染色体传输保真度因子 18; CHTF18

染色体传输保真度因子 18，酿酒酵母，同源物
CTF18
CHL12，酵母，同源物；CHL12

HGNC 批准的基因符号：CHTF18

细胞遗传学定位：16p13.3 基因组坐标（GRCh38）：16:788,619-798,073（来自 NCBI）

▼ 说明

CHTF18、CHTF8（613202）和 DCC1（DSCC1; 613203）是替代复制因子 C（RFC）（参见 600404）复合物的组成部分，该复合物在细胞周期的 S 期将 PCNA（176740）加载到 DNA 上（Merkle 等人，2003 年；Bermudez 等人，2003 年）。

▼ 克隆和表达

Ohta 等人通过液相色谱和串联质谱鉴定与 PCNA 相互作用的蛋白质，然后对 HeLa 细胞 cDNA 文库进行 PCR（2002）克隆了 CHTF18，他们将其称为 CHL12。

Merkle 等人通过在人类数据库中搜索与酿酒酵母 Ctf18 相似的序列（2003）鉴定出人类 CHTF18。推导的蛋白质的计算分子量为 110 kD。它具有 N 端核定位信号，随后是富含脯氨酸的结构域、具有 NTP 结合基序的 NTPase 结构域、中央 RFC 保守结构域、锚蛋白（参见 106410）重复结构域和 2 个 C 端亮氨酸拉链基序。在S期同步T24膀胱癌细胞中CHTF18和DCC1的表达增加。免疫组织化学分析显示，CHTF18、CHTF8 和 DCC1 以弥漫性方式定位于核异染色质，并且在核仁中含量较少。SDS/PAGE分析检测到CHTF18的表观分子量约为110 kD。

贝尔穆德斯等人（2003）确定 CHTF18 蛋白含有 975 个氨基酸，计算分子量为 107 kD。

▼ 基因功能

Ohta 等人（2002）发现人类 CHL12 是与固定化重组 PCNA 相互作用的 20 多种核蛋白和细胞质蛋白之一。亲和层析、共表达和免疫沉淀分析表明，CHL12 不直接与 PCNA 相互作用，而是与 RFC2（600404）、RFC3（600405）、RFC4（102577）和 RFC5（600407）形成五聚体复合物，并且该复合物与 PCNA 结合。

通过免疫共沉淀分析，Merkle 等人（2003）发现 CHTF18、CHTF8 和 DCC1 彼此关联并与 RFC3（p38）亚基关联，表明这些蛋白质可能作为钳装载复合物发挥作用。CHTF18、CHTF8 和 DCC1 也选择性结合 PCNA。

Bermudez 等人通过免疫沉淀与人类 293T 细胞中带有表位标记的 CTF18 相关的蛋白质（2003）确定CTF18是7亚基内聚-RFC复合物的组成部分，他们将其称为CTF18-RFC。该复合物还包含化学计量的 DCC1、CTF8（CHTF8）和 RFC2-5 亚基。这 7 个亚基还组装成 CTF18、RFC2-5 和 DCC1-CTF8 二聚体的 5 亚基复合物。体外翻译组件的组装表明，CTF8 结合 5 亚基复合物中的 CTF18，而不是单独的 CTF18，并且 DCC1 的添加稳定了完整的 7 亚基 CTF18-RFC 复合物。5 和 7 亚基 CTF18-RFC 复合物均表现出较弱的 DNA 依赖性 ATP 酶活性，该活性受到引物单链 DNA 的刺激。ssDNA 依赖性 ATP 酶活性的最大刺激需要添加 RPA（参见 179837）和 PCNA。7 亚基和 5 亚基 CTF18-RFC 复合物均将 PCNA 加载到引物和带缺口的环状 DNA 上，但不加载到单链环状 DNA 或单切口环状 DNA 上。CTF18-RFC 还释放了 PCNA，并以 ATP 依赖性方式预加载到 DNA 上。两种 CTF18-RFC 复合物均支持 PCNA 依赖性 DNA 聚合酶 δ（参见 174761）催化的单引物 DNA 延伸。CTF18 亚基还显示出与粘连蛋白亚基 SMC1（参见 300040）和 SCC1（RAD21；606462）的弱相互作用。贝尔穆德斯等人（2003）得出的结论是，CTF18-RFC 复合体起到 PCNA 钳加载器的作用，并且可能将姐妹染色单体的内聚力与 DNA 复制联系起来。CTF18-RFC 还释放了 PCNA，并以 ATP 依赖性方式预加载到 DNA 上。两种 CTF18-RFC 复合物均支持 PCNA 依赖性 DNA 聚合酶 δ（参见 174761）催化的单引物 DNA 延伸。CTF18 亚基还显示出与粘连蛋白亚基 SMC1（参见 300040）和 SCC1（RAD21；606462）的弱相互作用。贝尔穆德斯等人（2003）得出的结论是，CTF18-RFC 复合体起到 PCNA 钳加载器的作用，并且可能将姐妹染色单体的内聚力与 DNA 复制联系起来。CTF18-RFC 还释放了 PCNA，并以 ATP 依赖性方式预加载到 DNA 上。两种 CTF18-RFC 复合物均支持 PCNA 依赖性 DNA 聚合酶 δ（参见 174761）催化的单引物 DNA 延伸。CTF18 亚基还显示出与粘连蛋白亚基 SMC1（参见 300040）和 SCC1（RAD21；606462）的弱相互作用。贝尔穆德斯等人（2003）得出的结论是，CTF18-RFC 复合体起到 PCNA 钳加载器的作用，并且可能将姐妹染色单体的内聚力与 DNA 复制联系起来。

通过单分子分析，Terret 等人（2009）证明 RFC-CTF18 夹钳加载器控制人类细胞中复制叉的速度间隔和重新启动活动，并且是粘连蛋白 SMC3 亚基（606062）的稳健乙酰化和姐妹染色单体凝聚所必需的。出乎意料的是，特雷特等人（2009）发现粘连蛋白乙酰化本身是叉持续性的核心决定因素，因为在缺乏 Eco1 相关乙酰转移酶 ESCO1（609674）或 ESCO2（609353）的细胞中发现了缓慢移动的复制叉（包括源自 Roberts 综合征（268300）患者的细胞，其中 ESCO2 是双等位基因突变的），以及在表达无法被复制的 SMC3 形式的细胞中。乙酰化。这种缺陷是粘连蛋白与 2 个调节辅助因子超稳定相互作用的结果，WAPL（610754）和 PDS5A（613200）；去除任一辅因子都可以在没有 ESCO1、ESCO2 或 RFC-CTF18 的情况下使分叉快速进展。特雷特等人（2009）得出的结论是，他们的结果显示了一种钳加载器依赖性叉进展的新机制，该机制是由粘连蛋白环的翻译后修饰和结构重塑介导的。这种调节机制的丧失会导致 DNA 损伤的自发累积，并可能导致罗伯茨综合征粘连病的异常。

▼ Mapping

Hartz（2009）根据 CHTF18 序列（GenBank BC006437）与基因组序列（GRCh37）的比对，将 CHTF18 基因对应到染色体 16p13.3。