行了一般性讨论。蛋白质氨基酸序列比较提供了许多蛋白质具有共同祖先相关的线索（Doolittle，1981）。第一个报道的携带部分基因重复的患者是一名患有 Lesch-Nyhan 综合征的男性（Yang 等，1984）；参见 308000.0047。正如 Hu 和 Worton（1992） 所评论的，在许多其他疾病中也观察到了部分重复。DMD 基因的部分重复导致了 6% 至 7% 的杜氏肌营养不良症和贝克尔肌营养不良症突变。一般来说，当阅读框没有被破坏时，表型是贝克尔肌营养不良症，而阅读框移动会导致更严重的疾病，这一规则是正确的。在其他疾病中也观察到了框内和移码基因重复。Hu 和 Worton（1992） 指出，对重复连接点进行序列分析后，发现 8 个致病重复中的 2 个代表 Alu 元件之间的同源重组，其中一个病例导致家族性高胆固醇血症（143890），另一个病例导致 DMD（Hu 等人，1991）。另外6例涉及非同源序列之间的重组。在这些情况下，I 型和 II 型拓扑异构酶可能发挥作用；证据来自以下事实：已在两条亲本链的断点处确定了首选的拓扑异构酶切割位点。

怀特等人（2006） 在 230 多名 DMD/BMD 患者中发现了 118 个 DMD 基因重复。在未经选择的患者系列中，重复频率为 7%；在之前筛查过缺失和点突变的患者中，重复频率为 87%。重复频率在基因 5 素端附近最高，外显子 2 的重复是识别出的最常见的重复。4 个外显子 2 重复断点的序列分析表明，它们并非由不平等的姐妹染色单体交换引起，而更可能是由合成依赖性非同源末端连接引起。

点突变

伦克等人（1993） 对 26 名 DMD/BMD 患者的 DMD 基因外显子 60-79 进行了 PCR-SSCP 分析，没有检测到缺失。该研究鉴定出 7 个点突变和 1 个内含子多态性。DMD 患者中发现的 6 个点突变预测翻译过早终止。在一名 BMD 患者中发现的一个点突变导致了氨基酸交换。5 名带有点突变的 DMD 患者存在精神发育迟滞，这表明 C 末端区域翻译阅读框的破坏与 DMD 病例中的这一临床发现特别相关。作者提出了这样一种可能性：DMD 基因的 C 端翻译产物 Dp71 和/或 Dp116 可能与 DMD 相关的智力低下病例有因果关系。在这方面，Lederfein 等人（1993）指出Dp71是DMD基因远端部分的70.8-kD蛋白质产物，在许多细胞类型和组织中表达。他们使用锚定 PCR、引物延伸和转染构建体的功能分析来确定 mRNA 的 5 引物末端，并表征 Dp71 的启动子。Dp71 的 5-prime 非翻译区由单个外显子转录而来；该启动子不包含 TATA 框，并且具有非常高的 GC 含量和几个潜在的 Sp1 结合位点。它位于距离肌肉型和脑型肌营养不良蛋白启动子超过 2 Mb 3-prime 处，距离 DMD 基因 3-prime 末端仅 150 kb，这表明在大多数 DMD 患者中，Dp71 的表达不受影响。他们使用锚定 PCR、引物延伸和转染构建体的功能分析来确定 mRNA 的 5 引物末端，并表征 Dp71 的启动子。Dp71 的 5-prime 非翻译区由单个外显子转录而来；该启动子不包含 TATA 框，并且具有非常高的 GC 含量和几个潜在的 Sp1 结合位点。它位于距离肌肉型和脑型肌营养不良蛋白启动子超过 2 Mb 3-prime 处，距离 DMD 基因 3-prime 末端仅 150 kb，这表明在大多数 DMD 患者中，Dp71 的表达不受影响。他们使用锚定 PCR、引物延伸和转染构建体的功能分析来确定 mRNA 的 5 引物末端，并表征 Dp71 的启动子。Dp71 的 5-prime 非翻译区由单个外显子转录而来；该启动子不包含 TATA 框，并且具有非常高的 GC 含量和几个潜在的 Sp1 结合位点。它位于距离肌肉型和脑型肌营养不良蛋白启动子超过 2 Mb 3-prime 处，距离 DMD 基因 3-prime 末端仅 150 kb，这表明在大多数 DMD 患者中，Dp71 的表达不受影响。Dp71 的 5-prime 非翻译区由单个外显子转录而来；该启动子不包含 TATA 框，并且具有非常高的 GC 含量和几个潜在的 Sp1 结合位点。它位于距离肌肉型和脑型肌营养不良蛋白启动子超过 2 Mb 3-prime 处，距离 DMD 基因 3-prime 末端仅 150 kb，这表明在大多数 DMD 患者中，Dp71 的表达不受影响。Dp71 的 5-prime 非翻译区由单个外显子转录而来；该启动子不包含 TATA 框，并且具有非常高的 GC 含量和几个潜在的 Sp1 结合位点。它位于距离肌肉型和脑型肌营养不良蛋白启动子超过 2 Mb 3-prime 处，距离 DMD 基因 3-prime 末端仅 150 kb，这表明在大多数 DMD 患者中，Dp71 的表达不受影响。

罗伯茨等人（1992） 描述了一种识别三分之一 DMD 患者基本缺陷的通用方法，这些患者没有表现出肌营养不良蛋白基因的总体重排。该方法涉及巢式扩增、化学错配检测以及对来自外周血淋巴细胞的痕量肌营养不良蛋白 mRNA 的逆转录物进行测序。对 7 名患者的整个编码区（11 kb） 的分析结果检测到每个病例中的序列变化，这些变化显然足以导致疾病。所有突变预计都会导致翻译过早终止，因此产生的表型与移码缺失引起的表型相同；参见 300377.0003-300377.0009。

Kilimann 等人通过对多重 PCR 扩增的 13 个外显子进行化学错配切割（1992） 同样在 60 名 DMD 患者中寻找点突变，没有检测到缺失或重复。据估计，该分析覆盖了大约 20% 的肌营养不良蛋白编码序列。他们鉴定出 2 个点突变和 4 个多态性。这两个点突变都是移码突变，分别位于外显子 12 和 48，并且紧随其后的是终止密码子，从而解释了肌营养不良蛋白基因产物的功能缺陷。Schwartz 等人使用在自动测序仪上分析的荧光 PCR 产物（1992） 开发了一种快速、准确的基于 PCR 的连锁和载体检测方法，用于患有 DMD 或 BMD 的家族，无论是否有可检测到的抗肌营养不良蛋白基因缺失。当通过标准多重PCR在受影响的男性中发现缺失时，通过使用低循环数（20个循环）的多重PCR，使用对缺失和未缺失的外显子特异的荧光标记引物来扩增有风险的女性亲属的DNA。然后在自动测序仪上对产物进行定量分析，以确定它们是否是缺失杂合的，从而代表载体。作为连锁数据的确认，并且在先证者中未发现缺失的情况下，通过使用位于整个肌营养不良蛋白基因中的4个先前描述的多态二核苷酸（CA）n重复来完成荧光多重PCR连锁。使用针对缺失和非缺失外显子的荧光标记引物，通过低循环数（20 个循环）的多重 PCR 扩增高危女性亲属的 DNA。然后在自动测序仪上对产物进行定量分析，以确定它们是否是缺失杂合的，从而代表载体。作为连锁数据的确认，并且在先证者中未发现缺失的情况下，通过使用位于整个肌营养不良蛋白基因中的4个先前描述的多态二核苷酸（CA）n重复来完成荧光多重PCR连锁。使用针对缺失和非缺失外显子的荧光标记引物，通过低循环数（20 个循环）的多重 PCR 扩增高危女性亲属的 DNA。然后在自动测序仪上对产物进行定量分析，以确定它们是否是缺失杂合的，从而代表载体。作为连锁数据的确认，并且在先证者中未发现缺失的情况下，通过使用位于整个肌营养不良蛋白基因中的4个先前描述的多态二核苷酸（CA）n重复来完成荧光多重PCR连锁。

罗伯茨等人（1994） 回顾了三分之一与小突变相关的 DMD 和 BMD 病例的分子病因学。他们回顾了 70 个这样的突变，并惊讶于这样一个事实：对于如此保守的基因，错义突变非常罕见。绝大多数 DMD 点突变，如总重排，会导致翻译过早终止，即无义突变。大多数 DMD 病例似乎是由于肌营养不良蛋白转录物水平降低而引起的。所审查的少数 BMD 点突变中的大多数是 N 端或 C 端结构域的错义突变，或者是剪接位点突变，这些突变可能像 BMD 删除一样，通过产生框内、间质删除的转录本发挥作用。

超过 60% 的 DMD 和 BMD 突变是可变大小的缺失。据报道，该基因 5 素数部分和中心部分的 2 组连续外显子的缺失频率较高；这些分别被称为“次要”和“主要”删除热点。基因 5 素端附近断点频率的增加与一些内含子的大尺寸直接相关，而在中央基因内区域，最高密度的缺失断点（每个内含子长度的断点数量）出现在外显子 45 和 51 之间（Nobile 等，1997）。该区域较小的内含子之一，内含子 49，其断点密度比内含子 7 和 44 高 4 至 5 倍。为了确定导致内含子 49 缺失的机制，Nobile 等人（2002） 沿其长度局部定位了 22 个删除断点。他们发现断点均匀分布在整个内含子长度上，并且在每个断点附近的序列之间没有观察到广泛的同源性。然而，在 3 个断点连接处或附近发现了能够使 DNA 分子弯曲的短序列。

DMD 基因的缺失和点突变会导致 DMD 或更轻微的贝克尔肌营养不良症，具体取决于翻译阅读框是丢失还是维持。德·安吉利斯等人（2002） 推断，由于蛋白质中的内部框内删除仅产生轻微的肌病症状，因此可以通过防止成熟肌营养不良蛋白 mRNA 中包含特定突变的外显子来恢复部分纠正的表型。这种控制以前是通过使用合成寡核苷酸来实现的。为了避免定期施用合成寡核苷酸的不利必要性，De Angelis 等人（2002）产生了几种能够在体内以稳定的方式表达大量含有反义序列的嵌合RNA的构建体。他们表明，针对外显子 51 剪接点的反义分子能够在人类 DMD 缺失 48-50 中引导该外显子的跳跃，并挽救肌营养不良蛋白的合成。他们还表明，当针对 5-prime 和 3-prime 剪接位点的反义构建体在同一细胞中共表达时，发生最高的跳跃活性。在 DMD 患者培养的成肌细胞中测试了这些效果。外显子 48-50 的缺失导致外显子 51 中出现提前终止密码子。与外显子 51 剪接点互补的反义序列诱导外显子 51 的有效跳跃并部分挽救肌营养不良蛋白的合成。他们还表明，当针对 5-prime 和 3-prime 剪接位点的反义构建体在同一细胞中共表达时，发生最高的跳跃活性。在 DMD 患者培养的成肌细胞中测试了这些效果。外显子 48-50 的缺失导致外显子 51 中出现提前终止密码子。与外显子 51 剪接点互补的反义序列诱导外显子 51 的有效跳跃并部分挽救肌营养不良蛋白的合成。他们还表明，当针对 5-prime 和 3-prime 剪接位点的反义构建体在同一细胞中共表达时，发生最高的跳跃活性。在 DMD 患者培养的成肌细胞中测试了这些效果。外显子 48-50 的缺失导致外显子 51 中出现提前终止密码子。与外显子 51 剪接点互补的反义序列诱导外显子 51 的有效跳跃并部分挽救肌营养不良蛋白的合成。

Aartsma-Rus 等人（2004） 指出，一系列反义寡核苷酸（AON） 已被鉴定，可用于诱导 20 个不同的 DMD 外显子的跳跃，理论上，这对 75% 以上的 DMD 患者有益。为了进一步扩大这个比例，他们研究了双外显子和多外显子跳跃的可行性。在一名外显子 46-50 缺失的患者中，实现了外显子 45 和 51 的治疗性双跳跃。值得注意的是，在对照肌管中，后一种 AON 组合导致整个外显子段从 45 到 51 跳跃。这种框内多外显子跳跃对于一系列携带不同 DMD 突变的患者将具有治疗作用。事实上，他们在外显子 48-50 缺失患者的肌管中证明了其可行性。

Van Essen 等人在患有 DMD 的男性中（2003） 发现了 DMD 基因（300377.0078） 中的一个点突变，该突变的母亲是嵌合体。他们指出，DMD 点突变的种系嵌合现象以前只报道过两次（参见 300377.0022 和 Smith 等，1999）。

布津等人（2005） 对 141 名 DMD 患者进行了突变分析，之前通过标准多重 PCR 检测发现这些患者的大缺失呈阴性。通过检测基本上所有点突变的方法对所有编码外显子、相邻内含子剪接区和启动子序列进行全面突变扫描。进一步分析点突变阴性样本的重复情况。90% 的患者检测到推定致病突变：70% 是蛋白质截断点突变，13% 是重复，7% 是缺失。其中四十个突变被认为是新颖的。布津等人（2005） 指出，这是首次对肌营养不良蛋白基因点突变的绝对率和相对率进行分析。相对于每代每 bp 的频率为 0.68 x 10（-9） 的微缺失，CpG 二核苷酸处的转换增强了 150 倍，而复杂插入/缺失（indels）（最不常见的突变类型）的频率比微缺失低 5 倍。发现单核苷酸重复处的微缺失和微插入频率随长度呈指数增加。与经过充分研究的人类因子 IX 基因（F9; 300746） 相比，结果相似，但有 2 个例外：抗肌营养不良蛋白基因 CpG 二核苷酸处的突变热点、导致 arg2905 到 ter 取代的 8713C-T 转变（R2905X; 300377.0082） 以及微缺失大小分布的改变。突变率约为1。DMD 基因中的 8713C-T 热点突变每代每个核苷酸 7 x 10（-6），与人类基因组中已知的 3 个最高突变核苷酸的比率相似：FGFR3 基因中的 CpG 1138G-A 转变为 8.2 x 10（-6）（134934.0001），导致软骨发育不全（100800） ）；5 x 10（-6） 为 FGFR2 基因（176943.0010） 中的 CpG 934C-G 颠换，导致阿珀特综合征（101200）；2.7 x 10（-6） 也用于 FGRF2（176943.0011） 中的 937C-G 颠换，尽管不是在 CpG，并且也是阿佩尔综合征的病因。FGFR基因的热点突变占这些基因致病突变的97%以上，但肌营养不良蛋白基因除了热点突变外，还存在多种点突变。导致软骨发育不全（100800）；5 x 10（-6） 为 FGFR2 基因（176943.0010） 中的 CpG 934C-G 颠换，导致阿珀特综合征（101200）；2.7 x 10（-6） 也用于 FGRF2（176943.0011） 中的 937C-G 颠换，尽管不是在 CpG，并且也是阿佩尔综合征的病因。FGFR基因的热点突变占这些基因致病突变的97%以上，但肌营养不良蛋白基因除了热点突变外，还存在多种点突变。导致软骨发育不全（100800）；5 x 10（-6） 为 FGFR2 基因（176943.0010） 中的 CpG 934C-G 颠换，导致阿珀特综合征（101200）；2.7 x 10（-6） 也用于 FGRF2（176943.0011） 中的 937C-G 颠换，尽管不是在 CpG，并且也是阿佩尔综合征的病因。FGFR基因的热点突变占这些基因致病突变的97%以上，但肌营养不良蛋白基因除了热点突变外，还存在多种点突变。

米拉辛等人（1996） 报道了一个患有 X 连锁扩张型心肌病（302045） 的家族，其肌营养不良蛋白 E1-I1 边界（300377.0025） 的 5 素剪接位点存在点突变。

在一名患有无症状肌营养不良症（参见 300376）的 12 岁男孩中，Yagi 等人（2003） 鉴定了 DMD 基因（300377.0083） 内含子 2 中的点突变，该突变为剪接受体位点创建了 AG 二核苷酸共有序列，预计会产生新的外显子结构，然后将其掺入肌营养不良蛋白 mRNA 中。八木等人（2003）指出，通过单核苷酸变化产生剪接受体位点并导致额外的外显子结构是人类疾病中的一种新的分子机制。

