甲状腺髓样癌

RET原癌基因是受体酪氨酸激酶之一，是一种为细胞生长和分化传递信号的细胞表面分子。通过经典的转染测定将RET基因定义为癌基因。RET可通过细胞遗传学重排在体内和体外进行致癌激活（Grieco等，1990）。RET基因的突变与多发性内分泌肿瘤，IIA型（MEN2A; 171400），多发性内分泌肿瘤，IIB型（MEN2B; 162300），Hirschsprung病（HSCR;神经节性巨结肠; 142623）和甲状腺髓样癌（MTC; 155240）。

Plaza-Menacho等（2006）审查了遗传和分子机制，这些遗传和分子机制是涉及RET功能障碍的不同遗传性神经rest相关疾病的基础。

细胞遗传学位置：10q11.21
基因座标（GRCh38）：10：43,077,068-43,130,350

▼ 克隆和表达
------
高桥等（1985）在经典的NIH-3T3转化试验中将RET克隆为嵌合癌基因。高桥等（1988）从人单核细胞白血病细胞系克隆了RET原癌基因cDNA。缺乏聚腺苷酸化信号表明mRNA进一步延伸了3-prime。cDNA编码一个推定的860个氨基酸蛋白质，具有2个潜在的跨膜结构域，该结构域将蛋白质分成3个结构域：N末端胞质结构域，富含半胱氨酸的胞外结构域和C末端胞质酪氨酸激酶结构域。RET还具有9个N-糖基化位点。RET的转化形式具有原癌基因的N端截短，并且原癌基因的最后51个C端氨基酸（包括2个酪氨酸残基）被9个不相关的氨基酸取代。人单核细胞白血病细胞系的Northern印迹分析检测到3.9、4.5、6.0和7.0 kb的RET mRNA。正常小鼠组织的Northern印迹分析检测到主要4。

RET剪接变体包含RET基因的前19个外显子，其后是独特的3-prime末端。这些变体产生3种蛋白质同工型，在其C末端分别具有9（RET9），51（RET51）或43（RET43）个不同的氨基酸。所有三种人同工型中的最终共同氨基酸为tyr1062，其在RET激活后被磷酸化。卡特等（2001）指出，这三种同工型在肾脏和神经c衍生细胞的发育中具有不同的作用。他们比较了脊椎动物中的三种同工型，发现RET9和RET51是高度保守的，而RET43甚至在小鼠和人类之间都表现出更高的差异。

▼ 基因功能
------
Iwashita等（1996）等人将5个HSCR突变引入人RET cDNA的胞外域。在有或没有MEN2A突变的情况下引入了这些突变（cys634至arg；164761.0011）。RET胞外域的5个突变抑制了RET蛋白向质膜的转运。胞外域RET突变与MEN2A突变一起引入导致MEN2A-RET的转化活性显着降低，为此需要细胞表面表达。Iwashita等（1996）证明了具有5个HSCR细胞外结构域RET突变的细胞表面表达较低。作者得出结论，神经节向结肠的远端部分迁移或完全分化需要细胞表面足够水平的RET表达。

Pelet等（1998年）通过将7种HSCR相关的错义突变引入114个氨基酸的野生型RET同种型（RET51）或RET51的组成型激活形式（RET-MEN2A），研究了其对RET功能的影响。Pelet等（1998）报道了1种影响胞外钙粘蛋白结构域的突变（arg231对应于他; R231H）和2个位于酪氨酸激酶结构域的突变（如lys907对应于glu，K907E; glu921对应于lys，E921K）在RET-MEN2A中进行了生物活性检测。培养的成纤维细胞和嗜铬细胞瘤细胞。但是，导致RET失活的机制不同，因为带有R231H细胞外突变的受体导致细胞表面缺少RET蛋白，而位于催化域内的E921K突变则取消了其酶促活性。相比之下，对应到胞质内结构域的3个突变既不改变RET-MEN2A的转化能力，也不刺激RET在非配体依赖性系统中的催化活性（ser767为arg，pro1039为leu，met1064为thr）。最后，cys609到trp的HSCR突变对RET产生双重作用，因为它导致细胞表面受体的减少，并且由于形成二硫键连接的同型二聚体而将RET51转化为组成型活化的激酶。数据表明，HSCR中RET位点的等位基因异质性与导致RET功能障碍的各种分子机制有关。

Attie-Bitach等（1998）报道了人类胚胎早期发育过程中23到42天之间RET表达模式的原位杂交研究。他们表明，RET基因在发育中的肾脏（肾管，中肾小管和输尿管芽），发育中的肠道神经系统的推测性肠成神经细胞，颅神经节（VII + VIII，IX和X）和推定的脊髓运动神经元。然而，尽管在肾脏和发育中的中枢神经系统的运动神经元中RET基因表达水平很高，但在Hirschsprung病患者中仅报道了罕见的具有肾发育不全的病例，并且未显示出脊髓受累的临床证据。携带RET种系突变（即多发性内分泌肿瘤综合征和Hirschsprung病）的患者。

几乎有1％的人类婴儿出生时患有泌尿生殖系统异常，其中许多涉及远端输尿管和膀胱之间的不规则连接。在发育过程中，输尿管从最初的沃尔夫管中的整合位点迁移到膀胱的底部，此过程由Batourina等人提到（2002）作为输尿管成熟。Rara（180240）和Rarb2基因的双空基因敲除小鼠会出现尿路异常，包括肾发育不全，输尿管远端位置不正确，肾积水和大输尿管（Mendelsohn et al。，1994）。Batourina等（2001年）研究表明，双突变小鼠的肾发育不全是由分支形态发生受损引起的，维生素A通常通过受体酪氨酸激酶RET调节分支形态发生，Schuchardt等人（1994）发现是输尿管芽生长和分支所必需的。Batourina等（2002年）表明输尿管的成熟取决于“三角楔”的形成，这是从沃尔夫夫管基部上皮向外生长的结果，在双突变小鼠和Ret-/-小鼠中发现的输尿管远端异常可能是由此过程失败。Batourina等人的研究（2001）和Batourina等（2002年） 指出三角楔形的形成对于将输尿管远端正确插入膀胱可能是必不可少的，并且这些事件是由维生素A和Ret信号通路介导的。

Salvatore等（2000年）指出，致癌突变引起RET激酶功能的组成性激活，进而导致RET酪氨酸残基的自磷酸化对于信号传导至关重要。体外激酶测定以前已经揭示了6个假定的RET自磷酸化位点。Salvatore等（2000年）在RET和RET致癌基因的体内信号转导中，我们评估了2个残基酪氨酸1015和1062（Y1015和Y1062）的磷酸化。使用磷酸化的RET特异性抗体，他们证明Y1015和Y1062都在RET触发配体后迅速被磷酸化。无论潜在激活突变的性质如何，Y1015和Y1062的伴随磷酸化都是各种致癌RET产品（MEN2A，MEN2B和PTC）的共同特征。

Carrasquillo等（2002年）指出，尽管已经鉴定出了8个具有可能与Hirschsprung疾病相关的突变的基因，但单个基因座的突变既不是引起临床疾病的必要条件，也不是引起临床疾病的充分方法。他们使用2,083个微卫星和SNPs和一种新的多点连锁不平衡方法对43个门诺族家庭三人（父母和受影响的孩子）进行了全基因组关联研究，以寻找由共同祖先引起的关联。他们确定了10q11、13q22和16q23的易感基因座。他们发现13q22的基因是EDNRB（131244），而10q11处的基因是RET。RET和EDNRB等位基因在受影响个体中的统计学显着联合遗传以及Ret null和Ednrb亚同形花斑等位基因之间的小鼠交配中的神经节病不互补，提示EDNRB和RET之间存在上位性。因此，RET和EDNRB突变之间的遗传相互作用是这种复杂疾病的潜在机制。

Japon等（2002）在人垂体前叶中发现了GDNF（600837），GFRA1（601496）以及RET mRNA和蛋白表达。垂体前叶的双重免疫组织化学分析显示，在超过95％的植物营养型中，GDNF的免疫反应性较小，而在皮质营养动物中的GDNF免疫反应性较小（20％）。在其余的细胞类型中几乎没有。同样，尽管超过95％的体细胞营养素被RET染色，但在其他细胞类型中未检测到阳性免疫染色。此外，他们在各种激素表型的人垂体腺瘤中寻找GDNF和RET。他们在所有GH中都发现了针对RET的强阳性免疫染色（139250）分泌的腺瘤以及50％的产生ACTH的腺瘤中进行了筛查。他们在所有分泌GH的腺瘤和10％的促肾上腺皮质瘤中发现了GDNF的阳性免疫染色。最后，他们在90％的促生长激素瘤和50％的促肾上腺皮质瘤以及8个泌乳素瘤中的1个和13个非功能性腺瘤中发现了针对GFRA1的强阳性免疫染色。作者的结论是，RET在所有生长激素和50％发生ACTH的肿瘤中的表达都暗示GDNF和RET可能与垂体肿瘤的发病有关。

