对接蛋白 3; DOK3

• DOK 样蛋白质； DOKL

HGNC 批准的基因符号：DOK3

细胞遗传学位置：5q35.3 基因组坐标（GRCh38）：5:177,501,903-177,511,099（来自 NCBI）

▼ 克隆与表达

Cong 等人通过使用 Abl（ABL1; 189980） 作为诱饵，然后进行小鼠肝脏 cDNA 文库的 5-prime RACE 进行酵母 2-杂交分析（1999） 克隆了小鼠 Dok3，他们将其称为 Dokl。 推导的 444 个氨基酸的小鼠蛋白包含一个 N 端 PH 结构域、一个中心 PTB 结构域和一个富含脯氨酸的 C 端结构域。 Dokl 总体上相对富含丝氨酸/苏氨酸，并且包含几个潜在的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶磷酸化位点。 Dokl 与 p62dok（DOK1；602919） 在 PH 和 PTB 结构域上分别具有 60% 和 57% 的序列相似性，在 C 端区域的相似性较低。 对小鼠组织的 Northern 印迹分析检测到几种在脾和肺中高表达而在其他组织中低水平表达的物种。 RNAse保护研究检测到Dokl在骨髓和脾脏中表达非常高，在胸腺中表达低，在NIH3T3细胞中没有表达。 免疫荧光研究将 Dok1 定位于 NIH3T3 细胞的细胞质。

Lemay 等人通过使用 Csk（124095） 作为诱饵进行酵母 2-杂交分析，然后进行小鼠胎儿胸腺 cDNA 文库的 5-prime RACE（2000）孤立克隆小鼠Dok3。 小鼠组织的 RNAse 保护测定检测到在脾脏和骨髓中高表达，但在胸腺中没有表达，在非淋巴器官中很少或没有表达。

▼ 测绘

伯杰等人（2010） 指出 DOK3 基因对应到染色体 5q35.3。

▼ 基因功能

Cong 等人使用酵母 2-杂交体和 Dokl 和 Abl 突变体的免疫沉淀分析（1999）表明Dokl PTB结构域以激酶依赖性方式结合Abl上的磷酸酪氨酸。 此外，Dok1 PTB结构域与胰岛素受体微弱结合（INSR；147670）。 免疫沉淀和磷酸化研究表明，Dokl 充当 v-Abl、c-Abl 和 Bcr-Abl 磷酸化的底物（参见 BCR；151410）。 Dokl 的过表达抑制 MAPK1（176948） 的 v-Abl 依赖性激活和 v-Abl 转化活性。

勒梅等人（2000） 表明，响应免疫受体刺激，Dok3 被 Src（190090） 家族成员 Lck（153390）、Fyn（137025） 和 Lyn（165120） 酪氨酸磷酸化。 免疫沉淀研究表明，Dok3 结合抑制剂 SHIP（INPP5D；601582） 和 Csk（124095），但不结合 RasGAP（RASA1；139150）。 Dok3 与 SHIP 的结合是通过 SH2 域发生的。 Dok3 还通过 Csk SH2 结构域结合 Csk，也可能涉及 Csk SH3 结构域。 Dok3 在小鼠 B 细胞系中的过度表达会抑制免疫受体介导的 NFAT（参见 600490）激活。 勒梅等人（2000） 得出的结论是，Dok3 在抑制分子的募集过程中充当衔接子，并可能在造血细胞中免疫受体信号传导的负调节中发挥作用。

Honma 等人使用 Src 的组成型活性形式（2006） 将 Grb2（108355） 鉴定为一种与 Dok3 酪氨酸磷酸化下游结合的蛋白质。 Dok3 将 Grb2 与 Shc（600560） 隔离，导致 Ras-Erk 通路的负调节。

▼ 动物模型

伯杰等人（2010） 发现敲除 Dok1（602919）、Dok2（604997） 或 Dok3 的小鼠均会患上肺腺癌（211980）。 对这 3 个基因的不同组合进行双敲除的小鼠在较早的年龄就患上了肺腺癌，且外显率较高，表明这些蛋白质具有部分冗余或重叠的功能。 与野生型肺组织相比，Dok 突变肿瘤显示磷酸化 Akt（164730） 中度染色和磷酸化 Erk（176872） 强染色。 对分离细胞的免疫组织化学研究表明，肿瘤细胞起源于 Dok 蛋白失活的支气管肺泡干细胞群。 这些发现与肿瘤发生模型一致，其中 Dok1、Dok2 和 Dok3 基因失活导致 Akt 和 Erk 过度激活，以及分化为 II 型肺泡细胞的干细胞扩增。