西山等人（2008） 发现 DMD 基因中的 38 个无义突变中有 7 个（18%） 导致培养的淋巴细胞中无义编码外显子的部分跳过和肌营养不良蛋白 mRNA 的选择性剪接。其中 5 名异常剪接产物预计会产生半功能性蛋白质，但只有 1 名患者具有轻度表型。然而，肌营养不良蛋白 mRNA 并未在肌肉中进行分析。数据还显示，具有相同无义突变的患者在救援转录物产生方面表现出差异，这表明患者之间的剪接调节存在个体差异。

勒加迪尼尔等人（2009） 分析了由外显子 59 编码且对应于 DMD 蛋白残基 2800 至 2939 的杆结构域重复 23（R23） 区域中 2 个突变的功能后果。体外研究表明，与野生型蛋白相比，E2910V（300377.0061）/N2912D（300377.0062） 双突变蛋白表现出明显较低的热稳定性和化学稳定性以及较慢的重折叠速度。与野生型相比，双突变体的变异大于单突变体观察到的变异。这些突变似乎影响了稳定三重α螺旋卷曲螺旋重复的静电势。勒加迪尼尔等人（2009） 得出结论，杆结构域重复稳定性的变化可以解释肌营养不良蛋白机械性能的丧失和肌肉细胞的缺陷。

剪接位点突变的主要后果是外显子跳跃和隐性剪接位点激活。通过体外剪接分析，Habara 等人（2009）发现DMD基因的内含子25（3432+1G-A）和内含子45（6614+1G-A）中的+1G-A剪接位点突变并不总是引起相同的效果。内含子 25 中的 3432+1G-A 突变导致外显子跳跃和较温和的 Becker 表型，而内含子 45 中的 6614+1G-A 突变由于使用隐秘供体位点而产生 3 个产物，并导致更严重的 Duchenne 表型。对文献中报告的 13 个额外 +1G-A 剪接位点突变（参见，例如 300377.0066；300377.0068）以及当前研究中的 2 个突变进行的计算机分析显示，11 个突变与外显子跳跃相关，4 个突变与隐秘剪接位点相关。

▼ 基因型/表型相关性

Kunkel（1986） 使用克隆的 DNA 片段 DXS164（pERT 87） 测试了 DMD/BMD 男孩 DNA 中发现的缺失频率，以及该克隆片段在确定 DMD 遗传方面的准确性（Kunkel 发表的报告代表了世界许多地区约 24 个机构的 76 名工作人员。）总共研究了 1,346 个案例；该探针在 88 例（6.5%）中发现了缺失：650 例家族性 DMD 病例（8.3%）中有 54 例缺失；551 例散发性 DMD 病例中有 32 例（5.8%）；145 例 BMD 病例中有 2 例（1.4%）。DXS164 似乎有 5% 的时间与 DMD 重组，但被认为位于产生 DMD 的孤立突变位点之间。一些缺失的断点在 DXS164 片段内划定。显然，DMD 基因座的缺失非常频繁且异常大（其中大多数超过 137 kb）。

福雷斯特等人（1987） 将可检测到缺失的家庭比例增加到 40%。大多数这些缺失被发现是在 cDNA 的同一区域开始的，这意味着其中许多缺失的产生有一个共同的机制。1 个家庭中的一个明显相同的缺失导致 2 个兄弟（十几岁时出现）出现典型的 BMD，而他们 86 岁的曾曾叔伯仅出现非常轻微的肌肉无力。尤为重要的是，福雷斯特等人（1987） 在筛选中使用了 DMD 基因的 cDNA 亚克隆。删除频率较高的发现表明 DMD 和 BMD 中的外显子优先删除。den Dunnen 等人使用场反转凝胶电泳（FIGE）（1987） 在 39 个 DMD 病例中检测到 21 个 DMD 基因结构异常，其中 14 种未通过“传统”方法检测到。在该基因的远端一半发现了一个容易缺失的区域。科等人（1987） 描述了一个奇怪的家庭，其中母亲携带 DMD 基因座缺失；她将该染色体传给了她的两个儿子，但两个儿子中只有一个受到影响。Bartlett 等人使用探针检测肌营养不良蛋白基因近端部分的约 25%（1988） 在 23% 的 DMD 男孩中发现了缺失，并且单个远端探针检测到了 17% 以上的缺失。Bartlett 等人使用探针检测肌营养不良蛋白基因近端部分的约 25%（1988） 在 23% 的 DMD 男孩中发现了缺失，并且单个远端探针检测到了 17% 以上的缺失。Bartlett 等人使用探针检测肌营养不良蛋白基因近端部分的约 25%（1988） 在 23% 的 DMD 男孩中发现了缺失，并且单个远端探针检测到了 17% 以上的缺失。

列支蒂-加拉蒂等人（1987） 描述了 pXJ 区域缺失的 BMD 病例，这是“DMD”基因座中该位置的第一个缺失。删除源于外祖父。霍夫曼等人（1988）提出的证据表明，在严重的杜兴表型和中间（或离群）表型中肌营养不良蛋白浓度低的情况下，肌营养不良蛋白存在数量异常，即水平非常低或不存在。另一方面，在贝克尔营养不良中，肌营养不良蛋白存在质的异常，即分子量异常。其他神经肌肉疾病显示肌营养不良蛋白水平正常。

霍夫曼等人（1987） 证明在 DMD 中肌营养不良蛋白完全不存在，而在 BMD 中会合成异常（通常是缩短的）肌营养不良蛋白分子；和摩纳哥等人（1988） 发现，在 DNA 水平上，差异通常可以表现为缺失是否导致移码或以其他方式中断开放解读码组。在 BMD 中，尽管基因的编码片段丢失了，但阅读框保持完整。就 BMD 而言，会合成一种缩短且仅具有部分功能的肌营养不良蛋白；在 DMD 中，任何分子都不会形成，或者中止的分子会迅速降解。

Koenig 等人在 DMD 位点的 258 个孤立缺失中测试“阅读框架”理论的有效性（1989） 发现表型和缺失类型之间存在相关性，这与 92% 病例的理论一致，并且具有诊断和预后意义。他们预测，许多抗肌营养不良蛋白基因的“框内”缺失未被检测到，因为携带这些基因的人要么没有症状，要么表现出非典型的临床特征。吉拉德等人（1989）关于框内删除和移码删除之间的差异得出了类似的结论。贝格斯等人（1990） 描述了寡核苷酸引物序列，可用于在单一多重 PCR 中扩增肌营养不良蛋白基因的 8 个外显子和肌肉启动子。该引物和现有的引物组可以检测 DMD 或 BMD 患者约 98% 的缺失。帕尔穆奇等人（1994） 在一名 60 岁的农民身上观察到异常轻微的贝克尔肌营养不良病程，该农民的 DMD 基因有 26% 的缺失。

戴维斯等人（1988） 分析了 300 多名患有杜氏肌营养不良症或贝克尔肌营养不良症的患者，并得出结论，表型的严重程度与缺失的大小无关。一名轻度 BMD 患者存在至少 110 kb 的缺失，其中包括许多 DMD 患者中缺失的外显子。摩纳哥等人（1988） 对 DMD 和 BMD 之间的表型差异提供了解释：虽然两种疾病形式中的缺失大小似乎不存在根本差异，但 DMD 中的缺失会导致移码，而 BMD 中的缺失则不会。这一发现与以下事实相一致：大多数 DMD 患者的肌肉中没有肌营养不良蛋白，而 BMD 患者的肌营养不良蛋白却异常短（或者，在 1 例中，异常长）。

杜布罗夫斯基等人（1995） 报道了一位同时患有 DMD 和强直性肌营养不良的独特患者（DM; 160900）。DMD 在 6 岁时根据近端肌肉无力、高肌酸激酶、小腿假性肥大和营养不良性肌肉活检的典型表现被诊断出来。当时没有强直性肌营养不良的临床或电学证据。在 18 岁时的第二次活检中，无基因缺失突变的肌营养不良蛋白缺乏证实了孤立性 DMD 的诊断。同一患者在 9 岁时根据临床和电性肌强直以及该疾病的强烈家族史被诊断为强直性肌营养不良。通过证明轻度受影响的母亲 CTG 重复的病理性扩张（160 个重复；正常，27 次重复）和她受影响更严重的儿子（650 次重复）和女儿（650 次重复）。该患者 16 岁以后仍能行走。Dubrovsky 等人（1995） 提出强直性肌营养不良在一定程度上干扰 DMD 进展的可能性。还考虑了其​​他解释。通过免疫组织化学观察到的 12% 的肌营养不良蛋白回复纤维可能足以改善典型的 DMD，或者患者可能代表体细胞嵌合体。

卡瓦斯拉尔等人（1995） 描述了一名未缺失的肌营养不良患者 DMD 基因第 6 外显子中的 1-bp 缺失；没有说明是杜兴型还是贝克尔型。C640 或 C641 被删除。卡瓦斯拉尔等人（1995） 指出这是第二十四个仅涉及单个核苷酸的突变，之前的大多数都是替换。只有 5 个（包括他们报告的那个）是缺失点突变，并且 5 个中的 3 个发生在核苷酸重复一次或两次的序列中。

至少 5 个不同的启动子驱动组织特异性肌营养不良蛋白亚型的转录。三个启动子位于该基因的 5-prime 末端，产生 427-kD 的大脑和肌肉亚型。另外两个启动子驱动剪接于肌营养不良蛋白序列远端部分的替代第一外显子的表达：这些蛋白质产物（根据其分子量）被命名为 Dp116 和 Dp71。Dp116 的转录起始于位于外显子 56 上游的替代第一个外显子。Dp116 仅在雪旺细胞中表达，作为位于有髓鞘周围神经纤维外部周围的免疫反应性薄边缘。科米等人（1995） 描述了一名患者表现出先天性肌肉受累、多种畸形特征和严重智力障碍，与肌营养不良蛋白缺乏和腓肠神经 Dp116 缺失有关。研究了 2 名表达 Dp116 的 DMD 患者的腓肠神经活检作为对照。患者是一名 9 岁男孩，出生时患有低渗症，家庭无神经肌肉疾病史。6 个月大时，他出现肌张力减退、内眦赘皮、哥特式腭、巨舌症、掌横纹和先天性髋关节脱位。CK水平很高。脑电图节律失常。9 岁时，智力发育迟缓非常严重，以至于无法进行正式的智商评估。脑部磁共振成像显示脑室周围白质信号强度降低的病灶，但无脑回异常。证实了由内含子 69 的第一个核苷酸处的 G 到 A 颠换组成的突变。科米等人。

Todorova 和 Danieli（1997） 从可能起源的角度以及与“滑动错配”和“超突变 CpG”诱变模型的一致性的角度回顾了 BMD 基因中的 72 个单碱基突变。此外，在包含给定突变碱基的每段序列中搜索可以参与二级结构形成的重复和对称元件。出乎意料的是，CpG 突变的频率被发现低于其他基因报道的频率，而转变的频率却远高于预期。可以通过甲基化介导的脱氨基作用解释的 CpG 二核苷酸中的碱基取代都是 C 到 T 的转变。未发现 CpG 二核苷酸中的 G 到 A 转换。序列基序，它已被证明是聚合酶 α 的捕获位点，与超过 50% 的单碱基突变相关。除 1 个之外的所有突变都可以通过至少 2 种诱变机制来解释。这意味着，当突变可能通过不同机制孤立产生时，突变在给定位置上的概率很高。他们得出的结论是，直接或反向重复似乎发挥了重要作用。

在描述来自 2 个不相关的日本家庭的 X 连锁扩张型心肌病（CMD3B; 302045） 和涉及 DMD 基因肌肉外显子 1 缺失的患者的基因异常过程中（Yoshida 等人，1993），Yoshida 等人（1998） 发现了由人 L1 元件整合到肌肉外显子 1 的 5 素数非翻译区引起的独特插入。该插入是人 L1 的 5 素数截短形式，反向整合到 DMD 基因中。它影响肌营养不良蛋白转录本的肌肉形式的转录或稳定性，但不影响大脑或浦肯野细胞形式的转录或稳定性，可能是由于其独特的整合位点。所研究的 3 名患者在学校健康筛查中首次发现血清肌酸激酶水平升高（高肌酸激酶血症）和心电图异常。两个兄弟姐妹从小就经历过劳力性痉挛性肌痛。他们没有表现出明显的肌肉萎缩或无力，但存在扩张型心肌病。患者2和患者3分别在18岁时和14岁时死于充血性心力衰竭；患者3的哥哥未纳入本研究，他也死于充血性心力衰竭，年仅15岁。患者 1，25 岁​​，在报告时仍然活着。

X连锁扩张型心肌病是一种肌营养不良症，其特征是严重心肌病，无骨骼肌受累。据描述，一些 XLCM 患者的突变消除了肌营养不良蛋白肌肉亚型的表达，但该基因的大脑和小脑浦肯野亚型的表达增加，仅在骨骼肌中。巴斯蒂亚努托等人（2001） 确定 2 名 XLCM 患者存在删除了肌肉启动子和外显子 1 的缺失，但没有删除大脑和小脑浦肯野启动子。发现大脑和小脑浦肯野启动子在肌肉细胞系和原代培养物中基本上不活跃。由于肌营养不良蛋白肌肉增强子 1（DME1）（一种肌肉特异性增强子）在这些患者中保留，作者测试了其上调大脑和肌肉细胞中小脑浦肯野启动子的能力。在 DME1 存在的情况下，大脑和小脑浦肯野启动子活性显着增加，并且仅在呈现骨骼肌表型的细胞（与心肌细胞相比）中观察到激活。巴斯蒂亚努托等人（2001） 提出 DME1 在诱导肌肉异构体表达缺陷的 XLCM 患者骨骼肌中脑和小脑浦肯野异构体表达中的作用。