使用基因表达谱，Iwashita等（2003）确定相对于全胎儿RNA，与大肠神经病相关的基因在大鼠肠道神经rest干细胞中高度上调。表达最高的基因是GDNF，SOX10（602229），GFRA1和EDNRB。在RET中观察到最高的表达，这被发现对于肠道神经c干细胞迁移是必需的。GDNF促进了神经rest干细胞在培养物中的迁移，但不影响其存活或增殖。Iwashita等人的观察（2003）通过定量RT-PCR，流式细胞仪和功能分析得到证实。

波尔多等（2000）发现RET在人胚胎成纤维细胞和大鼠嗅觉神经母细胞细胞系中的表达诱导细胞凋亡。RET的配体GDNF抑制了它的促凋亡作用。RET通过胱天蛋白酶对其自身的裂解而诱导凋亡，这种现象允许RET的凋亡域释放或暴露。五个与Hirschsprung相关的RET突变将RET转化为凋亡的组成型诱导剂，而与是否存在GDNF无关。

Melillo等（2001）提供了证据，FRS2（607743）在正常的生物学条件和病理条件下，例如多发性内分泌肿瘤和甲状腺乳头状癌（PTC），将配体调节形式和RET9致癌形式与MAP激酶信号级联偶联。）。

Kjaer和Ibanez（2003）研究了导致Hirschsprung疾病的RET细胞外结构域（RET（ECD））中一系列错义突变的加工和功能。检查的所有突变均阻止了内质网中RET（ECD）的成熟，并取消了其与GDNF / GFRA1配体复合物相互作用的能力（请参阅601496），表明蛋白质折叠中存在缺陷。未成熟形式的RET（ECD）积累在细胞内与内质网伴侣蛋白GRP78 / BIP（HSPA5; 138120），并显示不同程度的蛋白质泛素化。RET（ECD）突变体的成熟可以通过允许蛋白质在30摄氏度下进行表达来挽救，这是一种已知的促进蛋白质折叠的条件。RET（ECD）中自主折叠亚基的分析表明，内在的倾向是在3个N端钙粘蛋白样结构域CLD1-3中发生错误折叠。这些亚域的表达和成熟度在30摄氏度下得到了特别的改善，从而确定它们是RET（ECD）中对温度敏感的决定因素。

Schuetz等（2004）指出Ret9参与肾脏和肠神经系统发育，但不参与Ret51。使用带有MDCK犬肾细胞的3D体外肾小管生成试验，他们显示Ret9而非Ret51诱导上皮小管形成，而Shank3（606230）对于Ret9信号传导至关重要。酵母2杂交和共免疫沉淀分析表明，小鼠Shank3的PDZ结构域与Ret9的胞质结构域相互作用。Shank3没有与Ret51进行交互。Shank3富含脯氨酸的区域与衔接蛋白Grb2（108355）相互作用，而这种相互作用是持续ERK / MAPK（参见176948）和PI3K（参见171834）所必需的）是Ret9下游的信号，对于肾小管生成至关重要。

进化序列保守性是识别非编码调控序列的公认标准。Fisher等（2006年）在斑马鱼中使用了基于转座子的转基因检测方法，以评估斑马鱼视网膜位点（硬骨鱼中保守）和人类RET位点（哺乳动物中保守）中的非编码序列。大多数硬骨鱼序列指导视网膜特异性报告基因的表达，其中许多显示出重叠的调节控制。大多数人类RET非编码序列还指导斑马鱼的视网膜特异性表达。Fisher等（2006年）得出的结论是，可能存在大量的功能序列信息，而这些信息不会被序列相似性方法检测到。

Veiga-Fernandes等（2007年）表明，肠道中的造血细胞在聚集到与淋巴相关的淋巴组织的主要组成部分的淋巴集结的原基中之前表现出随机的运动模式。他们进一步表明，表达淋巴毒素的造血种群在派伊尔斑块的形成中具有重要作用。这些细胞的一部分表达受体酪氨酸激酶RET，这对哺乳动物肠神经系统的形成至关重要。Veiga-Fernandes等（2007年）证明了RET信号对于Peyer斑块的形成也至关重要。功能基因分析表明GFRA3（605710）缺乏会导致Peyer斑块发育受损，这表明信号传导轴为RET / GFRA3 / ARTN（603886）参与此过程。为了支持这一假设，作者表明，RET配体ARTN是肠道造血细胞的强引诱剂，诱导了异位Peyer斑状结构的形成。Veiga-Fernandes等（2007）提出，RET信号通路通过调节肠道神经和淋巴系统的发育，在协调肠道器官发生的分子机制中起关键作用。

Fusco等（2010）证明胶质细胞源性神经营养因子（GDNF; 600837）和NGF（162030）激活RET51会触发RET51- FKBP52（600611）复合物的形成。RET51中的酪氨酸905取代是GDNF和NGF磷酸化的关键残基，破坏了RET51-FKBP52复合物。NGF和GDNF在表达RET51和FKBP52的多巴胺能神经元中具有功能性作用。为了阐明RET51-FKBP52复合物在多巴胺能神经元中的作用，Fusco等人（2010）在30位帕金森病患者中筛选了这两个基因（PD; 168600），其中多巴胺能神经元选择性丢失。在1名患有早发性PD的个体中，作者发现了每个基因的杂合突变，这些突变合在一起足以破坏RET51-FKBP52复合体。

Fonseca-Pereira等（2014年）表明，神经营养因子受体RET驱动造血干细胞（HSC）的存活，扩增和功能。作者发现，HSC表达RET，并且其神经营养因子伴侣在HSC环境中产生。小鼠中Ret的消融会导致生存受损，HSC数量减少，具有正常的分化潜能，但丧失细胞自主应激反应和重建潜能。令人惊讶的是，RET信号在p38 MAP激酶（MAPK14; 600289）和CREB（123810）的下游为HSC提供了关键的BCL2（151430）和BCL2L1（600039）存活线索。）激活。因此，RET下游靶标BCL2或BCL2L1的强制表达足以在体内恢复RET-null祖细胞的活性。RET的激活可改善HSC的存活，扩增和体内移植效率。神经营养因子也改善了人类脐带血祖细胞的扩增和移植，为探索人类HSC移植中的RET激动剂开辟了道路。Fonseca-Pereira等（2014年）得出的结论是，他们的工作表明神经营养因子是HSC微环境的新组成部分，表明造血干细胞和神经元受到类似信号的调节。

▼ 基因结构
------
Pasini等（1995）在粘粒的毗连群中克隆了整个RET基因组序列，并相对于基于8个核酸内切酶的详细限制性图谱确定了RET基因的20个外显子的位置。在内含子5中鉴定出高度多态的CA重复序列。该基因的估计大小为55 kb。内含子1约占24 kb，而外显子2至20包含在31 kb的区域内。一个较大的第一内含子的整体基因结构，其小外显子散布在5-prime的一半处，而更多聚集在3-prime的一半，让人想起了PDGFRB（173410）和KIT（164920），也编码酪氨酸激酶受体的基因。在基因组的10q11.2或其他位置未发现RET相关基因或RET假基因的证据。他们可以证明RET基因在10q11.2上的方向是5素着丝粒/ 3素端粒。

▼ 测绘
------
通过荧光原位杂交，Ishizaka等（1989年）将RET癌基因分配给10q11.2。由于位置的缘故，他们建议这可能是IIA型多发性内分泌肿瘤的候选基因。Lairmore等（1993年）开发了一个1.5 Mb YAC重叠群，其中包含3个与MEN2A基因座紧密相连的基因座。重叠群的方向和3个标记的顺序为cen--RET--D10S94--D10S102--tel。严重的交叉事件将MEN2A基因座定心于D10S102。Lairmore等（1993）指出，MEN2A与D10S94或RET之间没有重组事件的报道。Mulligan等（1993）和Donis-Keller等（1993） 证实了与MEN2A和甲状腺髓样癌相关的RET致癌基因突变。

▼ 分子遗传学
------
巨sch病

Attie等（1995年）通过变性梯度凝胶电泳和SSCP结合研究了RET基因的20个外显子在45例散发性病例和35例家族性Hirschsprung病中的发生（HSCR；142623）。他们发现，在50％的家族性HSCR中，RET基因的突变与神经节段的长度无关。男性（72％）的家族性HSCR中突变等位基因的平均外显率显着高于女性（51％）。RET基因座的突变沿基因的长度分布，并占该系列散发性HSCR病例的至少三分之一。在偶发病例（16/45）中鉴定出的突变中，有7种被证明是从头突变。总之，突变基因的低渗透性，缺乏基因型/表型相关性，RET突变的性别依赖性效应以及疾病的可变临床表达支持家族性HSCR中一个或多个修饰基因的存在。

Angrist等（1995年）通过PCR分析了80个HSCR先证者中的RET基因，发现了8个推定的突变。

Seri等人使用为RET基因的所有20个外显子建立的SSCP分析方法（1997年）在39例Hirschsprung疾病的散发性和家族性病例中发现了7个其他突变（检出率18％）。他们认为，遗传异质性不能解释Hirschsprung患者中RET突变检测效率相对较低的情况，而迄今为止，谱系中的连锁分析结果并未支持这一点。他们的系列以及其他患者系列中几乎74％的点突变是在长段患者中发现的，这些患者仅占患者总数的25％。Seri等（1997）在患有完全性结肠神经节病的患者中发现了C620R替代；在甲状腺髓样癌中发现了相同的突变。R313Q突变（164761.0026）在纯血统的血缘父母的孩子中被鉴定出，并且与最严重的Hirschsprung表型有关，即总肠结肠神经节病伴小肠受累。

朱莉斯等（2001年）研究了来自南非不同人群的40例HSCR患者。通过异源双链SSCP分析对RET基因的外显子进行分析，并在8例患者（20％）中鉴定出6种潜在的疾病相关突变。其中五个突变是新颖的。在黑人患者组中未检测到突变，这是由于研究的患者人数少（9）和筛查方法或其他遗传基础的局限性所致。

Bolk Gabriel等（2002年）审查了证据是RET是参与HSCR的主要基因：仅报道了1个与RET无关的受影响家庭。编码序列突变发生在50％的家族性和15％至35％的散发性病例中；即使主要的突变发生在EDNRB中，RET变体也对易感性有所贡献。纯合的Ret-null小鼠具有完全孤立于性别的神经节病外显率。然而，RET突变显然不足以导致神经节病，因为突变等位基因的渗透率在男性中为65％，在女性中为45％。RET是HSCR的主要基因，主要存在于长片段HSCR丰富的家族中。为了确定对更常见的短片段S-HSCR的复杂遗传至关重要的基因，Bolk Gabriel等（2002年）进行了具有S-HSCR家族的基因组筛选，并鉴定了3p21（HSCR6; 606874），10q11和19q12（HSCR7; 606875）的易感基因座），这似乎足以解释复发风险和人群发生率。10q11处的基因似乎是RET，支持其在所有形式的HSCR中的关键作用。然而，只有40％的链接家族存在编码序列突变，这表明RET中非编码变异的重要性。因此，他们证明了S-HSCR的寡聚遗传。3p21和19q12位点是RET敏感性的修饰因子。他们还证明了在RET基因座的原产地效应。先前描述的多重家族在母系中显示出比预期更大的HSCR遗传。在Bolk Gabriel等人研究的49个家庭中（2002年），有27位在RET共享1个等位基因（IBD）相同的等位基因 他们希望观察到共享的等位基因将由父母双方均等地遗传，但他们观察到有21位母亲和6位父亲遗传。这种效应不是特定于性别的，而是真正的起源父母效应，因为在具有1个等位基因IBD的27个核心家庭中，有29位受影响的男性和25位受影响的女性。对3p21和19q12处的隔离进行的分析表明，没有母本效应。

Fitze等（2003年）使用双荧光素酶测定来评估在80例HSCR患者中鉴定出的不同RET启动子单倍型的活性。从转录起始位点开始的2个RET启动子多态性-5G-A和-1C-A的变异与HSCR相关。-5G-A多态性与135G-A多态性处于强连锁不平衡状态（164761.0038）。与大多数HSC相关的单体型相比，与HSCR相关的启动子单体型-5A / -1C具有明显较低的表达。Fitze等（2003年）建议在HSCR的病因中包含-5A启动子变异的RET单倍型的作用。

Garcia-Barcelo等（2005年）发现172名中国散发性HSCR患者中，与HSCR相关的RET启动子SNPs -5G-A和-1C-A与主要编码区RET单倍型存在连锁不平衡。他们确定启动子SNP与预测的顺式TITF1（600635）结合位点重叠。RET启动子SNPs的功能分析表明，与HSCR相关的等位基因降低了RET转录。TITF1表达激活了RET启动子的转录，而TITF1激活的RET转录被HSCR相关的SNP减少了。

Burzynski等（2004年）在117例荷兰散发性HSCR患者中，在RET基因内侧接了13个标记，其中64例已经过RET突变筛查并发现阴性，及其父母也是如此。RET和HSCR的5个主要区域中的6个标记之间有很强的关联，这些标记的传输明显失真。该6标记单倍型的纯合子发生HSCR的风险大大增加（或大于20）。Burzynski等（2004年）得出结论，即使未发现RET突变，RET也可能在HSCR中起关键作用，并且与疾病相关的变异很可能位于RET基因的启动子区域和外显子2之间。

在多达50％的HSCR家族病例中发现RET突变。对于更常见的HSCR散发形式，在不超过20％的患者中发现了RET编码突变。但是，几项研究表明，几乎所有家族性病例的RET基因位点均与该疾病相关，无论其突变状态如何，而且在大部分无RET编码突变的散发性HSCR患者中，RET基因座也与HSCR相关。在欧洲几个患有HSCR的人群中，RET位点的5个主要区域也发现了相似的单倍型（Borrego等，2003）。Burzynski等（2004年）研究人员发现，有6个SNP的单倍型可以遗传给55.6％的HSCR患者，而仅存在于对照组的16.2％。在具有该单倍型的患者中，两条染色体上均具有该单倍型的患者，与单倍型杂合发生时相比，导致发生HSCR的风险要高得多。为了更精确地定义HSCR相关区域并确定候选疾病相关变体，Burzynski等人（2005年）从患者RET基因上游10 kb到内含子1和外显子2（总共33 kb）对共有风险单倍型纯合的患者和在对照个体纯合的最常见非风险单倍型中测序共享的普通单倍型区域。这些序列的比较表明86个序列差异。在这86个变体中，有8个被证明位于不同脊椎动物之间高度保守的区域中，且位于推定的转录因子结合位点内。随后对这8个变体进行基因分型，揭示了8个标记中的6个与疾病的强烈关联。这6个标记也显示了等位基因传递中最大的失真。种间比较显示，这6个变异中只有1个位于非哺乳动物物种也保守的区域，这使其成为最有可能与HSCR相关的候选变异。

Ruiz-Ferrer等（2006年）筛选了106名西班牙人Hirschsprung病患者的RET编码区。对有和没有RET种系突变的散发患者进行RET单倍型分布的统计比较。鉴定出9个新种系突变和1个先前描述的突变。当比较无突变的赫斯基氏病三联体的遗传等位基因与未遗传等位基因时，可检测到显着的赫斯基氏病-200A / -196C启动子单倍型过度遗传（Fernandez等，2005）。但是，在一组突变的家族中未发现等位基因传递的畸变。Ruiz-Ferrer等（2006年）结论是他们的结果与复杂的继承遗传模型相一致；这些发现加在一起似乎表明，低外显突变是产生表型所必需的，但不足以产生这种突变，而且赫希斯普林氏病单倍型的额外存在可能有助于该疾病的表现。

Emison等（2005年）使用基于家庭的关联研究来确定疾病间隔，并将其与比较基因组和功能基因组分析相结合，以优先考虑可在RET中寻求突变的保守和功能元件。Emison等（2005）表明内含子1（IVS1C-T; 164761.0050）的一个保守的增强子样序列内常见的非编码RET变异与HSCR易感性显着相关，并且对风险的贡献比稀有等位基因高20倍。该突变显着降低了体外增强子的活性，具有较低的渗透性，并且在雄性和雌性中具有不同的遗传效应，并解释了HSCR复杂遗传模式的几个特征。因此，Emison等（2005年）得出的结论是，通过关联研究确定的常见低渗透性变异可能是常见和罕见疾病的基础。Emison等（2005年）得出结论，在所有HSCR病例中，RET突变（编码和/或非编码）可能都是必需的特征。但是，RET突变不足以治疗HSCR，因为疾病的发病率也需要在其他位点进行突变。

Emison等（2010）研究了882名患有Hirschsprung疾病的先证者和来自美国，欧洲和中国家庭的1478​​名一级亲属，并在欧洲和中国患者中复制了他们先前发现的常见的非编码增强子突变rs2435357（164761.0050）。在这项研究中，发现罕见突变和常见突变，无论是单独发生还是共同发生，都可能导致HSCR发生。RET变异在不同的HSCR患者中的分布提示了“细胞隐性”遗传模型，其中两个RET等位基因的功能均受到损害。