DMD 患者和 mdx 小鼠等位基因变体的视网膜电图（ERG） 异常。对抗肌营养不良蛋白基因突变的 mdx 小鼠的 5 个等位基因变异的分析表明，突变位置与 ERG 异常的严重程度之间存在相关性。DMD 蛋白的三种亚型在视网膜中表达：Dp427、Dp260 和 Dp70。Howard 等人对 3 种等位基因 mdx 小鼠品系的视网膜切片使用间接免疫荧光和异构体特异性抗体（1998）检查了每种亚型的定位。他们表明 Dp71 表达与外丛状层（OPL） 的 Dp427 和 Dp260 表达不重叠。相反，Dp71 定位于内界膜（ILM） 和视网膜血管。此外，霍华德等人（1998） 表明 Dp260 和 Dp71 在各自的 C 末端结构上不同。此外，他们发现 β-肌营养不良聚糖（DAG1；128239） 的正确定位取决于 OPL 处的 Dp260 和 ILM 处的 Dp71 表达。因此，Dp260 和 Dp71 是非冗余同工型，位于视网膜内的不同位点，但与 β-肌营养不良聚糖具有共同的相互作用。这些数据表明 Dp71 和 Dp260 对视网膜电生理学都有不同但重要的作用（Howard 等人（1998）指出，肌营养不良蛋白基因由位于基因不同区域的至少 7 个不同启动子转录。其中四个启动子位于内含子内，编码短肌营养不良蛋白亚型，根据其分子量命名。）他们发现 β-肌营养不良聚糖（DAG1; 128239） 的正确定位取决于 OPL 上的 Dp260 和 ILM 上的 Dp71 表达。因此，Dp260 和 Dp71 是非冗余同工型，位于视网膜内的不同位点，但与 β-肌营养不良聚糖具有共同的相互作用。这些数据表明 Dp71 和 Dp260 对视网膜电生理学都有不同但重要的作用（Howard 等人（1998）指出，肌营养不良蛋白基因由位于基因不同区域的至少 7 个不同启动子转录。其中四个启动子位于内含子内，编码短肌营养不良蛋白亚型，根据其分子量命名。）他们发现 β-肌营养不良聚糖（DAG1; 128239） 的正确定位取决于 OPL 上的 Dp260 和 ILM 上的 Dp71 表达。因此，Dp260 和 Dp71 是非冗余同工型，位于视网膜内的不同位点，但与 β-肌营养不良聚糖具有共同的相互作用。这些数据表明 Dp71 和 Dp260 对视网膜电生理学都有不同但重要的作用（Howard 等人（1998）指出，肌营养不良蛋白基因由位于基因不同区域的至少 7 个不同启动子转录。其中四个启动子位于内含子内，编码短肌营养不良蛋白亚型，根据其分子量命名。）Dp260 和 Dp71 是非冗余异构体，位于视网膜内的不同位点，但与 β-肌营养不良聚糖具有共同的相互作用。这些数据表明 Dp71 和 Dp260 对视网膜电生理学都有不同但重要的作用（Howard 等人（1998）指出，肌营养不良蛋白基因由位于基因不同区域的至少 7 个不同启动子转录。其中四个启动子位于内含子内，编码短肌营养不良蛋白亚型，根据其分子量命名。）Dp260 和 Dp71 是非冗余异构体，位于视网膜内的不同位点，但与 β-肌营养不良聚糖具有共同的相互作用。这些数据表明 Dp71 和 Dp260 对视网膜电生理学都有不同但重要的作用（Howard 等人（1998）指出，肌营养不良蛋白基因由位于基因不同区域的至少 7 个不同启动子转录。其中四个启动子位于内含子内，编码短肌营养不良蛋白亚型，根据其分子量命名。）（1998）指出肌营养不良蛋白基因由位于基因不同区域的至少7个不同启动子转录。其中四个启动子位于内含子内，编码短的肌营养不良蛋白亚型，根据其分子量命名。）（1998）指出肌营养不良蛋白基因由位于基因不同区域的至少7个不同启动子转录。其中四个启动子位于内含子内，编码短的肌营养不良蛋白亚型，根据其分子量命名。）

对小鼠的研究表明，视网膜电图异常主要与 C 端肌营养不良蛋白亚型 Dp260 的突变有关。皮勒斯等人（1999） 对 DMD/BMD 患者进行了系统评估，以确定在小鼠中观察到的突变的位置特异性效应是否也存在于人类中。在人类中，他们发现 DMD 缺陷的更广泛变化与 b 波振幅的降低相关。具有正常 ERG 的个体的突变主要位于 Dp260 转录起始位点的 5 引物处；在这些患者中，46% 的患者 ERG 异常，而 94% 的患者有更多远端突变。

莫伊扎德等人（2000） 对 12 名重度、轻度或非发育迟缓的 DMD 患者进行了 Dp71 转录本的突变分析，并且没有检测到缺失或重复。他们检测到 5 个点突变导致 Dp71 翻译过早终止。所有突变均在该组中较严重的智力迟钝患者中发现；参见 300377.0076。

金贾尔等人（2000） 研究了一个 X 连锁肌营养不良症家族，其中 3 名男性具有非常不同的表型，这些表型似乎与 DMD 基因中外显子 29 的跳跃水平有关；参见 300377.0077。

格林纳等人（2002） 通过从两栖动物非洲爪蟾和角鲨（4.2 亿多年前从人类分化而来的物种）中分离出相应的序列，研究了 DMD 基因 3-prime-UTR 的进化保守性，此前曾描述过鸡的直向同源物。非洲爪蟾序列与人和鸡肌营养不良蛋白 3-prime-UTR 的“Lemaire A”区域表现出高度连续的相似性，而角鲨序列在 Lemaire A 和 D 区域均包含同源序列。这些高度保守区域的功能仍然无法解释。作者还描述了导致患有贝克型肌营养不良症（BMD; 300376） 的 3 名兄弟的肌营养不良蛋白基因中外显子 79 和 3-prime-UTR 丢失的突变的确切性质。涉及肌营养不良蛋白基因 3-prime-UTR 的突变很少被描述，这一事实可能是由于务实的决定不在大多数筛查方案中包括该区域，但鉴于其高度保守，Greener 等人（2002） 表明影响 Lemaire A 或 D 区的点突变可能导致 BMD 表型。

大约 80% 的 Becker 患者的肌营养不良蛋白基因存在缺失，其中大部分对应于精确的多个密码子，从而产生一些序列改变的部分功能性肌营养不良蛋白。塔弗里·吉罗等人（2005）报道了 5 名贝克尔肌营养不良症患者的 DMD 基因中有 5 个剪接位点突变。在 2 例中，较温和的表型是由于外显子跳跃导致框内删除所致。在另外 2 例中，内含子突变导致复杂的剪接变化，但有一些残留的正常转录本。最后一个案例导致转录本被截短，仅缺失了蛋白质 C 末端的一部分，表明该区域对于肌营养不良蛋白功能并不重要。塔弗里·吉罗等人。

古尔维奇等人（2008） 指出 DMD 基因中的一些剪接位点突变（参见 300377.0080）可能导致转录本中包含内含子序列，称为“伪外显子”。相对于野生型转录物，含有假外显子的转录物的量取决于突变产生的新剪接位点的效率。在 BMD 患者的肌肉中，存在显着水平的野生型转录物（为对照肌肉中发现的野生型转录物的 13%），而在 DMD 患者的肌肉中，未检测到野生型转录物，这表明 BMD 和 DMD 之间疾病严重程度的差异可以通过突变诱导的剪接位点功能的效率差异来解释。

达乌德等人（2009） 报道了 81 名杜氏肌营养不良（DMD） 和贝克肌营养不良（BMD） 患者的临床、认知、分子和表达数据的比较，这些患者携带突变，预计会影响所有肌营养不良蛋白产物（包括 Dp71）或除 Dp71 之外的所有肌营养不良蛋白产物。一致的数据定义了 DMD 精神发育迟滞的分子基础；患有精神发育迟滞的 BMD 患者被证明具有显着影响 Dp71 表达的突变或位于外显子 75 和 76 的突变。外显子 62 上游的突变（具有 DMD 表型）预计会导致所有肌营养不良蛋白产物（Dp71 亚型除外）功能丧失，主要与正常或边缘认知能力相关。达乌德等人。

古尔维奇等人（2009） 在 DMD 基因的外显子 1（W3X; 300377.0086） 中发现了一个与轻度 Becker 表型相关的截短突变。对报告基因构建体的研究（包括 DMD 肌肉亚型的外显子 1 至 9），确定了外显子 6 内的 2 个替代翻译起始位点，导致产生更短的 60-kD 蛋白质，该蛋白质可能保留了足够的残余活性，以改善此类突变所预期的更严重的表型。研究结果表明，截断 DMD 基因前 2 个外显子内的突变可能会导致下游翻译起始位点的利用，这些异常转录本以某种方式避免了无义介导的衰变，并且 DMD 的前 5 个外显子对于维持重要的蛋白质功能不是必需的。

▼ 动物模型

Sicinski 等人（1989） 使用 PCR 证明了肌营养不良蛋白基因中的第一个点突变。在 mdx 小鼠中，他们发现胞嘧啶在核苷酸位置 3185 处取代了胸腺嘧啶，从而产生终止密码子（TAA） 代替谷氨酰胺密码子（CAA）。外显子突变为终止密码子导致肌营养不良蛋白多肽27%长度的翻译过早终止。由于抗肌营养不良蛋白基因中谷氨酰胺密码子的频率较高（以及其他可能突变为终止密码子的三联体），因此提供了一种高频率点突变的机制。

迪克森等人（1988） 在小鼠胚胎肌肉中发现了抗肌营养不良蛋白独特的 mRNA 亚型。他们认为这些不同的 mRNA 最有可能是通过选择替代转录起始位点或 RNA 加工途径产生的。李等人（1991） 合成了小鼠肌营养不良蛋白 mRNA 的 14 kb 全长 cDNA，并证明了其在 COS 细胞中的表达。通过抗肌营养不良蛋白抗体的蛋白质印迹分析，重组肌营养不良蛋白与小鼠肌肉肌营养不良蛋白无法区分，并且通过免疫荧光技术显示，重组肌营养不良蛋白定位于细胞膜的细胞质面，即其正常位置。李等人（1991） 认为这项工作为基因治疗研究开辟了可能性。比特纳等人（1994） 在接受来自同基因正常小鼠的含有肌营养不良蛋白的肌肉移植物的 mdx 小鼠的血清中检测到高滴度的抗肌营养不良蛋白特异性抗体。即使存在高效价抗体，含有肌营养不良蛋白的肌肉移植物也不会被排斥。比特纳等人（1994）建议这种移植方法可以作为免疫学鉴定存在无效突变动物模型的其他疾病中缺失蛋白质的模型。麦卡德尔等人（1994）使用mdx小鼠来检验Lewis Rowland首次提出的杜氏肌营养不良症的“膜通透性”假说（Rowland, 1980）。骨骼肌膜对活体染色剂（Proion Orange）或细胞外钙 45 的渗透性存在于坏死纤维中，但不存在于坏死前纤维中。没有证据表明肌肉质膜通透性增加是缺乏肌营养不良蛋白的主要致病作用。与 DMD 患者的再生失败相反，Itagaki 等人（1995） 发现重复使用布比卡因（一种肌坏死剂）后，mdx 小鼠肌肉的再生能力没有差异。这与 mdx 小鼠的正常寿命一致，没有明显的肌肉无力。萩原等人（1995）将C2成肌细胞移植到mdx裸鼠的胫骨前肌中，并证明形成了少量嵌合宿主供体肌纤维（1995） 发现重复使用布比卡因（一种肌坏死剂）后，mdx 小鼠肌肉的再生能力没有差异。这与 mdx 小鼠的正常寿命一致，没有明显的肌肉无力。萩原等人（1995）将C2成肌细胞移植到mdx裸鼠的胫骨前肌中，并证明形成了少量嵌合宿主供体肌纤维（1995） 发现重复使用布比卡因（一种肌坏死剂）后，mdx 小鼠肌肉的再生能力没有差异。这与 mdx 小鼠的正常寿命一致，没有明显的肌肉无力。萩原等人（1995）将C2成肌细胞移植到mdx裸鼠的胫骨前肌中，并证明形成了少量嵌合宿主供体肌纤维。

与人类和所有其他研究的真兽类哺乳动物 X 染色体上的抗肌营养不良蛋白基因的位置相反，该基因对应到鸡（鸡内金）的常染色体微染色体上（Dominguez-Steglich 等人，1990）。

Stratford-Perricaudet 等人的论证为 DMD 等肌肉退行性疾病的基因治疗前景带来了光明（1992）静脉注射重组腺病毒后，小鼠骨骼和心肌中发生了有效、长期的体内基因转移。考克斯等人（1993） 通过检查全长肌营养不良蛋白转基因纠正 mdx 小鼠膈肌严重异常的潜力，探索了 DMD 基因治疗的可行性。事实上，他们发现转基因 mdx 小鼠的异常现象是可以预防的。此外，肌营养不良蛋白的过度表达可以防止与营养不良肌肉相关的异常机械特性，而不会引起有害的副作用。

库珀等人（1988） 证明金毛猎犬的肌肉营养不良是 X 连锁的。此外，他们还指出，这种疾病可能与人类 BMD 同源。图中显示了狗的 G 带核型。在女性携带者或受影响的男性中未观察到染色体异常。Valentine 等人的分子研究（1992） 显示了肌营养不良蛋白的缺陷，从而确立了犬模型的真实性。夏普等人（1992） 描述了金毛猎犬（GRMD） X 连锁肌营养不良症的分子缺陷。对 GRMD 狗 DMD 基因的分析未能证明可检测到的外显子丢失；然而，内含子 6 的 3-prime 剪接受体位点从 AG 变为 GG 导致加工的 mRNA 中外显子 7 的跳过。夏普等人。

维埃拉等人（2015） 观察到 2 只 GRMD“逃亡者”狗仍能完全行走且寿命正常。通过全基因组作图和基因表达分析，他们发现逃逸者GRMD肌肉中Jag1（601920）mRNA的表达量比野生型高2倍，并严重影响GRMD肌肉。序列分析显示，两只逃亡犬的 Jag1 基因启动子区域存在杂合 GT 变化，引入了肌细胞生成素（MYOG; 159980） 共有结合基序。这种 Jag1 变体在野生型和严重影响 GRMD 的狗中不存在。EMSA 和报告基因分析显示 Myog 结合并提高了逃逸 Jag1 启动子（而非野生型启动子）的报告基因表达。escaper Jag1的引入挽救了DMD斑马鱼sapje模型的肌肉致死表型。来自 GRMD 逃亡狗的肌肉细胞表现出典型的营养不良特征，即退化和再生，但培养物中的逃亡肌原细胞分裂速度明显快于严重受影响的狗。此外，维埃拉等人（2015） 发现在心脏毒素诱导的损伤和体外成肌细胞分化后，小鼠胫骨前肌中 Jag1 的表达升高。他们得出的结论是，Jag1 依赖性 Notch 信号传导增强，可以增强逃脱 GRMD 狗中激活的肌肉卫星细胞的增殖能力（2015） 发现在心脏毒素诱导的损伤和体外成肌细胞分化后，小鼠胫骨前肌中 Jag1 的表达升高。他们得出的结论是，Jag1 依赖性 Notch 信号传导增强，可以增强逃脱 GRMD 狗中激活的肌肉卫星细胞的增殖能力（2015） 发现在心脏毒素诱导的损伤和体外成肌细胞分化后，小鼠胫骨前肌中 Jag1 的表达升高。他们得出的结论是，Jag1 依赖性 Notch 信号传导增强，可以增强逃脱 GRMD 狗中激活的肌肉卫星细胞的增殖能力。

廷斯利等人（1996） 指出，在人类中使用成肌细胞移植或在小鼠 DMD 模型中使用病毒/脂质体递送来替代缺失的蛋白质抗肌营养不良蛋白是不够的，而且是短暂的。另一种治疗方法是上调密切相关的蛋白质肌营养不良蛋白（128240），这可能能够补偿所有相关肌肉中肌营养不良蛋白的缺乏。作为这种方法的第一步，Tinsley 等人（1996） 在肌营养不良蛋白缺陷的 mdx 小鼠中高水平表达了肌营养不良蛋白转基因。结果表明，骨骼肌和膈肌中utropin转基因的高表达可以显着减轻营养不良的病理。

DMD 基因中导致肌营养不良症的大量突变都是提前终止密码子。Barton-Davis 等人观察到氨基糖苷类处理可以抑制培养细胞中的终止密码子（1999） 测试了庆大霉素对 mdx 小鼠培养的肌肉细胞的影响，mdx 小鼠是一种 DMD 动物模型，其肌营养不良蛋白基因中具有提前终止密码子。mdx 肌管暴露于庆大霉素导致肌营养不良蛋白表达并定位于细胞膜。Barton-Davis 等人研究了不同剂量庆大霉素的影响（1999） 确定了一种治疗方案，该方案导致所有检查的横纹肌细胞膜中都存在抗肌营养不良蛋白，并提供针对肌肉损伤的功能保护。这似乎是氨基糖苷类药物不仅可以在体外而且可以在体内抑制终止密码子的首次证明。这一结果提出了一种新的治疗方案的可能性，不仅可以治疗肌营养不良症，还可以治疗由过早终止密码子突变引起的其他疾病。他们估计这种治疗方法对高达 15% 的 DMD 患者有效。