苗等（2010）检查了启动子和CT（rs2435357）中3个调节性SNP（-5G-A（rs10900296）和-1A-C（rs10900297）的作用）内含子1）使用实时定量PCR检测67个人神经节肠组织中RET基因的表达。他们还通过PCR和直接测序对315名中国HSCR患者和325名种族匹配的对照进行了3个SNP的基因分型。RET mRNA在人肠道组织中的表达与个体的基因型相关。对于3个风险等位基因（ACT / ACT）纯合的那些个体，发现最低的RET表达，而对于“野生型”对应物（GAC / GAC），纯合的那些个体的RET表达最高。与野生型对应GAC相比，等位基因-5A，-1C和IVS1T与HSCR相关，涵盖3个相关等位基因（ACT）的单倍型也与HSCR相关。

中枢换气综合症

Bolk等（1996年）指出，患有先天性中央通气不足综合征（CCHS；209880）的儿童中有16％患有赫氏弹簧病。因为在大隐身病中发现了RET突变，所以Bolk等人（1996年）使用SSCP分析研究了14例CCHS患者的RET基因突变。RET基因中所有检测到的核苷酸变化均归类为多态性变体。另一方面，Amiel等（1998年）在7名患有CCHS的儿童中，有1名发现RET基因发生突变。

De Pontual等（2006）对143位CCHS患者和30位Mowat-Wilson综合征（MWS; 235730）患者的RET基因座进行了基因分型，这些患者分别已知在PHOX2B基因（603851）或ZFHX1B基因（ZEB2; 605802）中具有突变。。CCHS患者的HSCR的比值比为非综合征性HSCR易感性RET单倍型（ATA）（包括Emison等人报道的内含子1等位基因）是杂合的（2005）分别为2.39和4.74；有PHOX2B丙氨酸扩增且无易感RET单倍型的16例患者也有HSCR。在有和没有HSCR的MWS患者之间未观察到SNP分布的显着差异。De Pontual等（2006年） 得出的结论是，既有RET依赖型，又有RET无关的HSCR病例，并建议至少还涉及1个修饰基因。

多发性内分泌肿瘤，II型

Shirahama等（1998）通过筛查71例甲状腺癌患者的RET基因，调查了日本患者的RET突变谱。他们在研究的34名MEN2A患者中的33名和6个FMTC家庭中的5个中发现了突变。在4例MEN2B患者和22例散发性甲状腺髓样癌患者中有2例发现了met918 -thr突变（164761.0013）。在所研究的22个散发病例中，共发现5个种系突变，其中4个是从头突变。作者评论说，散发性甲状腺髓样癌患者中生殖系突变的高频率对任何患有这种恶性肿瘤的患者的家庭成员的临床管理具有重要意义。

黄等（2000年）和科赫等（2001年）确定了与MEN2相关的肿瘤的发展涉及的2次重击机制：三体10与突变RET等位基因的重复和野生型RET等位基因的丢失。但是，一些与MEN2相关的肿瘤并未显示任何机制。黄等（2003年）为了研究肿瘤发生的其他机制，研究人员对TT细胞系进行了研究，该细胞系来自MEN2相关的甲状腺髓样癌，伴有RET种系突变，密码子为634。尽管他们在该细胞系的基因组DNA水平上观察到突变型和野生型RET之间的比例为2：1，但FISH分析并未显示10号三体性或正常染色体10号的丢失。突变体RET。在进一步的研究中，Huang等人（2003）首次证明该细胞系中的10号基因组染色体异常导致突变RET mRNA的产生增加。作者得出的结论是，这些发现为第三个第二击机制提供了证据，该机制导致了与MEN2相关的肿瘤中突变RET的过度表达和过度表达。

家族性甲状腺髓样癌

Elisei等（2007）在807名受试者中筛查了RET，其中481名患有偶发性MTC，37名具有MEN2临床证据，以及289名亲属。从所有受试者的血液中提取基因组DNA，并在PCR后通过直接测序分析外显子10、11、13、14、15和16。作者出乎意料地发现了481名明显散发性MTC患者中的35名（7.3％）生殖系RET突变。在37名有遗传性甲状腺髓样癌的临床证据中，有36名患者还发现了生殖系RET突变。共有34例FMTC（占所有FMTC的75.5％）以明显的散发性MTC到达，没有其他MTC病例的家族史。根据基因筛选和临床数据，Elisei等（2007年）对他们的72个家庭进行了如下分类：45个FMTC（62.5％），22个MEN2A（30.5％）和5个MEN2B（7％）。

Elisei等（2008年）研究了100例散发的MTC患者，平均随访时间为10.2年。分析了RET基因外显子10和11以及13至16。评估是否存在体细胞RET突变，临床/病理特征和MTC患者预后之间的相关性。在100个散发的MTC中，有43个（43％）发现了体细胞RET突变。最常见的突变（43中的34，占79％）是M918T（164761.0013）。RET突变在较大的肿瘤中更常见（P = 0.03），在有淋巴结转移和远处转移的MTC中（P分别小于0.0001和P = 0.02）；因此，发现与诊断的晚期阶段存在显着相关性（P = 0.004）。较差的结果也与体细胞RET突变的存在显着相关（P = 0.002）。在所有发现的与预后不良相关的预后因素中，在多变量分析中，只有诊断的晚期阶段和RET突变的存在才显示出孤立的相关性（分别小于0.0001和P = 0.01）。最后，MTC患者的生存曲线表明，具有RET突变的患者中，存活患者的百分比显着降低（P = 0.006）。

嗜铬细胞瘤

在48个明显散发的嗜铬细胞瘤中，有5个（171300），Eng等（1995）确定了RET基因中的突变（参见例如164761.0003；164761.0013）。其中，1个被证明是种系突变，2个被证明是体细胞突变。

Neumann等在271例散发性嗜铬细胞瘤无关患者中，有13例（5％）（2002）识别出7个不同的种系突变的RET基因（参见，例如，164761.0003 - 164761.0006 ; 164761.0011 ; 164761.0012 ; 164761.0034）。

McWhinney等（2003年）试图确定RET是否也可能是明显散发性嗜铬细胞瘤的低渗透基因。他们分析了104例嗜铬细胞瘤没有RET，VHL（胚系突变608537），SDHD（602690），或SDHB（185470）在RET A45他们的状态（164761.0038），S836、3个内含子1 SNP（单倍型0）和新型上游插入/缺失变体。嗜铬细胞瘤病例与A45A或S836S无关，但与单倍型0相关（P = 0.032）。但是，与HSCR不同，该嗜铬细胞瘤相关的单倍型0与A45A不相关。作者的结论是，结合增加的5-prime插入/缺失变体数据（P = 0.016），他们的观察结果表明在假定上游区域存在低渗透性嗜铬细胞瘤易感基因座HSCR和明显零星的MTC的基因座。

可能与肾脏异常有关

Skinner等（2008年）在石蜡包埋的组织中，从19例有双侧肾脏发育不全的死胎中，有7例（37％）和10例死胎中的2例（20％），在RET基因中发现了10种不同的杂合突变（参见，例如164761.0053和164761.0054）。胎儿有单侧肾发育不全。两名胎儿有2个RET突变。没有研究父母的DNA。体外功能表达研究表明，突变导致本构性RET磷酸化或缺少磷酸化。Skinner等（2008年）假设功能丧失的影响。胎儿没有Hirschsprung病的证据（142623），MEN2A（171400），MEN2B（162300））或家族性甲状腺髓样癌（155240）。但是，Skinner等（2008）指出，这些情况通常在儿童后期出现临床表现。它们可能已经存在于胎儿中，而没有被标准尸检发现。

杨等（2008年）观察到在加拿大加拿大患有该疾病的患者中，原发性膀胱输尿管反流（VUR;参见193000）与RET基因第11外显子的非同义GA过渡（G691S; rs1799939）之间存在显着关联。在118名与VUR无关的先证者中，有83人发现了罕见的A等位基因；2个受影响的同胞对该变体是纯合的。对照组中A等位基因的频率为0.145，患者中为0.360。G691S取代发生在蛋白质的近膜区域，在哺乳动物中高度保守。在COS-7细胞中进行的体外功能表达研究表明，G691S变体对RET激酶活性没有直接影响，但表明它可以被磷酸化并与75-80kD细胞蛋白相互作用。杨等（2008）假设G691S变体可能导致RET的局部构象变化和磷酸化状态改变。如Skinner等（2008年）观察到RET基因变异与肾脏发育不良之间的关联，VUR可能是该疾病的一种表现。

Jeanpierre等（2011年）确定了105个胎儿中的7个（6.6％）具有严重肾脏发育缺陷导致子宫死亡或终止的RET基因的杂合变异。在未受影响的父亲中也有四个变种。没有进行大多数变体的体外功能研究，但至少有1种可​​能是中性多态性。对另外171例具有肾脏发育缺陷的病例进行的分析表明，与对照组相比，RET变异的发生率显着高于对照组，这表明这些变异可能导致一系列肾脏发育缺陷。但是，Jeanpierre等（2011年）得出结论，RET的遗传改变不是导致肾脏发育不全或肾脏发育缺陷的主要机制。

黄等（2014年）在650个不同的先天性肾脏和泌尿道异常（CAKUT）家族中的3个家族中，鉴定了3个不同的杂合RET错义突变，并筛选了12个已知的导致肾脏疾病的主要致病基因的编码区中的突变。尽管临床细节稀疏，但这些患者的肾表型包括肾发育不全，单侧肾发育不全，膀胱输尿管反流，输尿管盆腔连接阻塞，双收集系统和输尿管膨出。

▼ 基因型/表型的相关性
------
Decker等（1998年）发现在通过MEN2A确诊的44个家庭中，有7个（16％）家庭与Hirschsprung疾病与MEN2A共同分离。之前已经在MEN2A或FMTC中报道了所有7个家族的易感性RET突变，并在外显子10的609、618或620密码子处发生：cys609-to-tyr（164761.0029），cys618-to-ser（164761.0008），cys620- to-arg（164761.0009）和cys620-to-trp（164761.0032）。Borrego等（1999年）研究了西班牙安达卢西亚地区的64名HSCR个体中RET的多态序列变异。对于2个多态变体，A45A（c 135G-A）（164761.0038）和L769L（c 2307T-G），与对照组（p小于0.0006）相比，HSCR病例中的稀有等位基因过多，而G691S（c 2071C-A）和S904S（c 2712C-G）变体的稀有等位基因）在HSCR案例中的代表性不足（p = 0.02）。Borrego等（1999年）得出结论，RET多态性以一种复杂的低渗透性方式易感于HSCR，并可能改变表型表达。

因为外显子11 RET多态性决定了重要的氨基酸变异（G691S），所以Elisei等人（2003）（2004年）在212名受试者中研究了它的频率，这些受试者包括106名散发性MTC患者和106名年龄，性别，种族和地理来源相匹配的正常对照。在46例散发性MTC患者中，他们还研究了8个MEN2家族中60个成员的体细胞RET基因突变与G691S多态性的共分离以及该多态性与RET种系突变的联系。他们发现MTC中G691S多态性的等位基因频率（27.83％）具有统计学意义（P = 0.029），高于正常对照组（18.86％），与3种中性多态性的频率存在差异，这3种中性多态性在患者和对照组中没有差异。

Cebrian等（2005年）证实了先前描述的散发性甲状腺髓样癌与G691S和S904S多态性的关联（对于杂合子：优势比为1.85；范围为1.22-2.82； P = 0.004），并且还发现了与特异性甲状腺相关的新型保护作用。 RET的单倍型，揭示RET癌基因中存在不同的遗传变异，这些变异会增加或降低散发MTC的风险。

Fitze等（1999年）研究人员调查了HSCR患者但无家族史的RET基因编码区密码子45、125、432、691、769、836和904的多态性的基因型分布。该研究涉及来自德国2个不同地区的62名散发性HSCR患者，这些患者来自德累斯顿（37个人）和埃尔兰根（25个人）城市。男女比例为3.8：1。作为对照组，使用匿名献血者（德累斯顿的117个人和埃尔兰根的39个人）。对照人群中所有多态性的等位基因频率与其他人报道的频率相似，这表明在德国，欧洲和美国人群中等位基因频率相似，但该研究未包括不同种族，非白人的数据人口。Fitze等（1999）发现散发性HSCR的2个孤立人群中密码子45多态性（164761.0038）高度相关。

Machens等（2001）将63例遗传性甲状腺髓样癌（MTC; 155240）患者的RET基因型（外显子10、11、13和14 ）与年龄，诊断，性别，TNM系统和基础降钙素水平相关联。外显子10、11、13和14的突变分别以22％（14/63），54％（34/63），21％（13/63）和3％（2/63）表现。诊断时的中位年龄差异显着（分别为38、27、52和62岁）。当按半胱氨酸密码子分组时（第10和11外显子与第13和14外显子），这种差异变得更加明显（30对56岁）。除诊断时的年龄外，未发现其他明显的关联。根据这些数据，Machens等人（2001年）他们根据基因型设计了3个MTC风险组：一个高风险组（密码子634和618），其诊断时的最小年龄分别为3岁和7岁。年龄为12，34岁和42岁的中等风险组（密码子790、620和611）; 以及年龄分别为47岁和60岁的低风险人群（密码子768和804）。诊断时的年龄与每个密码子中特定核苷酸和氨基酸的交换无关。作者得出的结论是，基因型与表型之间存在显着的相关性，从而可以在预防性手术的时间和范围上采取更具个性化的方法。

Niccoli-Sire等（2001年）分析了来自47个仅MTC家族的家庭的148例患者，发现这些家族中59.5％的非半胱氨酸RET突变。在非半胱氨酸突变的索引病例中，43.4％表现为多结节性甲状腺肿和高基础降钙素。他们的诊断年龄比外显子10突变的患者大，并且多灶性MTC多，但在大小，双侧性，C细胞增生的存在或淋巴结转移方面均无差异。具有非半胱氨酸RET突变的基因携带者的MTC发生率比外显子10中具有突变的携带者低（78.2％vs 94.1％）。尽管年龄较大的甲状腺切除者为20.2％，但仅具有C细胞增生。作者得出的结论是，具有非半胱氨酸RET突变的家族性MTC并不罕见，并且在散发的MTC中也存在过多的现象，这表明RET分析应常规地扩展至第13、14外显子。15.表型的​​特征在于疾病的晚期发作，表明C细胞疾病的出现延迟而不是侵袭性较低的形式。在家族性MTC基因携带者中，甲状腺切除术的最佳时机仍存在争议。根据这些数据，他们建议应在降钙素检测异常后尽快进行降钙素基础水平手术。

RET中的种系突变与具有MTC特征的II型多发性内分泌肿瘤和HSCR相关。在前者中，在有限的一组密码子中发现了功能获得突变，而在后者中发现了功能丧失突变。种系RET突变仅与基于人群的一系列分离HSCR的3％有关（Svensson等，1998）。Borrego等（1999，2000）中发现，其包括RET编码SNP，包括外显子2中的SNP A45A该特定单倍型，是紧密联系在一起HSCR相关，而与SNP在密码子836位于外显子14相关联的单倍型用MTC相关联。Borrego等（2003年）在内含子1中描述了3个新的SNP，并且与编码的SNP单倍型一起，数据表明在HSCR和散发的MTC的祖先单倍型存在连锁不平衡的情况下，与推定的易感基因座或基因座有关。数据与SNP A45A上游大约20到30 kb处一个非常古老的低渗透性创建者基因座一致。

Punales等（2003年）观察到广泛的临床表现和甲状腺髓样癌的自然病程，即使在与MEN2A有遗传关系的个体中也是如此。来自12个不同家庭的69个个体显示了634位密码子突变，这是其系列中最普遍的错义突变。他们发现C634Y（164761.0004 49个例，C634R（）164761.0011）在13和C634W（164761.0012在7.中。具有C634R突变的个体在诊断时比具有C634Y或C634W突变的个体表现出远得多的转移（分别为54.5％，19.4％和14.3％，P = 0.03）。通过Kaplan-Meier曲线估计的淋巴结和/或远处转移的累积频率的进一步分析表明，C634Y患者的淋巴结和转移的出现比C634R患者的发生晚（P = 0.001）。作者得出结论，密码子634处的特定核苷酸和氨基酸交换可能对MEN2A综合征的肿瘤侵袭性具有直接影响。

Cote and Gagel（2003）回顾了家族性甲状腺甲状腺甲状腺癌研究中提出的独特策略，这些策略可能有助于管理遗传性癌症。他们根据特定的RET突变，绘制了最早报道的MTC发病年龄。

Kashuk等（2005年）报道了人类RET蛋白序列与12个非人类脊椎动物的直系同源序列的比对，它们的比较分析，RET蛋白的进化拓扑以及对所有已发表的错义突变的预测耐受性。

Machens等（2005）研究了与MEN II相关的嗜铬细胞瘤的密码子特异性，年龄相关的发育。根据他们的研究和其他报告中的数据，他们建议从918、634和630号密码子的RET突变携带者中10岁起筛查嗜铬细胞瘤，在其余年龄中从20岁起筛查嗜铬细胞瘤。

根据对3名V804L（164761.0044）或V804M（见164761.0043）纯合的患者，来自同一人群的6例其他杂合病例以及其他纯合和杂合受试者的分析，Lesueur等（2005年）得出的结论是，密码子804突变的外显率较低，甲状腺髓样癌的发展与第二种系或体细胞突变有关。