Mankin 和 Liebman（1999） 回顾了氨基糖苷类药物治疗遗传性疾病的基础。他们指出，Burke 和 Mogg（1985） 建议使用氨基糖苷类药物。Burke 和 Mogg（1985） 使用培养的哺乳动物细胞表明，氨基糖苷类抗生素可以部分恢复来自具有过早 UAG 突变的突变基因的全尺寸蛋白质的合成。虽然氨酰基转移 RNA（tRNA） 的反密码子识别有义密码子，从而导致在蛋白质合成过程中掺入特定氨基酸，但通常不存在具有与 3 个无义（终止）密码子 UAA、UAG 和 UGA 中任何一个精确匹配的反密码子的 tRNA。相反，这些密码子被促进完整多肽链释放的蛋白质识别。当结构基因突变产生无义密码子时，多肽链释放时蛋白质产物是不完整的。Mankin 和 Liebman（1999） 回顾了该方法的“缺点”。含有改变的氨基酸来代替过早停止的蛋白质的活性、执行其细胞功能所需的蛋白质的量及其稳定性显然会受到限制。此外，翻译错误频率的增加会导致异常蛋白质的产生，再加上庆大霉素的其他已知副作用（以及长期使用该药物的未知后果），将使寻找有效的治疗方案变得棘手。含有改变的氨基酸来代替过早停止的蛋白质的活性、执行其细胞功能所需的蛋白质的量及其稳定性显然会受到限制。此外，翻译错误频率的增加会导致异常蛋白质的产生，再加上庆大霉素的其他已知副作用（以及长期使用该药物的未知后果），将使寻找有效的治疗方案变得棘手。含有改变的氨基酸来代替过早停止的蛋白质的活性、执行其细胞功能所需的蛋白质的量及其稳定性显然会受到限制。此外，翻译错误频率的增加会导致异常蛋白质的产生，再加上庆大霉素的其他已知副作用（以及长期使用该药物的未知后果），将使寻找有效的治疗方案变得棘手。

古索尼等人（1999）报道了mdx小鼠骨髓移植的结果。将正常造血干细胞或新型肌肉源性干细胞静脉注射到受辐射的动物体内，导致移植受体的造血室重建，供体源性细胞核并入肌肉，并部分恢复受影响肌肉中肌营养不良蛋白的表达。古索尼等人（1999） 得出的结论是，他们研究中最实际的观察结果是，由于细胞在整个血管系统中的输送，骨髓或肌肉干细胞似乎提供了一种全身而非局部修复肌肉的方法。此外，

为了确定肌营养不良蛋白的潜在非机械作用，Rafael 等人（2000）测试了各种截短的肌营养不良蛋白转基因预防与肌营养不良蛋白和肌营养不良蛋白双基因敲除小鼠相关的任何骨骼肌异常的能力。用 Dp71 恢复肌营养不良蛋白相关蛋白复合物（DAPC） 并不能阻止突触后膜的结构异常或肌营养不良蛋白/肌营养不良蛋白缺陷肌肉的异常氧化特性。相比之下，缺乏富含半胱氨酸结构域的肌营养不良蛋白无法预防 mdx 小鼠的营养不良，但能够改善肌营养不良蛋白/肌营养不良蛋白缺陷小鼠的这些异常。作者得出的结论是，除了机械作用之外，

肌营养不良蛋白缺乏的肌肉中一氧化氮合酶（NOS1；163731）的表达大幅减少，这表明一氧化氮缺乏可能会影响营养不良的病理学。由于 NO 可以起到抗炎和细胞保护分子的作用，Wehling 等人（2001） 提出，营养不良性肌肉中 NOS 的丧失会加剧肌肉炎症和炎症细胞造成的纤维损伤。对抗肌营养不良蛋白无效突变但肌肉中 NO 表达正常水平的转基因 mdx 小鼠的分析表明，NO 产生的正常化导致 mdx 肌肉中巨噬细胞浓度大幅降低。mdx 肌肉中 NOS 转基因的表达还可以防止体内可检测到的大部分肌肉膜损伤，并导致血清肌酸激酶浓度大幅降低。数据还表明，mdx 肌肉巨噬细胞在营养不良、NOS 缺乏的肌肉中出现的浓度具有溶细胞作用，但在肌肉中表达 NOS 转基因的营养不良小鼠中出现的浓度则不具有溶细胞作用。此外，数据表明，mdx 小鼠中抗体消耗巨噬细胞会导致肌肉膜损伤显着减少。

“回复纤维”是含有低比例肌营养不良蛋白阳性细胞的肌纤维。这些存在于肌营养不良蛋白缺陷的 mdx 小鼠中，并且被认为是由选择性剪接或绕过突变并恢复开放解读码组的第二突变事件引起的。克劳福德等人（2001） 发现新生转基因小鼠表现出与新生 mdx 小鼠大致相同数量的回复纤维，表明功能性肌营养不良蛋白的表达不会抑制回复纤维形成的起始。然而，当转基因编码功能性肌营养不良蛋白时，在成年或老年 mdx 小鼠中未检测到回复纤维。相比之下，表达非功能性肌营养不良蛋白的成年转基因小鼠积累了越来越多的回复纤维，与 mdx 小鼠类似，表明回复纤维的持久性需要正向选择。作者进一步提供了证据表明，过度表达功能性肌营养不良蛋白的转基因 mdx 肌纤维中回复体肌营养不良蛋白的丧失是由于转基因编码的肌营养不良蛋白置换了回复体蛋白造成的。

为了利用腺相关病毒载体开发 DMD 基因疗法，该载体只能容纳有限长度的基因，Sakamoto 等人（2002） 生成了一系列杆状截短的微肌营养不良蛋白 cDNA，并在 CAG 启动子的驱动下使用它们来产生转基因 mdx 小鼠。作者表明，所有 3 种微肌营养不良蛋白均定位于肌膜，并表达肌营养不良蛋白相关蛋白。其中一个包含 4 个杆状重复，大大改善了 mdx 小鼠的营养不良表型，特别是隔膜的收缩力恢复到正常。其中第二个包含 3 个视杆重复，导致营养不良病理的适度改善，但第三个包含 1 个视杆重复，没有显示任何改善。

哈珀等人（2002） 对肌营养不良蛋白结构域进行了详细的功能分析，结果表明可以以各种组合删除该蛋白质的多个区域，以产生功能强大的迷你和微型肌营养不良蛋白。对转基因 mdx 小鼠（DMD 模型）的研究表明，其中一些截短的肌营养不良蛋白可以预防营养不良的多种功能特征。表达最小抗肌营养不良蛋白的肌肉受到充分保护，免受肌肉活动造成的损伤，并且在形态上与正常肌肉没有不同。此外，将携带微肌营养不良蛋白的腺相关病毒注射到免疫功能正常的 mdx 小鼠的营养不良肌肉中，导致该疾病的组织病理学特征发生显着逆转。哈珀等人。

先前证明肠道病毒蛋白酶 2A 裂解肌营养不良蛋白（Badorff 等人，1999；Badorff 等人，2000；Lee 等人，2000）导致 Xiong 等人（2002） 假设肌营养不良蛋白缺乏会导致肠道病毒诱发的心肌病。Xiong 等人在感染肠道病毒的抗肌营养不良蛋白缺陷小鼠中（2002） 观察到与受感染的野生型小鼠相比，心肌病更严重，随着时间的推移而恶化，病毒复制也更强。这种差异似乎是由于肌营养不良蛋白缺陷的肌细胞更有效地释放了病毒。此外，熊等人（2002）发现培养细胞中野生型抗肌营养不良蛋白的表达降低了肠道病毒感染的细胞病变效应和病毒从细胞中的释放。他们还发现，抗切割突变体肌营养不良蛋白的表达进一步抑制了病毒介导的细胞病变效应和病毒释放。结果表明，病毒感染可以影响肌营养不良蛋白缺陷个体心脏中发生的心肌病的严重程度和外显率。

Porter 等人使用 DNA 微阵列（2002） 在 mdx 小鼠中建立了肌营养不良症的分子特征。在腿部肌肉中，鉴定出 242 个差异表达基因。数据为慢性炎症反应的众多成分的协调活动提供了证据，包括细胞因子和趋化因子信号传导、白细胞粘附和血细胞渗出、侵袭性细胞类型特异性标记物和补体系统激活。营养不良肌肉中分泌型磷蛋白 1（SPP1; 166490） mRNA 和蛋白质的上调确定了炎症细胞和修复过程之间的新联系。mdx 中的细胞外基质基因上调至与 DMD 中相似的水平。由于与 DMD 不同，mdx 表现出很少的纤维化，因此数据表明转录后阶段的胶原蛋白调节可能介导 DMD 中的广泛纤维化。

法布等人（2002） 设计了一种腺相关病毒（AAV） 载体，其中包含小于 3.8 kb 的微小肌营养不良蛋白 cDNA 基因构建体。这种由 CMV 启动子驱动的构建体被引入 12 日龄裸/mdx 小鼠的骨骼肌中，导致 20 周龄以上 50% 以上的肌纤维中微肌营养不良蛋白的特异性肌膜表达，并有效恢复 DAP 复合物成分。此外，中央成核的评估表明对退行性营养不良性肌肉病理的显着抑制。

华纳等人（2002） 构建了在骨骼肌中表达 Dp260 的转基因小鼠。Dp260 缺乏 N 端结构域和重要部分的杆状结构域，但保留了杆状结构域肌节蛋白结合结构域。缩写蛋白的表达恢复了肋肌肌节蛋白和肌膜之间的稳定联系，促进了肌营养不良蛋白-糖蛋白复合物的组装，并显着减缓了肌营养不良蛋白缺陷型 mdx 小鼠营养不良的进展。尽管 Dp260 肌肉对收缩引起的损伤表现出正常的抵抗力，但这些肌肉的力量产生显着减少，与 mdx 肌肉类似。从形态学上看，Dp260 肌肉显示出炎症和纤维化量减少，但仍然显示出显着的（尽管减少了）退化/再生量。作者得出的结论是，针对收缩引起的损伤的数据保护可能会显着改善但不能完全阻止营养不良过程。他们推测，由于抗肌营养不良蛋白 N 末端缺失而导致的非机械缺陷可能是造成观察到的残余营养不良的原因。

博格丹诺维奇等人（2002） 通过腹腔注射阻断抗体 3 个月，阻断 mdx 小鼠的内源性肌生长抑制素（MSTN; 601788），发现体重、肌肉质量、肌肉大小和绝对肌肉力量增加，同时肌肉退化和血清肌酸激酶浓度显着降低。博格丹诺维奇等人（2002） 得出的结论是，肌肉生长抑制素阻断为治疗与肌肉萎缩相关的疾病（如 DMD）提供了一种新颖的药理学策略，并规避了与这些疾病的传统基因治疗相关的主要问题。

为了探索肌营养不良蛋白杆结构域充当间隔区的假设，Harper 等人（2002） 在 mdx 小鼠中表达了含有 α-actinin-2（102573） 4 重复杆结构域的嵌合微肌营养不良蛋白转基因。嵌合转基因无法纠正 mdx 小鼠的形态病理学，但仍具有在膜上组装肌营养不良蛋白-糖蛋白复合物的功能，并提供一些针对收缩引起的损伤的保护。作者得出的结论是，不同的血影蛋白样重复序列并不等同，并表明肌营养不良蛋白杆结构域不仅仅是一个间隔区，而且可能对肌营养不良蛋白的整体功能发挥着重要的机械作用。

抗肌营养不良蛋白基因的大多数突变发生在编码血影蛋白样中央杆结构域的区域，这在很大程度上是可有可无的。因此，围绕突变的剪接可以产生缩短的但符合读框的转录本，从而允许部分功能性肌营养不良蛋白的翻译。卢等人（2003） 在 mdx 营养不良小鼠体内测试了这一想法，将有效的转染方案与旨在促进突变外显子 23 跳跃的反义寡核糖核苷酸相结合。治疗的小鼠在大量肌纤维中显示出持续产生正常水平的肌营养不良蛋白，并显示出治疗肌肉的功能改善。重复给药可增强肌营养不良蛋白的表达，但不会引发免疫反应。数据确立了原则上适用的方法的实用性，

贝尔托尼等人（2003） 测试了嵌合 RNA/DNA 寡核苷酸（嵌合体）改变肌营养不良蛋白基因中特定剪接序列中的关键碱基以诱导外显子跳跃的能力。在 mdx 小鼠细胞中，嵌合体介导的内含子 22/外显子 23 剪接连接处的碱基转换诱导了选择性剪接和框内转录本的产生。诱导了多个替代转录本，其中一些转录本预计会产生具有内部缺失的框内肌营养不良蛋白转录本。通过蛋白质印迹分析观察到多种形式的肌营养不良蛋白，并且通过分化细胞中α-肌营养不良聚糖（DAG1；128239）的表达和定位的恢复证明了产品的功能。贝尔托尼等人。

在杜氏肌营养不良症患者和某些缺乏肌营养不良蛋白基因型的小鼠中观察到的异常视网膜神经传递归因于肌营养不良蛋白基因短产物表达的改变。达洛兹等人（2003） 研究了 Dp71（最丰富的 C 端肌营养不良蛋白基因产物）在视网膜电生理学中的潜在作用。Dp71 缺失小鼠和野生型同窝小鼠之间的暗视 ERG 比较显示，Dp71 缺失小鼠的 ERG 正常，b 波振幅和动力学没有显着变化。对 Dmd 基因产物、肌营养不良蛋白（UTRN; 128240） 和抗肌营养不良蛋白相关蛋白（DAP） 的分析表明，Dp71 和肌营养不良蛋白位于血管周围、神经节细胞层（GCL） 和内界膜（ILM）。Dp71 缺陷伴随着 ILM 中肌营养蛋白水平的升高和 β-肌营养不良聚糖（DAG1; 128239） 水平的降低，但对其他 DAP 没有任何明显影响。Dp71 缺陷还与 2 个 Muller 胶质细胞蛋白的聚集受损有关：内向整流钾通道 Kir4.1（KCNJ10；602208） 和水孔水通道蛋白 4（AQP4；600308）。血管周围和 Dp71 缺失小鼠的 ILM 中两种蛋白质的免疫染色均减少，表明 Dp71 在两种蛋白质的聚集和/或稳定中发挥作用。内向整流钾通道 Kir4.1（KCNJ10; 602208） 和水孔水通道蛋白-4（AQP4; 600308）。血管周围和 Dp71 缺失小鼠的 ILM 中两种蛋白质的免疫染色均减少，表明 Dp71 在两种蛋白质的聚集和/或稳定中发挥作用。内向整流钾通道 Kir4.1（KCNJ10; 602208） 和水孔水通道蛋白-4（AQP4; 600308）。血管周围和 Dp71 缺失小鼠的 ILM 中两种蛋白质的免疫染色均减少，表明 Dp71 在两种蛋白质的聚集和/或稳定中发挥作用。