▼ 细胞遗传学
------
家族性腺瘤性息肉病（FAP; 175100）是由腺瘤性息肉病大肠杆菌（APC; 611731）基因的种系突变引起的，并且与患甲状腺乳头状癌的风险增加有关。大部分散发性人乳头状甲状腺癌具有RET原癌基因重排。这些重排产生称为RET / PTC的嵌合转化癌基因。参见188550。Cetta等（1998）使用免疫组化和RT-PCR方法分析了2个FAP亲属中甲状腺乳头状癌的RET / PTC激活，均显示出典型的APC基因突变。亲属1有7名受FAP影响的成员，其中3例患有甲状腺乳头状癌。亲属2有2名患者，母亲和女儿，受到结肠息肉病的影响。女儿还患有乳头状癌。Cetta等（1998）在3例FAP的1例乳头状癌和2例FAP的2例乳头状癌中发现RET / PTC1致癌基因激活。这些发现表明，在一些甲状腺乳头状癌中，APC功能丧失与RET功能增强并存。 ，表明RET / PTC1癌基因激活可能是FAP相关甲状腺肿瘤发展的一个进展步骤。

通过RT-PCR筛选切尔诺贝利核电站灾难后暴露于放射性尘埃的2例患者的PTC，随后是5 prime RACE，Klugbauer等（1998）确定了新颖的RET重排，PTC5，涉及RET酪氨酸激酶结构域与RFG5的融合（GOLGA5；606918）。

Klugbauer和Rabes（1999）在甲状腺乳头状癌中鉴定出2种新颖的RET重排类型，他们将它们称为PTC6和PTC7。在PTC6中，RET融合到转录中间因子-1-α（TIF1A; 603406）的N端部分，在PTC7中，RET融合到TIF1-γ的C端部分（TIF1G; 605769）。

在甲状腺乳头状癌中，Nakata等（1999）发现由于易位t（10; 12）（q11; p13），ELKS（607127）和RET基因融合。通过PCR分析正常甲状腺组织和甲状腺乳头状癌，Nakata等（1999）发现ELKS-RET融合转录本只在肿瘤中表达。通过序列分析，他们确定ELKS的氨基酸691与RET的氨基酸713融合。从功能上讲，这种融合会将RET的激酶结构域与ELKS的卷曲螺旋结构并列。中田等（1999年）注意到由于RET基因在乳头状甲状腺癌发生的甲状腺滤泡细胞中不表达，并且由于二聚化导致RET活化，因此RET与ELKS的融合将导致RET的激酶结构域在甲状腺癌组织中不适当表达。他们还证实了融合蛋白在体内的二聚化。

Klugbauer等（2001年）确定了切尔诺贝利术后PTC肿瘤样本中的22个倒数ELE1和60个倒数ELE1（601984）和RET重排，称为PTC3重排。断点分布在两个基因的受影响内含子中，没有明显的聚类，并且在ELE1序列的2个Alu元件上没有断点的积累。然而，在所有断点处或附近发现至少1个拓扑异构酶I（126420）位点，表明该酶在DNA链断裂和/或ELE1和RET倒置的形成中具有潜在作用。由于存在序列同源性的短区域以及在大多数断点处存在短的直接和反向重复，Klugbauer等人（J.Med.Chem。），（1992），第3卷，第2期（2001年） 结论认为，嵌合的ELE1 / RET和RET / ELE1基因是由非同源DNA末端连接机制形成的。

▼ 动物模型
------
Smith-Hicks等（2000）通过在小鼠Ret基因中引入与人类RET基因中与疾病相关的met918-thr（M918T; 164761.0013）取代相对应的点突变，开发了MEN2B小鼠模型。突变小鼠表现出C细胞增生和嗜铬细胞增生，并发展为嗜铬细胞瘤。纯合子小鼠未出现胃肠神经节神经瘤，但显示出肾上腺髓质神经节瘤，相关交感神经节增大和雄性生殖缺陷。没有可归因于功能丧失突变的缺陷，并且肾脏和肠神经系统的发育正常。

De Graaff等（2001）创造了转基因小鼠，表达了小鼠Ret的细胞外结构域，其框内融合到人RET9或RET51的细胞内片段。他们分别将这些等位基因称为单同型Ret9（miRet9）和miRet51。杂合子（+ / miRet9或+ / miRet51），杂等位基因（miRet9 / miRet51）和纯合miRet9小鼠是活的，没有表现出异常。相反，大多数纯合的miRet51小鼠死于新生儿，不到5％存活至2至3个月大，表现出严重的发育迟缓。纯合的miRet51小鼠还表现出肾脏畸形和肠道神经支配严重缺陷。

RET的Tyr1062是几个衔接子和效应蛋白的磷酸酪氨酸结合结构域的结合位点，这些蛋白对于激活细胞内信号传导通路非常重要，例如RAS（见190020）/ ERK（见601795），PI3激酶（见601232）/ AKT（参见164730）和JNK（参见601158）途径。Jijiwa等（2004年）审查了tyr1062在携带带有tyr1062-to-phe突变的敲入基因的转基因小鼠中器官发生中的作用。纯合敲基因小鼠正常出生，但表现出发育迟缓并在第27天死亡。纯合突变小鼠的肠神经系统发育受到严重损害，如Ret-观察到的，整个肠道中约40％的肠神经元缺失。缺陷小鼠。尽管神经节细胞的大小和数量显着减少，但其他突变小鼠在肠道中会以不同程度发育肠神经元。与缺乏Ret的小鼠不同，在所有敲入小鼠中都会出现小肾脏，并伴有轻微的组织学改变。肾脏大小的减少是由于胚胎发生过程中输尿管芽分支的减少所致。Jijiwa等（2004年） 得出的结论是，通过tyr1062进行的RET信号传导在肠神经系统和肾脏的发育中起着重要作用。

▼ 历史
------
评论

Eng（1996）回顾了RET原癌基因在II型多发性内分泌肿瘤和Hirschsprung疾病中的作用。Hoppener and Lips（1996）还从分子生物学和临床方面的角度综述了RET基因突变。英格与穆里根（1997）列出MEN2中RET基因的突变，相关的散发性肿瘤，甲状腺髓样癌和嗜铬细胞瘤以及家族性和散发性Hirschsprung病。RET中8个密码子中的1个的种系突变导致MEN2的3个亚型，即MEN2A，MEN2B和家族性甲状腺髓样癌。他们指出，在甲状腺髓样癌中，体细胞M918T突变占RET突变的最大比例，大多数序列显示范围为30％至50％。嗜铬细胞瘤似乎具有更广泛的RET突变。与MEN2相比，约25％的Hirschsprung病患者的种系突变遍布RET的整个长度。

Fearon（1997）回顾了已经定义的20多种不同的遗传性癌症综合征，并归因于各种遗传癌症基因中特定的种系突变。在有用的图表中，他说明了等位基因变异（“ 1基因-不同综合征”）和遗传异质性（“不同基因-1综合症”）在遗传性癌症综合征中的作用。例如，某些错义突变（例如609号密码子）会引起MEN2A和家族性甲状腺髓样癌。其他，例如密码子918的错义突变，引起MEN2B；还有其他突变会导致Hirschsprung疾病。

▼ 等位基因变异体（54个示例）：
------

.0001 IIA型内分泌多发性肾炎
RET，CYS618GLY
Mulligan等（1993年）在23个明显不同的MEN2A家族中，有20个确定了RET基因的结构错义突变，但在23个正常对照中没有。其中之一涉及密码子364，其中碱基对1783中的T到G转换将TGC（cys）更改为GGC（gly）（CYS364GLY）。Cys364是人与小鼠之间保守的RET细胞外结构域中27个半胱氨酸残基中的1个；其他19个突变位于另一个保守的半胱氨酸残基cys380中（基于Takahashi等人（1988）发表的部分RET序列编号为364的密码子，后来根据全长RET序列被称为618密码子（Mulligan等，1994）。）

.0002 IIA型内分泌多发性肾炎
RET，GLU378ASP，LEU379VAL，CYS380ARG
Mulligan等人在一项针对MEN2A患者肿瘤中RNA的RET基因序列变异的研究中，采用了化学裂解错配（CCM）方法（1993）鉴定了几个不同寻常的改变的序列：GAGCTGTGC被改变为GACGTGCGC，从而导致了378、379和380位密码子的氨基酸置换。所有情况下，突变等位基因都是杂合的。在总共12个家庭中发现了这种不寻常的突变。Cys380是RET细胞外结构域中27个半胱氨酸残基中的1个，在人与小鼠之间是保守的。在其他MEN2A家族中发现了该密码子的其他四个突变（根据Takahashi等人（1988）发布的部分RET序列将密码子编号为380，根据全长RET序列将密码子编号为634（Mulligan et al。，1994）。

.0003 IIA型内分泌多发性肾炎
含铬
RET，CYS634GLY
在3个患有MEN2A的家庭的受影响成员中，Mulligan等人（1993）发现在380密码子的碱基对1831处的TGC到GGC的转化导致用甘氨酸代替半胱氨酸（CYS380GLY）（基于Takahashi等人（1988）发表的部分RET序列，密码子编号为380，基于全长RET序列（Mulligan等，1994），密码子编号为634。）（1994年）和Seri等（1997）同样在与皮肤地衣淀粉样变性有关的MEN2A家族中鉴定了C634G突变（PLCA；见105250）。