波特等人（2003） 使用时间基因表达谱来识别和关联肌营养不良蛋白缺陷 mdx 小鼠中的不同转录模式。尽管 719 个转录本在 1 个或多个年龄的腿部肌肉中差异表达，但在幸存的眼外肌（EOM） 中只有 56 个基因发生改变。受影响肌肉与幸存肌肉的分子特征对比提供了证据，表明单独缺乏肌营养不良蛋白是必要的，但不足以导致肌营养不良蛋白病特征的模式化纤维化、炎症和肌肉再生失败。综合疾病负荷指数（DLI） 强调了 EOM 和腿部肌肉群的不同反应。腿部肌肉中的细胞过程特异性 DLI 确定了某些基因类别的正相关时间表达谱，以及其他基因类别的孤立性，与主要疾病成分相关。波特等人（2004） 描述了 mdx 小鼠出生后第 7 天到第 112 天横膈膜的时间表达谱，并将这些数据与 Porter 等人报道的后肢肌肉发现进行了对比（2003）。这两个肌肉群主要在差异调节基因的表达水平上有所不同，这与定义根本不同机制的非保守诱导/抑制转录本相反。确定了 2 个野生型肌肉群表达谱的出生后差异，该差异在时间上与营养不良过程的发生和进展相关。波特等人（2004） 假设保守的疾病机制与肌肉群特异性转录组的基线差异相互作用可能是他们对 DMD 的不同反应的基础（2004） 描述了 mdx 小鼠出生后第 7 天到第 112 天横膈膜的时间表达谱，并将这些数据与 Porter 等人报道的后肢肌肉发现进行了对比（2003）。这两个肌肉群主要在差异调节基因的表达水平上有所不同，这与定义根本不同机制的非保守诱导/抑制转录本相反。确定了 2 个野生型肌肉群表达谱的出生后差异，该差异在时间上与营养不良过程的发生和进展相关。波特等人（2004） 假设保守的疾病机制与肌肉群特异性转录组的基线差异相互作用可能是他们对 DMD 的不同反应的基础（2004） 描述了 mdx 小鼠出生后第 7 天到第 112 天横膈膜的时间表达谱，并将这些数据与 Porter 等人报道的后肢肌肉发现进行了对比（2003）。这两个肌肉群主要在差异调节基因的表达水平上有所不同，这与定义根本不同机制的非保守诱导/抑制转录本相反。确定了 2 个野生型肌肉群表达谱的出生后差异，该差异在时间上与营养不良过程的发生和进展相关。波特等人（2004） 假设保守的疾病机制与肌肉群特异性转录组的基线差异相互作用可能是他们对 DMD 的不同反应的基础。这两个肌肉群主要在差异调节基因的表达水平上有所不同，这与定义根本不同机制的非保守诱导/抑制转录本相反。确定了 2 个野生型肌肉群表达谱的出生后差异，该差异在时间上与营养不良过程的发生和进展相关。波特等人（2004） 假设保守的疾病机制与肌肉群特异性转录组的基线差异相互作用可能是他们对 DMD 的不同反应的基础。这两个肌肉群主要在差异调节基因的表达水平上有所不同，这与定义根本不同机制的非保守诱导/抑制转录本相反。确定了 2 个野生型肌肉群表达谱的出生后差异，该差异在时间上与营养不良过程的发生和进展相关。波特等人（2004） 假设保守的疾病机制与肌肉群特异性转录组的基线差异相互作用可能是他们对 DMD 的不同反应的基础。确定了 2 个野生型肌肉群表达谱的出生后差异，该差异在时间上与营养不良过程的发生和进展相关。波特等人（2004） 假设保守的疾病机制与肌肉群特异性转录组的基线差异相互作用可能是他们对 DMD 的不同反应的基础。确定了 2 个野生型肌肉群表达谱的出生后差异，该差异在时间上与营养不良过程的发生和进展相关。波特等人（2004） 假设保守的疾病机制与肌肉群特异性转录组的基线差异相互作用可能是他们对 DMD 的不同反应的基础。

ADAM12（602714） 是一种解整合素和金属蛋白酶，已被证明可以预防 mdx 小鼠的肌细胞坏死（Kronqvist 等人，2002）。莫加达萨德等人（2003） 发现过度表达 ADAM12 的转基因小鼠仅表现出轻微的肌病变化，并在急性损伤后加速再生。在 mdx/ADAM12 转基因小鼠和 mdx 小鼠之间仅发现基因表达谱的微小变化，表明 mdx/ADAM12 肌肉可能在转录后发生显着变化。通过免疫染色和免疫印迹，Moghadaszadeh 等人（2003） 检测到 α-7B 整合素（ITGA7; 600536） 和肌养蛋白（128240）（抗肌萎缩蛋白的功能同源物）的表达和突触外定位增加了 2 倍。肌营养不良蛋白相关糖蛋白的表达也增加。

Toyo-Oka 等人使用 TO-2 仓鼠（2004） 证明了心肌肌营养不良蛋白从肌膜到肌浆的年龄依赖性裂解和易位、原位肌膜通透性增加、肌营养不良蛋白损失和血流动力学指标之间以及肌营养不良蛋白含量和存活率之间的相关性。将缺失的δ-肌聚糖基因转移到体内降解的心肌细胞中，改善了所有病理特征。作者证明了异丙肾上腺素毒性引起的急性心力衰竭或冠状动脉结扎后慢性心力衰竭的大鼠中肌营养不良蛋白受到破坏。他们还在患有不明原因扩张型心肌病的患者心脏中发现了肌营养不良蛋白裂解。丰冈等人（2004） 提出了一种涉及肌膜不稳定的心力衰竭的常见机制，

戈延瓦莱等人（2004） 通过单次施用表达与修饰的 U7 小核 RNA（RNU7-1; 617876） 连接的反义序列的腺相关病毒（AAV） 载体，实现了持久的外显子跳跃，去除了 mdx 小鼠肌营养不良蛋白 mRNA 上的突变外显子。戈延瓦莱等人（2004） 报道了整个肌肉群在生理水平上持续产生功能性肌营养不良蛋白以及肌营养不良症的纠正。

岳等人（2004） 培育出雌性杂合 mdx 小鼠，其在 50% 的心肌细胞中持续表达全长肌营养不良蛋白基因。在没有外部应激的情况下，mdx 小鼠的心脏功能正常。通过对 3 个月大的小鼠进行 β-异丙肾上腺素攻击，他们发现 mdx 小鼠的心肌细胞肌膜完整性显着受损，但杂合 mdx 和 C57BL/10 小鼠则没有。体内闭胸血流动力学测定显示，β-异丙肾上腺素刺激的杂合 mdx 小鼠左心室功能正常。杂合 mdx 小鼠中抗肌营养不良蛋白的不均匀表达模式类似于病毒基因转移研究中观察到的模式。岳等人（2004） 得出结论，基因治疗纠正 50% 的心脏细胞可能足以治疗 mdx 小鼠的心肌病。

ARC（NOL3; 605235） 是人体肌肉中丰富的蛋白质，可以抑制缺氧和 CASP8（601763） 诱导的细胞凋亡，并保护细胞免受氧化应激。为了研究 ARC 在保护肌纤维免受营养不良性破坏方面的潜在作用，Abmayr 等人（2004） 克隆并表征了小鼠 Arc，并研究了其在正常和营养不良小鼠肌肉中的表达。mdx 小鼠中 Arc 表达水平正常，并且 mdx 小鼠中 Arc 的过度表达未能缓解骨骼肌的营养不良病理，这表明 Arc 调节的分子途径的错误调节不会显着导致肌纤维死亡。

一些具有肌营养不良蛋白突变的患者患有 X 连锁扩张型心肌病（CMD3B; 302045），但没有骨骼肌肌病。骨骼肌症状的缺失归因于 CMD3B 患者骨骼肌中脑部和小脑浦肯野（CP） 亚型肌营养不良蛋白的表达，而非心肌中的表达。大脑和小脑浦肯野肌营养不良蛋白启动子上调归因于肌营养不良蛋白肌肉增强子 1（DME1） 的活性。德·雷彭蒂尼等人（2004） 证明小鼠肌营养不良蛋白 CP 启动子驱动报告基因特异表达至小脑浦肯野细胞层，但不表达至转基因小鼠的骨骼或心肌。当转基因构建体中存在 DME1 的小鼠对应物时，骨骼肌中的肌营养不良蛋白 CP 启动子被激活，

安田等人（2005） 表明，完整的、分离的肌营养不良蛋白缺陷型心肌细胞的顺应性降低，并且对拉伸介导的钙超载的敏感性增加，导致细胞挛缩和死亡，并且膜密封剂 poloxamer-188 的应用可以在体外纠正这些缺陷。在多巴酚丁胺介导的应激方案中，对营养不良小鼠进行体内注射 poloxamer-188 可立即改善心室几何形状并阻止急性心力衰竭的发展。安田等人（2005） 提出，一旦与 poloxamer-188 对人类的最佳剂量和长期影响相关的问题得到解决，基于化学的膜密封剂可以代表一种预防或逆转肌营养不良症心肌病和心力衰竭进展的治疗方法。

肌营养不良蛋白和 α-7/β-1（ITGB1; 135630） 整合素通过在肌纤维和基底膜之间提供机械连接，在维持肌肉完整性方面发挥着关键作用。郭等人（2006） 创造了 Dmd/Itga7 双敲除小鼠（DKO），其出生时表现正常，但在出生后第一个月内因严重肌营养不良、肌内膜纤维化和异位钙化而死亡。DKO 小鼠的进行性肌肉萎缩可能是由于肌肉再生不足所致，而过早死亡似乎是由于心脏和/或呼吸衰竭所致。

贝林格等人（2009） 发现 mdx 小鼠骨骼肌中的钙通道 Ryr1（180901） 显示出诱导型一氧化氮（NOS2A; 163730） 介导的半胱氨酸残基 S-亚硝基化增加，从而耗尽了 calstabin-1（FKBP12; 186945） 的通道复合物。这导致通道渗漏，钙通量增加。这些变化与年龄有关，并且与肌肉营养不良的变化同时发生。使用 S107（一种结合 Ryr1 通道并增强结合亲和力的化合物）预防 Ryr1 的 calstabin-1 耗竭，抑制肌浆网钙渗漏，减少肌肉损伤的生化和组织学证据，改善肌肉功能，并提高 mdx 小鼠的运动表现。贝林格等人。

李等人（2009） 生成了 δ-肌聚糖（SGCD; 601411）/肌营养不良蛋白双敲除小鼠（δ-Dko），其中残留的肌聚糖从肌膜中完全消除。这些小鼠的 Utropin（UTRN；128240）水平增加，但并未减轻疾病。δ-Dko小鼠的临床表现较mdx小鼠差。他们表现出典型的营养不良体征、身体消瘦、巨噬细胞浸润、寿命缩短、绝对肌力减弱以及更容易受到收缩引起的损伤。李等人（2009） 表明亚生理性肌聚糖表达可能在改善 mdx 小鼠的肌肉疾病中发挥作用。

李等人（2009） 研究了基质金属蛋白酶 9（MMP9; 120361） 蛋白水平升高导致肌营养不良蛋白缺陷 mdx 小鼠肌病的作用和机制。mdx 小鼠骨骼肌中 MMP9 水平显着增加，但 MMP 组织抑制剂的水平没有显着增加。浸润性巨噬细胞也导致营养不良性肌肉中 MMP9 水平升高。体内给予 NFκB 抑制肽 NBD 可阻断 mdx 小鼠营养不良肌肉中 MMP9 的表达。mdx 小鼠中 Mmp9 基因的缺失改善了骨骼肌结构和功能，并减少了肌肉损伤、炎症和纤维坏死。抑制 MMP9 会增加 mdx 小鼠肌纤维中细胞骨架蛋白 β-dystroglycan 和 Nos1 的水平，并减少 Caveolin-3（CAV3; 601253） 和转化生长因子-β（TGFB1; 190180） 的量。MMP9 的基因消除显着增强了 mdx 小鼠的骨骼肌再生。MMP9 活性的药理抑制还可以改善 mdx 小鼠的骨骼肌发病机制并增强肌纤维再生。

韦林-亨里克斯等人（2009） 测试了神经元一氧化氮合酶 nNOS（NOS1; 163731） 的损失是否会导致 mdx 小鼠的疲劳性增加。肌肉特异性 nNOS 转基因的表达增加了 mdx 小鼠的耐力，并增强了跑步机跑步期间的糖原代谢，但不影响肌肉的血管灌注。磷酸果糖激酶（PFK; 610681）（糖酵解限速酶）的比活性受到肌肉中 nNOS 的正向影响；mdx 肌肉和 nNOS 缺失突变体的肌肉中 PFK 特异性活性显着降低，但 nNOS 转基因肌肉和表达 nNOS 转基因的 mdx 小鼠肌肉中 PFK 特异性活性显着增加。在变构条件下测量的 PFK 活性因 nNOS 显着增加，但不受内皮 NOS 或诱导型 NOS 的影响。通过克隆和表达nNOS的不同结构域并测定它们对PFK活性的影响来测定正调节PFK活性的nNOS的特定结构域。这种方法产生了一种多肽，其中包含 nNOS 的黄素腺嘌呤二核苷酸（FAD） 结合域，作为促进 PFK 活性的分子区域。鉴定出 FAD 结合结构域中的 36 个氨基酸肽，其中存在 nNOS 对 PFK 的大部分正变构活性。韦林-亨里克斯等人（2009） 提出，糖酵解代谢缺陷和营养不良性肌肉易疲劳性增加可能部分是由于 nNOS 和 PFK 之间正向变构相互作用的丧失造成的。这种方法产生了一种多肽，其中包含 nNOS 的黄素腺嘌呤二核苷酸（FAD） 结合域，作为促进 PFK 活性的分子区域。鉴定出 FAD 结合域中的 36 个氨基酸肽，其中存在 nNOS 对 PFK 的大部分正变构活性。韦林-亨里克斯等人（2009） 提出，糖酵解代谢缺陷和营养不良性肌肉易疲劳性增加可能部分是由于 nNOS 和 PFK 之间正向变构相互作用的丧失造成的。这种方法产生了一种多肽，其中包含 nNOS 的黄素腺嘌呤二核苷酸（FAD） 结合域，作为促进 PFK 活性的分子区域。鉴定出 FAD 结合域中的 36 个氨基酸肽，其中存在 nNOS 对 PFK 的大部分正变构活性。韦林-亨里克斯等人（2009） 提出，糖酵解代谢缺陷和营养不良性肌肉易疲劳性增加可能部分是由于 nNOS 和 PFK 之间正向变构相互作用的丧失造成的。

三浦等人（2009） 发现 GW501516，一种过氧化物酶体增殖物激活受体 PPAR-β/δ（PPARD；600409） 激动剂，通过 utropin A 启动子中的一个元件刺激 mdx 肌肉细胞中 utropin A（UTRN；128240） mRNA 水平。与野生型小鼠相比，mdx 小鼠骨骼肌中 PPARD 的表达更高。在为期 4 周的试验中，治疗增加了表达较慢肌球蛋白重链亚型的肌纤维的百分比，并刺激了肌营养不良蛋白 A mRNA 水平，导致其在肌膜的表达增加。肌膜中α-1-肌营养蛋白（SNTA1；601017）和β-肌营养不良蛋白（DAG1；128239）的表达也得到恢复。mdx 肌膜完整性得到改善，治疗还可以防止偏心收缩引起的 mdx 骨骼肌损伤。

龙等人（2014） 使用成簇规则间隔短回文重复/Cas9（CRISPR/Cas9） 介导的基因组编辑来纠正 mdx 小鼠种系中的 Dmd 突变，然后监测肌肉结构和功能。基因组编辑产生了含有 2% 至 100% Dmd 基因校正的基因嵌合动物。嵌合体小鼠的肌肉表型拯救程度超过了基因校正的效率，这可能反映了校正细胞的优势及其对肌肉再生的贡献。龙等人（2014）预计技术进步将促进出生后体细胞的基因组编辑，这种策略可能允许纠正杜氏肌营养不良症患者肌肉组织中的致病突变。

Moorwood 和 Barton（2014） 在 DMD 患者的肌肉活检中发现了裂解的 CASP4（602664），但在健康对照中没有发现，这表明 ER 应激和未折叠蛋白反应（UPR） 的激活。在 DMD 的 mdx 小鼠模型中，Casp12（608633） 的前体和裂解形式（与人 CASP4 相同的小鼠功能）在肌肉中的表达也有所升高，同时 ER 应激标志物也有所升高。与 mdx 肌肉相比，敲除 mdx 小鼠中的 Casp12 往往会保留肌肉功能，比力产生和偏心收缩抵抗力恢复 75%。通常在 mdx 肌肉中发现的代偿性肥大在没有 Casp12 的情况下正常化，这是由于纤维尺寸减小而不是纤维类型变化所致。Casp12 的缺失并没有减少 mdx 肌肉纤维化或外观。mdx 小鼠的肌纤维变性在 Casp12 -/- mdx 肌肉中减少到几乎野生型水平。Moorwood 和 Barton（2014） 得出结论，Casp12 的缺失促进了 mdx 小鼠的肌纤维存活，并且异常的 UPR 激活可能导致人类 DMD 发病机制。