Eng等人在一位患有嗜铬细胞瘤的患者及其父亲中（171300）（1995）鉴定出种系C634G突变。

Neumann等（2002年）确定了嗜铬细胞瘤患者种系中的C634G替代。在600个对照染色体中未发现该突变。

.0004 IIA型内分泌多发性肾病
含铬
RET，CYS634TYR
在两个患有MEN2A的家庭中，Mulligan等人（1993）发现在380密码子的碱基对1832处的TGC到TAC的转变导致半胱氨酸被酪氨酸（CYS380TYR）取代（根据Takahashi等人（1988）发布的部分RET序列将密码子编号为380，根据全长RET序列将其密码子编号为634（Mulligan等人，1994）。）

Ceccherini等（1994）发现在与MEN2A的家庭的cys634对轮胎（C634Y）突变与原发的局部皮肤地衣淀粉样变性病（PLCA；参见105250）。

Santoro等（1995）显示，此突变是NIH 3T3细胞中的转化基因，这是RET激酶组成型激活的结果。在MEN2A和家族性甲状腺髓样癌中，点突变导致RET细胞外结构域中的5个半胱氨酸残基中的1个被替换。这会导致RET稳定化二聚化。

Neumann等（2002年）确定了3例散发性嗜铬细胞瘤的不相关患者的种系中的C634Y替代（171300）。在600个对照染色体中未发现该突变。

.0005 IIA型内分泌多发性肺炎
含铬
RET，CYS634SER
在带有MEN2A的1个家庭的受影响成员中，Mulligan等人（1993）发现在密码子380的碱基对1832处的TGC到TCC的转化导致半胱氨酸到丝氨酸的取代（CYS380SER）（根据Takahashi等人（1988）发布的部分RET序列将密码子编号为380，根据全长RET序列将其密码子编号为634（Mulligan等人，1994）。）

Neumann等（2002年）确定了散发性嗜铬细胞瘤患者的种系中的C634S替代（171300）。在600个对照染色体中未发现该突变。

.0006 IIA型内分泌多发性肾病
甲状腺癌，家族髓样，包括
嗜铬细胞瘤，包括
RET，CYS634PHE
在具有MEN2A的家庭中，Mulligan等人（1993）发现受影响的成员有碱基对1832的TGC到TTC的转换，导致苯丙氨酸被半胱氨酸380（CYS380PHE）取代（根据Takahashi等人（1988）发布的部分RET序列将密码子编号为380，根据全长RET序列将其密码子编号为634（Mulligan等人，1994）。）

薛等（ 155），等人（1994）在甲状腺髓样癌家族的患病成员中发现了相同的cys634-phe（C634F）突变，该突变是由核苷酸1832处的TGC转化为TTC引起的（155240）。

Neumann等（2002年）确定了散发性嗜铬细胞瘤患者的种系中的C634F替代（171300）。在600个对照染色体中未发现该突变。

.0007 IIA型内分泌多发性肾炎
RET，CYS611TRP
Donis-Keller等（1993）描述了无关的MEN2A患者的RET基因中共有5个点突变。所有涉及半胱氨酸残基的取代。外显子7是其中四个的位点，外显子8是其中一个的位点。使用Mulligan等人的编号方案（1994），这5个突变是cys611-trp，cys618-ser，cys620-arg，cys620-tyr和cys634-arg。这些突变中的第二个发生在与cys618-gly突变相同的密码子中（164761.0001）。

.0008 IIA型内分泌多发性肾炎
甲状腺癌，家族髓样，包括
RET，CYS618SER
见164761.0007。薛等（1994）发现甲状腺髓样癌家族的受累成员中，由RET基因中的TGC转TCC转变引起的cys364转ser突变（CYS364SER）（155240）。基于RET基因的全长序列，此突变为cys618至ser。

.0009 IIA型内分泌多发性肾炎
RET，CYS620ARG
见164761.0007。根据RET基因的部分序列，此突变称为CYS366ARG。

.0010 IIA型内分泌多发性肾炎
RET，CYS620TYR
见164761.0007。根据RET基因的部分序列，此突变称为CYS366TYR。

.0011 IIA型内分泌多发性肾炎
含铬
RET，CYS634ARG
见164761.0007。基于高桥等人发表的部分RET序列，将该突变称为CYS380ARG（1988）；基于全长序列，突变是从cys634到arg的突变。Mulligan等（1994）发现，cys634-to-arg突变代表MEN2A家族中所有疾病突变的54％，密码子634中所有突变的65％。由于家族来自广泛分离的地理区域，因此该突变似乎多次孤立发生区域并显示出不同的单倍型关联。该突变是由于密码子634从TGC变为CGC所致。Mulligan等（1994）发现在MEN2A家庭中cys634-arg突变的发生与一个或多个家庭成员显示甲状旁腺异常作为该综合征一部分的可能性之间存在出乎意料的相关性。通过对30个明显分离的MEN2A家族的单倍型分析，Gardner等人（1994年）表明，这种相关性不能由携带cys634至arg突变和携带对甲状旁腺异常易感性的单独等位基因的单个建立者染色体来解释，而可能是由于cys634至arg突变本身。

Hofstra等（1996）发现cys634到arg突变，由于在核苷酸1900的T到C转换，在2个可能不相关的MEN2A家庭与相关的皮肤淀粉样变性。在家族性皮肤地衣淀粉样变性病（105250）中未发现RET突变，这可能是一种独特的疾病。

Tessitore等在一名患有MEN2A的26岁女性中进行了研究（1999年）确定了RET基因中的2个突变：cys634到arg的替换，和ala640到gly的替换（164761.0040）。这两个突变存在于同一等位基因上，并在种系和肿瘤DNA中检测到。这两个突变都是从头开始的，也就是说，在父母或亲戚的DNA中找不到它们。免疫组织化学和RT-PCR分析表明，嗜铬细胞瘤表达降钙素以及两个RET等位基因。从肿瘤建立并在培养物中繁殖的细胞系与原始嗜铬细胞瘤一样，维持RET和降钙素的表达。

Mendonca等（1988年）报道了一个MEN2A血统，父亲表现出罕见的表型，包括双侧产生ACTH的嗜铬细胞瘤和甲状腺髓样癌。Nunes等（2002年）使用DGGE和PCR扩增的基因组DNA对父亲及其四个孩子进行了突变分析，然后进行了直接测序或RFLP测试。所有4名儿童均表现出RET序列变异。2名儿童因C细胞疾病接受了甲状腺切除术，存在常见的外显子11 C634R突变。其他2个没有携带C634R突变且C细胞和肾上腺疾病呈阴性的人携带了新的val648-ile变化（V648I; 164761.0047）在RET基因的第11外显子上。这两个变体都存在于父亲中，作者推测这可能已经修饰并促成了他罕见的MEN2A表型。

Neumann等（2002年）确定了4例散发性嗜铬细胞瘤无关患者的种系中的C634R替代（171300）。在600个对照染色体中未发现该突变。

.0012 IIA型内分泌多发性肾炎
含铬
RET，CYS634TRP
在MEN2A的57个家庭中，有2个家庭是Mulligan等人（1994年）发现RET基因发生了C到G的转化，导致cys634到trp（C634W）取代。

Neumann等（2002年）确定了C634W替代在2例散发性嗜铬细胞瘤的不相关患者的种系中（171300）。在600个对照染色体中未发现该突变。

Neumann等（2007）找出了最初被描述为嗜铬细胞瘤的患者亲属：一名名叫Minna Roll的妇女，1884年去世，享年18岁（Frankel，1886）。尸检时发现她患有双侧肾上腺肿瘤，其中1例诊断为肉瘤，另一例诊断为血管肉瘤。她的右肾上腺髓质内还有一个较小的结节，与非恶性嗜铬细胞瘤一致。尸检描述了一个“甲状腺肿”，这在组织学上并没有进行。家族谱系的追踪和谱系的构建不仅揭示了4个后代患有甲状腺髓样癌，而且还发现了4个受影响的活着的家庭成员在RET基因中存在种系C634W突变，从而建立了MEN2A的临床和分子诊断。嗜铬细胞瘤出现在甲状腺髓样癌之前被认为是异常的。

.0013 IIB型多内分泌性肾病
甲状腺癌，散发性髓样，包括
嗜铬细胞瘤，躯体，包括
RET，MET918THR
在研究的所有9位无关的MEN2B患者中，Hofstra等人（1994）发现RET基因的密码子918的一个突变，导致在蛋白质的酪氨酸激酶结构域用苏氨酸替换蛋氨酸。他们在18例散发性甲状腺髓样癌中发现了6个相同的突变（155240）。这最终证明了MEN2A和MEN2B与等位基因疾病有关。因此，没有理由调用MEN2B MEN3。Carlson等人还发现，RET酪氨酸激酶结构域催化核心中的这一相同点突变与继承的MEN2B和从头的MEN2B有关（1994）和Eng等（1994）。ATG到ACG的突变导致在Takahashi等人的密码子命名中，第918位密码子被苏氨酸替换为蛋氨酸（1988年，1989年）。卡尔森等（1994年）提出，这种氨基酸置换会影响底物相互作用，并导致RET蛋白致癌。值得注意的是，在MEN2A和家族性甲状腺髓样癌病例中发现的大多数突变都包含在RET原癌基因的细胞外配体结合域内，并导致了4个不同半胱氨酸的非保守取代。MEN2B主要显示了非半胱氨酸替代。