除了肌肉中存在外，肌营养不良蛋白还存在于脉管系统中，其缺乏会导致血管缺陷和血流异常。由于 Flt1 是血管内皮生长因子（VEGF; 192240） 的诱饵受体，因此纯合（Flt1 -/-） 和杂合（Flt1 +/-） Flt1 基因敲除小鼠在胚胎发生过程中均表现出内皮细胞增殖和血管密度增加。为了创建脉管系统增加的 DMD 小鼠模型，Verma 等人（2010） 将 mdx 小鼠与 Flt1 敲除小鼠杂交。与野生型和 mdx 小鼠相比，Flt1 +/- 和 mdx:Flt1 +/- 成年小鼠的骨骼肌血管密度分别显示出发育性增加。与 mdx 小鼠相比，mdx:Flt1 +/- 小鼠的肌肉组织学有所改善，纤维化、钙化和膜通透性降低。从功能上讲，mdx：与 mdx 小鼠相比，FLt1 +/- 小鼠的肌肉血流量和力量产生有所增加。由于 utropin（128240） 在 mdx 小鼠中表达上调，并且可以补偿肌营养不良蛋白功能的缺乏，Verma 等人（2010） 创建了三重突变小鼠（mdx:utropin -/-:Flt1 +/-）。与 mdx:utropin -/- 小鼠相比，mdx:utropin -/-:Flt1 +/- 小鼠还表现出改善的肌肉组织学和显着更高的存活率，后者显示出比 mdx 小鼠更严重的肌肉表型。维尔马等人（2010） 表明增加 DMD 的脉管系统可能会改善与该疾病相关的组织学和功能表型。维尔马等人（2010） 创建了三重突变小鼠（mdx:utropin -/-:Flt1 +/-）。与 mdx:utropin -/- 小鼠相比，mdx:utropin -/-:Flt1 +/- 小鼠还表现出改善的肌肉组织学和显着更高的存活率，后者显示出比 mdx 小鼠更严重的肌肉表型。维尔马等人（2010） 表明增加 DMD 的脉管系统可能会改善与该疾病相关的组织学和功能表型。维尔马等人（2010） 创建了三重突变小鼠（mdx:utropin -/-:Flt1 +/-）。与 mdx:utropin -/- 小鼠相比，mdx:utropin -/-:Flt1 +/- 小鼠还表现出改善的肌肉组织学和显着更高的存活率，后者显示出比 mdx 小鼠更严重的肌肉表型。维尔马等人（2010） 表明增加 DMD 的脉管系统可能会改善与该疾病相关的组织学和功能表型。

阿莫阿西等人（2018） 使用腺相关病毒将 CRISPR 基因编辑组件传递给具有 DMD δE50-MD 狗模型的 4 只狗，并在 2 只狗肌内分娩后 6 周或 2 只狗全身分娩后 8 周检查肌营养不良蛋白表达。骨骼肌全身输送后，肌营养不良蛋白恢复至正常水平的 3% 至 90%，具体取决于肌肉类型。在接受最高剂量的狗的心肌中，肌营养不良蛋白水平达到正常值的 92%。接受治疗的狗还表现出肌肉组织学的改善。阿莫阿西等人（2018） 得出的结论是，这些大型动物数据支持了这样一个概念：随着进一步发展，基因编辑方法可能在临床上对治疗 DMD 有用。

▼ 等位基因变异体（86 个选定示例）：.

0001 杜氏肌营养不良
DMD，GLU1157TER
Bulman 等人使用针对肌营养不良蛋白 N 末端的抗体（1991） 在 DMD（310200） 患者中鉴定出截短的蛋白质。针对 C 末端的抗体未能识别任何交叉反应物质，这一结果与肌营养不良蛋白翻译的提前终止一致。126 kD 的估计分子量预测了 mRNA 和基因中突变的大致位置。对来自患者肌肉 cDNA 的克隆 PCR 产物进行测序，并对扩增的患者基因组 DNA 进行直接测序，结果显示第 3714 位发生 G 至 T 颠换（GAG 至 TAG），导致谷氨酸密码子 1157 变为琥珀终止密码子。这是首例报道的人类 DMD 点突变病例。

.0002 贝克尔肌营养不良症，非典型
DMD，启动子 DEL
Bushby 等人在 7 名 BMD 患者（300376） 中的 1 名中，通过免疫印迹对抗肌营养不良蛋白进行的分析显示，与对照组相比，产生的全尺寸分子丰度减少（1991） 发现 DMD 基因启动子区域不存在预期片段之一。他们在启动子区域内使用了 3 组引物进行 PCR，然后进行斑点印迹和限制性分析。通过使用其他引物组扩增时发现正常大小的片段，排除了大的缺失。该患者没有肌肉疾病家族史，早期运动里程碑和活动能力完全正常。然而，从5岁起，他的小腿和大腿出现肌肉痉挛性疼痛，严重程度限制了他的运动潜力。这些疼痛与挛缩无关，小时候休息时大约 1 小时就会消失，但到了 35 岁时，疼痛可能会持续长达 24 小时。异常剧烈的运动与深色尿液有关，但肌红蛋白尿从未得到证实。从十几岁开始，他在举起重物时手和肩膀也感到疼痛。痉挛的严重程度和持续时间与 Gospe 等人描述的家庭中的情况相似（1989）。直到30岁左右，他开始爬楼梯有困难时，才发现肌肉无力。这种弱点是慢慢发展的。40 岁时，他有轻度前凸步态，需要 2 个栏杆才能爬楼梯，并需要大腿支撑才能从椅子或地板上站起来。血清 CPK 水平非常高，心电图显示 III 导联和 aVR 导联不完全右束支传导阻滞和 Q 波。肌营养不良蛋白的产生量仍为正常丰度的 73%，这表明启动子以降低的效率保留其功能，或者存在可以控制肌肉中肌营养不良蛋白表达的额外序列。博伊斯等人（1991） 还发现了一个特定删除肌营养不良蛋白肌肉启动子的个体，从而导致贝克型肌营养不良症。

.0003 杜氏肌营养不良
DMD，GLU931TER
在一名 DMD 患者（310200） 中，Roberts 等人（1992） 发现了 DMD 基因 2999 号核苷酸的 G-T 颠换，导致谷氨酰胺-931 变为“停止”。

.0004 杜氏肌营养不良
DMD，GLN1851TER
对于一名中等严重程度的 DMD（310200） 患者，Roberts 等人（1992） 在 DMD 基因的核苷酸 5759 处发现了 C 到 T 的转变，导致谷氨酰胺 1851 转变为终止密码子。临床严重程度介于 Duchenne 肌营养不良症和 Becker 肌营养不良症之间。

.0005 杜氏肌营养不良
DMD，ARG2982TER
在患有 DMD（310200） 的男性中，Roberts 等人（1992） 鉴定了核苷酸 9152 处的 C 到 T 转变，导致精氨酸 2982 转变为“终止”。

.0006 杜氏肌营养不良
DMD，IVS68，TA，+2
对于一名患有 DMD（310200） 和智力迟钝的患者，Roberts 等人（1992） 发现内含子 68 的供体剪接位点从 GT 变为 GA，导致外显子 68（核苷酸 10016-10182）的跳跃。转录本序列的丢失导致该患者发生移码，导致翻译过早终止。

.0007 杜氏肌营养不良
DMD，ARG3370TER
在一名 DMD 患者（310200） 中，Roberts 等人（1992） 在核苷酸 10316 处观察到 C 到 T 的转变，将 arg 密码子 3370 转换为“终止”。

.0008 杜氏肌营养不良
DMD，EX73-76DEL
在一名 DMD 患者（310200） 中，Roberts 等人（1992） 鉴定出导致外显子 73-76（核苷酸 10537-11129）缺失的点突变。移码发生在亮氨酸-3444之后。

.0009 杜氏肌营养不良
DMD，1-BP DEL，10662T
在中等严重程度的 DMD（310200） 病例中，Roberts 等人（1992） 观察到胸腺嘧啶核苷酸 10662 的缺失导致移码和亮氨酸 3485 处的提前终止。伦克等人（1993） 在一名杜氏肌营养不良症患者中发现了这种突变。

.0010 杜氏肌营养不良
DMD，1-BP INS，EX12
通过化学错配裂解，Kilimann 等人（1992） 在 4 个 T 残基的连续延伸中鉴定出一个单核苷酸插入，一个 T，导致移码，在新阅读框下游 13 个密码子处有一个终止密码子。因此，推导的翻译产物将在仅 13% 的肌营养不良蛋白氨基酸序列后结束，预计该序列将无功能。母亲是突变的携带者。

.0011 杜氏肌营养不良症
DMD、AG-T、EX48
在患有杜氏肌营养不良症（DMD; 310200） 且未检测到缺失或重复的患者中，Kilimann 等人（1992） 使用化学错配切割来鉴定正常 AG 二核苷酸被单个 T 取代。这导致移码，新的阅读框被突变下游的终止密码子 11 三联体终止，位于外显子 49 的开头。推导的多肽在正常肌营养不良蛋白长度的 65% 后断裂，失去了其三螺旋杆的最后四分之一及其独特的富含半胱氨酸和 C 末端结构域。因此它可能不起作用。

.0012 杜氏肌营养不良
DMD，EX21DEL
通过使用逆转录和 PCR 分析外周血淋巴细胞中的异位转录（也称为非法或渗漏转录），Rininsland 等人（1992） 发现 DMD 患者的外显子 21 缺失（310200）。

.0013 杜氏肌营养不良症
DMD，EX18DEL
在附录中，Rininsland 等人（1992） 指出，他们通过异位转录本分析，在 DMD 患者（310200） 中发现了外显子 18 的基因组缺失。

.0014 杜氏肌营养不良
DMD，GLN2319TER
患有 DMD（310200） 的 2 个兄弟，Clemens 等人（1992）证明了在氨基酸位置2319处存在赭石链终止密码子；核苷酸 7163 处的 C 到 T 转变是造成这一变化的原因。在对受影响男孩的基因组 DNA 进行的研究中，没有发现主要的基因重排。然而，含有外显子 48 近端部分的 HindIII Southern 片段的缺失导致了点突变的鉴定，该点突变在该外显子中产生了新的 HindIII 限制性位点。

.0015 杜氏肌营养不良症
DMD，ARG768TER，CT，NT2510
Prior 等人使用异源双链方法在 110 名 DMD 患者中筛选了 5 个含有 CpG 二核苷酸的 DMD（310200） 外显子，没有检测到缺失或重复（1993） 鉴定了 2 个不同的无义突变和一个单碱基缺失，全部发生在外显子 19 中。他们表示，这是抗肌营养不良蛋白基因中小突变聚集的第一份报告。经鉴定，三名患者的外显子 19 PCR 产物迁移异常。每个异源双链体的测序显示，患者 1 由于核苷酸 2510 处的 C 到 T 转变而出现无义突变，将 CGA（arg） 密码子更改为 TGA（stop）。患者2缺失了核苷酸2568-2570处存在的3个胞嘧啶中的1个。由此产生的移码将亮氨酸 787 转化为色氨酸并在密码子 792 处引起终止，外显子 19（3​​00377.0016） 末端突变下游有 6 个三联体。患者 3 在核苷酸 2522 处发生 G-T 转换，将 GAG（glu） 密码子转换为 TAG（终止密码子）（300377.0017）。在外显子19和筛选的其他4个外显子（即6、7、9和14）中未发现中性多态性。

.0016 杜氏肌营养不良
DMD，1-BP DEL，2568C
参见 300377.0015 和 Prior 等人（1993）。

.0017 杜氏肌营养不良
DMD、GLU772TER、GT、NT2522
参见 300377.0015 和 Prior 等人（1993）。

.0018 贝克尔肌营养不良症
DMD，IVS19，AC，+3
在一个叔叔和侄子患有贝克尔肌营养不良症（BMD; 300376） 且 DMD 基因部分缺失的家庭中，Laing 等人（1992） 发现叔叔的妹妹终止妊娠后胎儿中的基因完全缺失。标记表明这 2 例病例中相同的 X 染色体受到影响。莱恩等人（1992） 讨论了偶然出现和前突变的替代可能性。在后来对该家族的研究中，威尔顿等人（1993）证明导致贝克尔肌营养不良症的主要突变是剪接位点的改变。使用 RT-PCR 对家族中一名 BMD 患者的肌肉活检中的 RNA 进行分析，以研究成熟基因转录本。外显子 19 从肌营养不良蛋白 mRNA 中删除，但存在于基因组水平。发现外显子 19 的丢失与内含子 19 5-prime 剪接位点的第三个核苷酸中的 A-C 颠换有关。该患者中存在低水平的正常大小的肌营养不良蛋白信息和肌营养不良蛋白。如前所述，剪接位点突变是金毛猎犬肌肉营养不良的原因（Sharp 等，1992）。

.0019 贝克尔肌营养不良症
DMD，IVS57，GC，-1
罗伯茨等人（1993） 描述了一名患有贝克型肌营养不良症（300376） 的日本血统男性的 DMD 基因点突变，该男性在 31 岁时首次就诊，抱怨跑步和爬楼梯困难，并且经常跌倒。经过检查，他发现小腿肥大，上肢无力，并使用高尔斯手法将自己从地板上抬起来。一位叔叔患有进行性肌营养不良症，18 岁时因心力衰竭猝死。先证者 36 岁时坐在轮椅上，43 岁时死于心力衰竭。57 号外显子剪接受体位点的单碱基替换将共有 AG 转变为 AC，导致该外显子的异常剪接。

.0020 杜氏肌营养不良
DMD，LEU54ARG
利用异源双链技术和扩增产物的直接测序，Prior 等人（1993） 对 105 名非缺失/非重复 DMD（310200） 患者进行了点突变筛查，并在 1 中发现了他们认为是第一个被检测为 DMD 病因的抗肌营养不良蛋白错义突变。该突变是 T 到 G 的颠换，导致肌节蛋白结合域中第 54 位氨基酸处的进化上保守的亮氨酸被精氨酸取代。产生的肌营养不良蛋白被正确定位，并且其水平高于 DMD 患者中观察到的水平。这表明完整的肌节蛋白结合结构域对于蛋白质稳定性和功能至关重要。

.0021 扩张型心肌病，3B
DM​​D，EX1DEL
在一个有 4 个兄弟和 2 个叔叔患有扩张型心肌病（302045） 的家庭中，Muntoni 等人（1993） 描述了 DMD 基因的第一个肌肉外显子和肌肉启动子区域的缺失。尽管不存在骨骼肌无力，但血清肌酸激酶水平升高。他们提出了这样的假设：“大脑启动子正在骨骼肌中驱动相对较高水平的转录，但在心脏中则不然。” Bies（1994） 以及 Towbin 和 Ortiz-Lopez（1994） 质疑肌肉启动子缺失是否是心肌病的特异性。蒙托尼等人（1995）指出，删除并没有去除大脑或浦肯野细胞启动子。通过免疫细胞化学方法在 Muntoni 等人的家族的骨骼肌中检测到肌营养不良蛋白（1993）, 尽管删除消除了肌肉亚型的转录起始位点。为了确定哪个启动子在这些个体的骨骼肌中驱动肌营养不良蛋白转录，Muntoni 等人（1995） 首先评估了正常人骨骼肌和心肌以及小鼠大脑和小脑中肌肉、大脑和浦肯野细胞亚型的外显子 1 的表达。在正常患者中，他们发现，除了脑同工型的表达极少外，只有肌肉同工型在骨骼肌中显着转录，而外显子1肌肉和脑同工型在心肌中均高度表达。相比之下，X连锁扩张型心肌病患者的骨骼肌显示出大脑和浦肯野细胞亚型的表达。这两种亚型在骨骼肌中的过度表达似乎对于预防受影响男性的肌病至关重要。由于缺乏心脏方面的肌营养不良蛋白数据，严重心肌病的原因仍然是推测性的。患者体内缺失的内含子 1 5-prime 区域的调控序列可能对各种组织中肌营养不良蛋白的表达具有重要意义。该家族中的缺失也可能特异性影响 2 个肌营养不良蛋白肌节蛋白结合域中的 1 个。患者体内缺失的内含子 1 5-prime 区域的调控序列可能对各种组织中肌营养不良蛋白的表达具有重要意义。该家族中的缺失也可能特异性影响 2 个肌营养不良蛋白肌节蛋白结合域中的 1 个。患者体内缺失的内含子 1 5-prime 区域的调控序列可能对各种组织中肌营养不良蛋白的表达具有重要意义。该家族中的缺失也可能特异性影响 2 个肌营养不良蛋白肌节蛋白结合域中的 1 个。

.0022 杜氏肌营养不良症
DMD，IVS26，TG，+2
威尔顿等人（1994） 使用 RT-PCR 从患有 DMD 的 2 个兄弟中鉴定出比正常更大的抗肌营养不良蛋白 mRNA（310200）。抗肌营养不良蛋白 mRNA 大小的增加是由于外显子 26/内含子 26 连接处的剪接位点突变所致，其中 T 到 G 的替换阻止了正常的 RNA 加工。突变下游的隐秘剪接位点在加工过程中被激活，导致包含内含子 26 的 117 个碱基。这一插入将一个框内终止密码子引入到成熟的肌营养不良蛋白 mRNA 中。Wilton 等人使用等位基因特异性测试（1994） 发现母亲不携带这种突变，而根据常规检测和单倍型分析指定为携带者的大女儿也没有携带 DMD 突变。该家族的最初单倍型分析似乎很简单，性腺嵌合只有在等位基因特异性分析后才变得明显。在这个家族中，应用连锁标记来识别疾病位点以进行常规遗传咨询可能是错误的。

.0023 杜氏肌营养不良症
DMD，GLN673TER
Lenk 等人（1994） 使用非同位素 PCR-SSCP 分析和直接测序在 DMD（310200） 家族中检测到 gln673-to-ter 无义突变。

巴比耶里等人（1995）孤立检测到相同的突变。他们使用异源双链分析在 40 名意大利 DMD/BMD（300376） 患者样本中寻找小突变，但未发现大的重排。对异源双链体进行直接测序，鉴定出在患有严重 DMD 表型的患者的外显子 17 中插入 gln673 终止密码子的 C 到 T 转换。

蒙托尼等人（1995） 报道了该家族一名成员心脏中抗肌营养不良蛋白转录和表达的研究。尽管受影响男性的大脑和浦肯野细胞亚型在受影响男性的肌肉中表达，但心脏中不存在肌养蛋白转录和表达，除了通常存在于心脏中的远端 Dp71 肌营养不良蛋白亚型外。尽管存在 Dp71，心脏中的 43kD 和 50kD 抗肌营养不良蛋白相关蛋白却严重减少，但骨骼肌中却没有。心脏中肌营养不良蛋白的缺失和肌营养不良蛋白相关蛋白的下调是该家族中严重心肌病的原因。蒙托尼等人（1995）推测突变对心脏中抗肌营养不良蛋白表达的严重影响可能是由于心脏特异性调节序列的去除所致。该家族可能代表了专门影响通常存在于骨骼肌和心肌中的基因的心脏表达的突变的第一个例子。

.0024 杜氏肌营养不良
DMD，1-BP DEL，10334C 和 IVS69，GT，+1
Tuffery 等人使用 PCR 扩增产物的单链构象分析来筛选 20 名无关的 DMD（310200） 或 BMD（300376） 患者的 DMD 基因末端结构域（外显子 60-79）（1995） 在 2 名智障 DMD 患者中检测到 2 个新的点突变：外显子 70 中的 1-bp 缺失（他们称之为 10334delC）和内含子 69 中的 5-prime 剪接供体位点改变（10294,+1,GT）。预计这两种突变都会导致肌营养不良蛋白翻译过早终止。大约 30% 的 DMD 患者观察到智力低下（Emery，1993）。这项研究在 Lenk 等人描述的 7 名患有与智力低下相关的 C 末端点突变的 5 名患者中又增加了 2 名病例（1993），表明该基因的末端区域可能参与认知障碍。霍奇森等人（1992） 发现相同的缺失在有或没有精神障碍的不同个体中发生，并且许多不同的缺失与精神发育迟滞有关。

.0025 心肌病，扩张，3B
DM​​D，IVS1，GT，+1
米拉辛等人（1996） 描述了一个患有严重 X 连锁扩张型心肌病的家族中 DMD 基因的剪接供体位点突变（302045）。对 DMD 肌肉启动子、第一个外显子和内含子区域的分析揭示了第一个外显子-内含子边界处存在单点突变，使第一个内含子的普遍保守的 5-prime 剪接位点共有序列失活。该突变是 GT 二核苷酸共有序列的第一个碱基的 G 到 T 颠换。该突变为 MseI 引入了一个新的限制位点，该位点与该疾病在亲属中共分离。主要抗肌营养不良蛋白 mRNA 亚型（来自肌肉、脑和浦肯野细胞启动子）的表达在心肌中完全消失，而在骨骼肌中可以检测到脑和浦肯野细胞（但不是肌肉）亚型。抗肌营养不良蛋白抗体的免疫细胞化学研究表明，该蛋白数量减少，但正常分布在骨骼肌中，而在心肌中检测不到。作者的这些发现表明，肌营养不良蛋白亚型的表达对于心肌功能至关重要，并表明肌营养不良蛋白相关扩张型心肌病中选择性心脏受累与心脏中替代启动子补偿性表达肌营养不良蛋白有关。该家族的先证者是一名 24 岁男性，在过去 6 个月内出现严重心力衰竭。他完全没有任何骨骼肌疾病的临床或实验室症状，包括血清肌酸激酶水平升高。此外，他多年来一直是一名竞技篮球运动员。一个弟弟也受到了影响。

.0026 杜氏肌营养不良、智力低下和 ERG B 波缺失
DMD，CYS3340TYR
在患有 DMD（310200）、智力低下和 ERG B 波缺失的患者中，Lenk 等人（1996） 在肌营养不良蛋白基因中的核苷酸 10227（10227G-A） 处发现了 G 到 A 的转变，导致肌营养不良蛋白聚糖结合结构域的后半部分内 cys3340 被 cys3340 取代为 tyr。在所有肌纤维上都发现了微弱的肌营养不良蛋白痕迹。43-kD β-肌营养不良聚糖的肌膜染色强度也降低。

.0027 贝克肌营养不良
DMD，IVS2，GT，-1
Roberts 等人（1994） 报道，在贝克尔型肌营养不良症（300376） 患者中，第 301 位核苷酸（外显子 3 受体位点的第一个核苷酸）发生 G 到 T 取代，导致异常剪接，导致外显子 3 跳跃。

.0028 中度肌营养不良症
DMD、2-BP DEL、382AG
在患有中度肌营养不良症（Duchenne（310200） 和 Becker（300376） 肌营养不良症之间的表型）的患者中，Roberts 等人（1994） 发现 DMD 基因外显子 3 的第 382 位有 2 个核苷酸（AG） 缺失，导致苏氨酸 58 下游发生移码。

.0029 杜氏肌营养不良症
DMD，GLN60TER
对于一名患有杜氏肌营养不良症（310200） 的患者，Roberts 等人（1994） 鉴定出 DMD 基因外显子 3 中核苷酸 386 处的 C-T 取代，导致第 60 位出现无义突变。

.0030 杜氏肌营养不良症
DMD，1-BP INS，402A
在患有杜氏肌营养不良症（310200） 的患者中，Kneppers 等人（1993） 发现在 DMD 基因外显子 4 的 402 位插入了一个 A，导致谷氨酸 65 下游发生移码和截短的蛋白质。

.0031 杜氏肌营养不良症
DMD，GLN85TER
在患有杜氏肌营养不良症（310200） 的患者中，Roberts 等人（1994） 鉴定了 DMD 基因外显子 4 中核苷酸 460 处的 C 到 T 取代，导致在位置 85 处产生终止密码子。

.0032 杜氏肌营养不良
DMD，ARG145TER
对于一名杜氏肌营养不良（310200） 患者，Roberts 等人（1994） 鉴定了 DMD 基因外显子 6 中核苷酸 641 处的 C 到 T 取代，导致在位置 145 处出现终止密码子。

.0033 贝克尔肌营养不良症
DMD，ALA168ASP
在一名贝克尔肌营养不良症（300376） 患者中，Roberts 等人（1994） 鉴定了 DMD 基因外显子 6 中核苷酸 711 处的 C 到 A 取代，导致天冬氨酸取代丙氨酸 168。

.0034 杜氏肌营养不良症
DMD，1-BP DEL，724C
在患有杜氏肌营养不良症（310200） 的患者中，Roberts 等人（1994） 鉴定出外显子 6 中核苷酸（724C） 的缺失，导致亮氨酸 172 下游发生移码和截短的蛋白质。

.0035 贝克尔肌营养不良症
DMD，TYR231ASN
对于一名贝克尔肌营养不良症（300376） 患者，Roberts 等人（1994） 鉴定了 DMD 基因外显子 8 中核苷酸 899 处的 T 到 A 取代，导致天冬酰胺取代酪氨酸 231。

.0036 杜氏肌营养不良症
DMD，GLN242TER
对于一名患有杜氏肌营养不良症（DMD；310200） 的患者，Nigro 等人（1992）和普赖尔等人（1994） 鉴定了 DMD 基因外显子 8 中核苷酸 932 处的 C 到 T 取代，编码位置 242 处的终止密码子。

.0037 杜氏肌营养不良
DMD，GLU250TER
Roberts 等人（1994） 报道了一名杜氏肌营养不良症（DMD; 310200） 患者的外显子 8 中核苷酸 956 处的 G 到 T 替换，导致位置 250 处出现终止密码子和截短的蛋白质。

.0038 杜氏肌营养不良
DMD，11-BP DEL，NT989
Roberts 等人（1994） 报道，在患有杜氏肌营养不良症（DMD; 310200） 的患者中，外显子 8 的第 989 位 11 个核苷酸缺失，导致苏氨酸 261 下游的移码和截短的蛋白质。

.0039 杜氏肌营养不良症
DMD，1-BP INS，NT1554
在患有杜氏肌营养不良症（DMD；310200） 的患者中，Kilimann 等人（1992） 鉴定出在外显子 12 的位置 1554 处插入了 T，导致亮氨酸 449 下游发生移码和截短的蛋白质。

.0040 中度肌营养不良
DMD，GLY480TER
在患有中度肌营养不良的患者中，Prior 等人（1994） 鉴定了外显子 12 中核苷酸 1646 处的 G 到 T 取代，导致位置 480 处出现终止密码子。

.0041 杜氏肌营养不良症
DMD，GLN497TER
在患有杜氏肌营养不良症（DMD；310200） 的患者中，Lenk 等人（1993） 鉴定了外显子 13 中核苷酸 1697 处的 C-T 取代，编码位置 497 处的终止密码子。

.0042 贝克尔肌营养不良症
BMD, IVS13, GT, -1
在贝克尔肌营养不良症（BMD; 300376） 患者中，Hagiwara 等人（1994）在内含子 13 的 5-prime 剪接位点内的外显子 13 末端核苷酸（1810） 处鉴定出 G-to-T 取代。该突变导致外显子 13 跳跃。预测的多肽是截短的肌营养不良蛋白，缺乏缬氨酸 495 下游的 40 个氨基酸。

.0043 杜氏肌营养不良
DMD，TRP651TER
Roberts 等人（1994） 报道，在患有杜氏肌营养不良症（DMD; 310200） 的患者中，外显子 16 中核苷酸 2160 处发生 G 至 A 替换，导致 651 位处出现终止密码子和截短的蛋白质。

.0044 杜氏肌营养不良症
DMD，LYS770TER
Roberts 等人（1994） 报道，在杜氏肌营养不良症（DMD; 310200） 患者中，外显子 19 中核苷酸 2516 处发生 A 至 T 取代，导致 770 位处出现终止密码子和截短的蛋白质。

.0045 杜氏肌营养不良症
DMD，LYS773GLU
在患有杜氏肌营养不良症（DMD；310200） 的患者中，Saad 等人（1994） 鉴定了外显子 19 中核苷酸 2525 处的 A 至 G 取代，将谷氨酸改为赖氨酸 773。

.0046 杜氏肌营养不良症
DMD，52-BP DEL
在患有杜氏肌营养不良症（DMD；310200） 的患者中，Matsuo 等人（1990, 1991） 鉴定出外显子 19 中 88 bp 中的 52 bp 被删除。外显子 19 的 3-prime 和 5-prime 末端都存在。该突变在外显子 20 的残基 791 处引入了终止密码子，并导致产生严重截短的蛋白质。

.0047 杜氏肌营养不良
DMD，1-BP INS，NT2928
Roberts 等人（1994） 报道，在杜氏肌营养不良症（DMD; 310200） 患者中，在外显子 21 的 2928 位插入 1 个核苷酸，导致亮氨酸 907 下游移码和截短的蛋白质。

.0048 杜氏肌营养不良
DMD，GLN1041TER
Roberts 等人（1994） 报道，在患有杜氏肌营养不良症（DMD; 310200） 的患者中，外显子 23 中核苷酸 3329 处的 C 到 T 取代，导致位置 1041 处出现终止密码子和截短的蛋白质。

.0049 杜氏肌营养不良
DMD，TRP1063TER
Roberts 等人（1994） 报道，在患有杜氏肌营养不良症（DMD; 310200） 的患者中，外显子 24 中核苷酸 3396 处发生 G 至 A 替换，导致 1063 位处出现终止密码子和截短的蛋白质。

.0050 杜氏肌营养不良
DMD，GLN1405TER
Roberts 等人（1994） 报道，在一名患有杜氏肌营养不良症（DMD; 310200） 的患者中，外显子 30 中核苷酸 4421 处的 C 到 T 取代，导致位置 1405 处出现终止密码子和截短的蛋白质。

.0051 杜氏肌营养不良症
DMD，GLN1472TER
Roberts 等人（1994） 报道，在患有杜氏肌营养不良症（DMD; 310200） 的患者中，外显子 32 中核苷酸 4622 处的 C 到 T 取代，导致位置 1472 处出现终止密码子和截短的蛋白质。

.0052 杜氏肌营养不良症
DMD，ARG1967TER
在患有杜氏肌营养不良症（DMD；310200） 的患者中，Saad 等人（1993） 鉴定了外显子 41 中核苷酸 6107 处的 C 至 T 取代，编码位置 1967 处的终止密码子。

.0053 杜氏肌营养不良
DMD，1-BP DEL，6408C
Kneppers 等人（1993） 在一名杜氏肌营养不良症（DMD; 310200） 患者中发现 1 个核苷酸（6408C） 的缺失，导致苏氨酸 2067 下游发生移码和截短的蛋白质。

.0054 杜氏肌营养不良
DMD，ARG2098TER
Roberts 等人（1994） 报道，在患有杜氏肌营养不良（DMD; 310200） 的患者中，外显子 44 中核苷酸 6500 处的 T 到 C 替换，导致位置 2098 处出现终止密码子和截短的蛋白质。

.0055 杜氏肌营养不良症
DMD，GLN2125TER
在患有杜氏肌营养不良症（DMD；310200） 的患者中，Prior 等人（1993） 鉴定了外显子 44 中核苷酸 6581 处的 C-T 取代，编码位置 2125 处的终止密码子。

.0056 杜氏肌营养不良
DMD，17-BP DEL，NT6982
Roberts 等人（1994） 报道了一名杜氏肌营养不良症（DMD; 310200） 患者的外显子 47 中从 6982A 到 6998C 的 17 bp 缺失，导致谷氨酸 2259 下游发生移码和截短的蛋白质。

.0057 杜氏肌营养不良症
DMD，GLN2264TER
Roberts 等人（1994） 报道，在患有杜氏肌营养不良（DMD; 310200） 的患者中，外显子 47 中核苷酸 6998 处的 C 到 T 替换，导致位置 2264 处出现终止密码子和截短的蛋白质。

.0058 杜氏肌营养不良
DMD，1-BP INS，7188A
Roberts 等人（1994） 报道，在杜氏肌营养不良（DMD; 310200） 患者中，在外显子 48 的 7188 位置插入 1 个核苷酸（A），导致谷氨酸 2331 下游发生移码和截短的蛋白质。

.0059 杜氏肌营养不良
DMD，IVS47，GA，+1，EX48DEL
Roberts 等人（1994） 报道，在杜氏肌营养不良症（DMD; 310200） 患者中，第 7306 号核苷酸（外显子 48 供体位点的第一个核苷酸）发生 G 到 A 替换，导致异常剪接和外显子 48 的跳跃。

.0060 杜氏肌营养不良
DMD，GLU2468TER
Winnard 等人（1992） 在患有杜氏肌营养不良症（DMD; 310200） 的患者中鉴定出 7609-10 位处的 2 个核苷酸（GG 至 AT）的取代，编码位置 2468 处的终止密码子。

.0061 重新分类 - 意义未知的变体
DMD，GLU2910VAL
该变体以前的标题为 DUCHENNE 肌肉营养不良，已根据 Hamosh（2018） 对 gnomAD 数据库的审查进行了重新分类。

Lenk 等人在患有杜氏肌营养不良症（DMD; 310200） 的患者中（1994） 鉴定了外显子 59 中核苷酸 8937 处的 A 到 T 取代，将谷氨酸 2910 改为缬氨酸。

Hamosh（2018） 发现 GnomAD 数据库中 199,997 个等位基因中的 4,287 个等位基因以及 53 个纯合子和 1,379 个半合子中存在 E2910V 变体（2018 年 4 月 19 日）。

.0062 重新分类 - 意义不明的变体
DMD，ASN2912ASP
该变体以前的标题为 DUCHENNE 肌肉营养不良，已根据 Hamosh（2018） 对 gnomAD 数据库的审查进行了重新分类。

Lenk 等人在患有杜氏肌营养不良症（DMD; 310200） 的患者中（1994） 鉴定了外显子 59 中核苷酸 8942 处的 A 至 G 取代，将天冬氨酸更改为天冬酰胺-2912。

Hamosh（2018） 发现 N2912D 变体存在于 gnomAD 数据库中 200,085 个等位基因中的 4,370 个等位基因以及 59 个纯合子和 1,416 个半合子中（2018 年 4 月 19 日）。

.0063 重新分类 - 意义不明的变体
DMD，HIS2921ARG
该变体以前的标题为“BECKER MUSCULAR DYSTROPHY”，已根据 Hamosh（2018） 对 gnomAD 数据库的审查进行了重新分类。

Lenk 等人在一名贝克尔型肌营养不良症（BMD; 300376） 患者中进行了研究（1994） 鉴定了外显子 59 中核苷酸 8970 处的 A 至 G 取代，将精氨酸更改为组氨酸 2921。

Hamosh（2018） 发现 H292R 变体存在于 gnomAD 数据库中 200,041 个等位基因中的 5,130 个以及 42 个纯合子和 1,923 个半合子中（2018 年 5 月 8 日）。

.0064 杜氏肌营养不良
DMD，SER3066TER
Roberts 等人（1994） 报道，在一名患有杜氏肌营养不良症（DMD; 310200） 的患者中，外显子 62 中核苷酸 9405 处的 C 至 A 取代，导致位置 3066 处出现终止密码子和截短的蛋白质。

.0065 杜氏肌营养不良
DMD，4-BP DEL，NT9679
Roberts 等人（1994） 报道，在杜氏肌营养不良症（DMD; 310200） 患者中，外显子 65 中从 9679T 到 9682T 的 4 bp 缺失。该缺失导致异亮氨酸 3157 下游的移码和截短的蛋白质。

.0066 杜氏肌营养不良症
DMD，IVS65，GA，+1
Lenk 等人（1993） 在一名杜兴氏肌营养不良症（DMD; 310200） 患者中发现，第 9771 号核苷酸（外显子 65 供体位点的第一个核苷酸）处有 G 到 A 的替换，导致异常剪接、外显子 65 的跳跃和截短的蛋白质。

.0067 杜氏肌营养不良症
DMD，ARG3381TER
Lenk 等人（1993） 在患有杜氏肌营养不良症（DMD; 310200） 的患者中鉴定出位置 10349 处的 C 到 T 替换，编码位置 3381 处的终止密码子。

.0068 中度肌营养不良症
DMD，IVS70，GA，+1
对于患有中度肌营养不良症的患者，Lenk 等人（1993） 鉴定了 DMD 基因第 10431 号核苷酸（外显子 70 供体位点的第一个核苷酸）处的 G 到 A 取代，导致赖氨酸 3374 下游发生移码和截短的蛋白质。

.0069 杜氏肌营养不良症
DMD，IVS70，GT，+5
在患有杜氏肌营养不良症（DMD；310200） 的患者中，Lenk 等人（1993） 在 DMD 基因的第 10431 位核苷酸（外显子 70 供体位点的第五个核苷酸）处发现了 G 到 T 的替换。该突变导致赖氨酸 3374 下游发生移码和截短的蛋白质。

.0070 贝克尔肌营养不良症
DMD，ALA3421VAL
对于一名贝克尔肌营养不良症（300376） 患者，Lenk 等人（1993） 鉴定了外显子 71 中核苷酸 10470 处的 C 到 T 取代，将缬氨酸更改为丙氨酸 3421。

.0071 贝克尔肌营养不良
DMD，1-BP DEL，10683C
Roberts 等人（1994） 报道，贝克尔型肌营养不良症患者（300376） 的外显子 74 中 1 个核苷酸（10683C） 被删除，导致丙氨酸 3492 下游出现移码和截短的蛋白质。

.0072 杜氏肌营养不良症
DMD，8-BP DEL，1-BP INS，NT10692
Lenk 等人（1993） 在一名患有杜氏肌营养不良（DMD; 310200） 的患者中发现，第 10692 位上的 8 个核苷酸被 G 取代，导致亮氨酸 3495 下游发生移码和截短的蛋白质。

.0073 心肌病，扩张，3B
DM​​D，THR279ALA
Ortiz-Lopez 等人（1997） 使用 SSCP 分析和直接测序来鉴定一个患有 X 连锁心肌病的北美大家族的致病突变（302045）。核苷酸 1043 处的 A 到 G 突变仅存在于受影响的男性和携带者中。该突变将肌营养不良蛋白分子 H1 区域内第 279 位氨基酸的高度保守的苏氨酸变为丙氨酸。预计这种变化将导致心肌细胞膜完整性丧失并最终丧失收缩功能。

.0074 贝克尔肌营养不良症
DMD，GLU1211TER，3839G-T
志贺等人（1997） 发现了一个无义突变 glu1211-to-ter（E1211X），这是由于日本贝克尔肌营养不良症患者（300376） 的 DMD 基因中第 27 号外显子（3839G-T） 的第 28 个核苷酸发生 G-T 颠换所致。外显子 27 的部分跳跃导致产生截短的肌营养不良蛋白 mRNA，尽管外显子 27 两端剪接的共有序列未改变。为了确定 E1211X 如何诱导外显子 27 跳跃，Shiga 等人（1997） 使用 HeLa 细胞核提取物中的嵌合果蝇双性（dsx） 基因前 mRNA，在体外剪接系统中检查了外显子 27 内富含嘌呤区域的剪接增强子活性。含有3839G-T的突变序列消除了该嵌合前mRNA中上游内含子的野生型富含嘌呤序列的剪接增强子活性。模拟外显子 27 富含嘌呤序列的人工多嘌呤寡核苷酸也显示出增强子活性，该活性通过引入 T 核苷酸而受到抑制。此外，当插入的T残基产生无义密码子时，剪接增强子活性受到更显着的抑制。这是第一个证据表明，含有无义突变的外显子的部分跳跃是由于剪接增强子序列的破坏造成的。

.0075 心肌病，扩张，3B
DM​​D，ALU INS
Ferlini 等人在一个患有 X 连锁扩张型心肌病（302045） 的家族中（1998） 发现受影响的成员有一个 Alu 样移动元件重排到距内含子 11 5-prime 末端 2.4 kb 下游的 DMD 基因中。重排激活了内含子 11 中的 1 个隐蔽剪接位点，并产生了包含 Alu 样序列和部分相邻内含子 11 的替代转录物，剪接在外显子 11 和 12 之间。替代转录物的翻译因存在大量终止而被截断。密码子存在于类 Alu 序​​列的每一帧中。在心肌中仅检测到突变的 mRNA，但在骨骼肌中它与正常的 mRNA 共存。费里尼等人（1998） 提出这种类似 Alu 的序列可以代表一类新的重复元素，

.0076 杜氏肌营养不良
DMD，ARG3190TER
Moizard 等人在一名患有 DMD（310200） 的 9.5 岁男性中进行了智力测试，并且没有阅读能力（2000） 发现了 Dp71 转录本的过早翻译终止：外显子 66 中的 9776C-T 转变，导致 arg3190 到 stop 的替换。

.0077 贝克尔肌营养不良症
DMD，ARG1314TER
金贾尔等人（2000） 研究了一个 X 连锁肌营养不良症家族，其中 3 名男性出现了不同的表型：一名患有心肌病的严重贝克尔患者、一名轻度受影响的贝克尔患者和一名血清肌酸激酶水平升高的表面健康男性。在轻度受影响患者的肌肉活检标本中，4 种抗体中的 1 种（NCL-DYS1） 显示不存在肌营养不良蛋白。蛋白质截短测试检测到该患者的肌肉组织和淋巴细胞均存在截短的肌营养不良蛋白，并且肌肉中还有一个几乎正常大小的片段。基因组序列分析显示，DMD 基因的外显子 29 存在 4148C-T 突变，导致 arg1314-to-ter 突变。对较大肽的 mRNA 片段的序列分析显示，外显子 29 被跳过，恢复了开放解读码组。最后，

.0078 杜氏肌营养不良
DMD，1-BP DEL，377A
在患有杜氏肌营养不良（310200） 的男性中，van Essen 等人（2003） 在 DMD 基因中发现了 1 bp 缺失 377delA。该缺失导致移码，并在下游 45 bp 密码子 141 处产生终止密码子。母亲因突变而呈嵌合体；她将“风险单倍型”遗传给了她的另一个健康的儿子。

.0079 杜氏肌营养不良症
DMD，16-BP DEL
在一名患有严重杜氏肌营养不良症（310200） 的患者中，Todorova 等人（2003） 在 DMD 基因的外显子 44 中发现了一个 16 bp 的缺失，这导致了移码和过早的翻译终止。患者10岁时就开始坐轮椅。14岁时发现心肌损伤，18岁时因心肌病去世。

.0080 贝克尔肌营养不良症
DMD，IVS62，AG，-285
在 2 名不相关的贝克尔肌营养不良症患者（300376） 中，Tuffery-Giraud 等人（2003） 在 DMD 基因中发现了 2 个深层内含子突变，导致成熟转录本中异常包含假外显子。这 2 个突变是通过使用 RT-PCR 对从肌肉中分离的转录物进行鉴定的。第一个异常大的转录物是在一名患有精神发育迟滞的 BMD 患者中发现的，该转录物是由外显子 62 和外显子 63 之间插入 58 bp 产生的。该转录本的起源是内含子 62（IVS62-285A-G） 的突变，导致高质量供体剪接位点的出现。在内含子 25 中的第二个突变 IVS25+2036A-G（300377.0081） 是在一名肌酸激酶水平高的亚临床 BMD 患者中发现的。该突变增强了先前存在的受体剪接位点的强度，导致 95 bp 内含子假外显子的激活。通过变性高效液相色谱（DHPLC），发现患者的母亲是体细胞镶嵌体。这些新识别的额外外显子的插入导致提前终止密码子，但两名患者中都发生了某种程度的正常剪接。

.0081 贝克尔肌营养不良
DMD，IVS25，AG，+2036
参见 300377.0080 和 Tuffery-Giraud 等人（2003）。

.0082 杜氏肌营养不良症
DMD，ARG2905TER
Buzin 等人先前发现 141 名杜氏肌营养不良症（310200） 患者中的 6 例 DMD 基因大缺失呈阴性（2005） 鉴定了 DMD 基因外显子 59 的 CpG 二核苷酸中的 8713C-T 转变，导致 arg2905 到 ter（R2905X） 的取代。单倍型分析表明所有 6 个突变都是孤立发生的。

.0083 贝克尔肌营养不良症，非典型
DMD，IVS2，TA，+5591
在一名患有无症状肌营养不良症（参见 300376）的 12 岁男孩中，Yagi 等人（2003） 在淋巴细胞和肌肉 mRNA 中观察到 DMD 基因的外显子 2 和 3 之间有 132 bp 的插入。对插入侧翼区域进行测序揭示了 IVS2 中的 +5591T-A 颠换，为剪接受体位点创建了 AG 二核苷酸共有序列，预计会产生新的外显子结构，然后将其整合到肌营养不良蛋白 mRNA 中。44 密码子序列插入到 2 个肌节蛋白结合位点之间，这可能会干扰肌营养不良蛋白的定位；该患者肌肉活检的免疫组织化学染色显示，N 末端结构域未染色，而杆状和 C 末端结构域以斑片状和不连续的方式染色。八木等人。

.0084 杜氏肌营养不良症
DMD，TYR1995TER
Tran 等人在一名患有严重杜氏肌营养不良症（310200） 的日本男孩中（2007） 鉴定了 DMD 基因外显子 42 中的 5985T-G 颠换，导致 tyr1995-to-ter（Y1995X） 取代和无功能的蛋白质。对患者骨骼肌的 RNA 分析显示截短转录物的独特表达；然而，对患者白细胞的 RNA 分析表明，5985T-G 颠换也产生了一个新的剪接受体位点，导致异常剪接并产生 2 个部分功能性肌营养不良蛋白。研究结果表明组织特异性剪接调节，这可能是由于反式元件而不是顺式元件。特兰等人（2007） 表明在这种情况下调节 DMD 剪接可能是一个潜在的治疗靶点。

.0085 贝克尔肌营养不良症，非典型
DMD，EX45-47DEL
Kerst 等人（2000） 发现 MYF6 基因中 387G-T 颠换的单倍体不足，导致 ala112-to-ser 突变（159991.0001），引起轻度的中心核肌病（160150）。先证者父亲的相同突变（其肌营养不良蛋白基因中的外显子 45 至 47 也被删除）导致贝克尔肌营养不良症从预期的轻度病程转变为严重病程（300376）。父亲21岁时坐轮椅。克斯特等人（2000） 指出，已知 DMD 基因中外显子 45 至 47 的缺失与轻度至中度 BMD 病程相关。

.0086 贝克尔肌营养不良症
DMD，TRP3TER
Flanigan 等人对一名来自犹他州的 58 岁男性患有轻度贝克型肌营养不良症（300376） 进行了研究（2003） 在 DMD 基因的外显子 1 中发现了 9G-A 转变，导致了 trp3 到 ter（W3X） 的取代。该患者在 20 岁时出现肌肉无力，到 58 岁时仍未丧失行走能力。Gurvich 等人（2009） 报告了 Flanigan 等人报告的患者的随访情况（2003），他随后在 62 岁时失去了行走能力。他的兄弟也患有这种突变，在 62 岁时爬楼梯的困难很小。Gurvich 等人（2009） 在另外 5 个具有轻度 BMD 的受影响个体中发现了 W3X 突变，表现为血清肌酸激酶增加，有时在前 20 年出现劳力性肌痛。SNP 分析表明犹他州人口存在创始人效应，

Gurvich 等人使用免疫荧光研究（2009） 发现具有 W3X 突变的患者在肌纤维中表达抗肌营养不良蛋白，尽管与对照组相比水平有所下降，而且 W3X 突变蛋白缺乏外显子 1 和 N 末端序列。对报告基因构建体（包含 DMD 肌肉亚型的外显子 1 至 9）的研究，在 DMD 基因的外显子 6 中确定了 2 个替代翻译起始位点，从而合成了 60 kD 蛋白质，而不是野生型 72 kD 蛋白质。研究结果表明，这种缩短的蛋白质保留了足够的残余活性，可以显着改善由于 DMD 基因外显子 1 截短突变而导致的严重表型。