Carlson等人发现，多态性标记物的存在与MEN2B紧密相关，而M918T突变几乎涵盖了MEN2B的所有情况（1994年）明确确定突变发生在母体或父系染色体上。令人惊讶的是，他们分析的所有25个突变都发生在父亲等位基因中。因此，MEN2B可以添加到肿瘤疾病列表中，该疾病已经包括Wilms肿瘤，双侧视网膜母细胞瘤，骨肉瘤，胚胎性横纹肌肉瘤和I型神经纤维瘤病，其相关基因改变主要或仅发生在父系染色体上。卡尔森等（1994）也观察到了父亲的年龄效应。

Santoro等（1995）证明了RET等位基因是RETH组成性激活的结果在NIH 3T3细胞的一个转换基因。该突变在数量和质量上改变了RET的催化性能。

英等（1995）分析了71个散发性甲状腺髓样癌（68个原发性肿瘤和3个细胞系）的RET外显子10、11和16中的突变。他们发现23％的散发性MTC具有RET密码子918突变（位于第16外显子），而只有3个％有外显子10突变，外显子11没有突变。他们发现14例MEN2A病例的MTC中没有外显子16突变。因此，家族性MTC和MEN2A中常见的外显子10和11突变很少发生在散发性MTC中。RET密码子918的体细胞突变似乎在少数散发MTC的肿瘤发生中起作用，但在MEN2A肿瘤中却没有。除了对生物学的兴趣外，这些发现还可能在确定带有孤立MTC的病例是真正散发还是属于遗传性癌症综合症的一部分方面具有临床应用价值。918位密码子突变将蛋氨酸（ATG）变为苏氨酸（ACG）。在种系DNA可用于分析的所有情况下，都发现它是野生型。该突变先前称为MET664THR。

英等（1995）在来自2名无关患者的嗜铬细胞瘤（171300）肿瘤组织中鉴定了M918T取代。在这些患者的种系中未鉴定出该突变。

在MEN2A中，影响受体酪氨酸激酶胞外域中半胱氨酸残基的突变通过形成二硫键结合的同型二聚体而引起酪氨酸激酶的组成性活化。在MEN2B中，仅在酪氨酸激酶结构域中的met918-thr突变已被鉴定。该突变不会导致二聚体形成，但是已经在生物学和生物化学上显示出引起RET蛋白的配体非依赖性活化，但程度小于MEN2A突变。Bongarzone等（1998）表明，MEN2B RET突变的活性可以通过稳定的受体二聚化而增加。通过构建具有MEN2A突变的双突变受体（cys634到arg；164761.0011），通过实验实现了二聚化除了MEN2B突变外，还通过将RET的met918-thr突变的细胞长期暴露于RET配体神经胶质细胞系衍生的神经营养因子（GDNF; 600837）。在这两种情况下，都可以看到RET-MEN2B突变蛋白的完全活化，这是通过体外转染测定法和生化参数测得的。这些结果表明MEN2B表型可能受到RET配体的组织分布或浓度的影响。

.0014 HIRSCHSPRUNG疾病，易感性至1
RET，1-BP DEL，G1120
如142623中所述，通过观察该区域的间质缺失情况和家庭联系研究，将引起Hirschsprung疾病的常染色体显性基因（142623）定位到10q11.2。随后将该基因定位到包含RET基因的250kb区间（Luo等，1993）。Romeo et al。使用侧翼内含子序列作为引物从27例Hirschsprung病患者的基因组DNA中扩增RET的20个外显子中的12个（1994年）确定了1个移码突变和3个错义突变，它们完全破坏或部分改变RET蛋白的酪氨酸激酶结构域的结构。RET中引起多发性内分泌肿瘤的突变（参见171400）位于富含细胞半胱氨酸的域中。另一方面，发现在纯合的转基因小鼠中，RET基因的酪氨酸激酶结构域中的靶向突变会产生肠神经节病和肾脏发育不全（Schuchardt等，1994）。移码突变由外显子6中核苷酸1120的G缺失组成，引起第一个373个氨基酸后移码。一位亲本是突变的沉默载体，该突变导致在新的终止密码子出现的核苷酸1355处翻译的提前终止。

.0015 HIRSCHSPRUNG疾病，易感性至1
RET，SER765PRO
在偶发的赫希斯氏病中（142623），Romeo等人（1994）发现在核苷酸2293的T到C转换，导致脯氨酸替换丝氨酸765。

.0016 HIRSCHSPRUNG疾病，易感性至1
RET，ARG897GLN
在偶发的赫希斯氏病中（142623），Romeo等人（1994）发现外显子15中核苷酸2690的G-A过渡导致谷氨酰胺取代精氨酸-897。

.0017 HIRSCHSPRUNG疾病，易感性至1
RET，ARG972GLY
在家族性的Hirschsprung病（142623）中，Romeo等人（1994）发现在RET基因的外显子17的核苷酸2914的一个A到G转换导致甘氨酸替换精氨酸972。

.0018 HIRSCHSPRUNG疾病，易感性至1
RET，SER32LEU
Edery等（1994）报道了在导致赫希斯普龙氏病的RET基因中有4个错义突变和2个无义突变（142623）。其中之一是外显子2密码子32的C到T转换，导致亮氨酸被RET蛋白中的丝氨酸取代。

.0019 HIRSCHSPRUNG疾病，易感性至1
RET，PRO64LEU
在Hirschsprung病（142623）的情况下，Edery等（1994）发现外显子2的第64位密码子发生了由C到T的转变，导致亮氨酸被脯氨酸取代。

.0020 HIRSCHSPRUNG疾病，易感性至1
RET，胶合剂
Edery等人在患有Hirschsprung病的患者中（142623）（1994年）发现外显子3的136位密码子发生G到T转换，将Glu转变为终止密码子。

.0021赫氏弹簧病，易感性，1
RET，ARG180TER
Edery等人在患有Hirschsprung病的患者中（142623）（1994）描述了外显子3的180号密码子从C到T的转变，将精氨酸转化为终止密码子。

.0022 HIRSCHSPRUNG疾病，易感性至1
RET，ARG330GLN
Edery等人在患有Hirschsprung病的患者中（142623）（1994）发现外显子5的330位密码子由G到A的转变导致精氨酸被谷氨酰胺取代。

.0023 HIRSCHSPRUNG疾病，易感性至1
RET，PHE393LEU
Edery等人在患有Hirschsprung病的患者中（142623）（1994）发现外显子6的393位密码子由C到A的转换导致亮氨酸被RET蛋白中的苯丙氨酸取代。

.0024 IIA型内分泌多发性肾炎
RET，CYS620PHE
在MEN2A的家庭中，Xue等人（1994）发现受影响的成员进行了从TGC到TTC的转化，导致苯丙氨酸被半胱氨酸366（CYS366PHE）取代。基于RET基因的全长序列，该突变是cys620至phe。

.0025甲状腺癌，家族性髓质
包括内分泌多发性肺炎IIA型
RET，CYS618ARG
在一个有家族MTC的家庭中（155240），Xue等人（1994年）发现受影响的成员进行了TGC到CGC的转化，导致精氨酸替代了半胱氨酸364（CYS364ARG）。根据RET基因的全长序列，此突变是cys618到arg的突变。

Hibi等（2014）报道了与杂合C618R突变相关的与MEN2A的家庭（171400）。该女性先证者患有MTC和嗜铬细胞瘤，她的兄弟死于MTC，享年45岁。先证者有3个无症状的儿子，所有儿子均携带C618R突变。发现其中两个儿子患有单侧肾发育不全，其中一个患有Hirschsprung病（HSCR1; 142623）。Hibi等（2014）指出，敲除小鼠的Ret会导致肠神经元的丧失以及肾发育不全或严重的发育不全（Schuchardt et al。，1994）。Hibi等人报道了该家族的发现（2014年）支持以下假设：组成性活性RET突变可能会部分削弱RET功能，从而导致功能表型丧失，例如肾发育不全或HSCR。但是，Hibi等（2014年）得出结论，在患有RET突变的患者中，肾发育不全/发育异常可能非常罕见。

.0026多发性内分泌性肾病，IIA型，无嗜铬细胞瘤
RET，12-BP DUP
仅在超过92％的甲状腺髓样癌（FMTC）家庭中发现了RET基因第10外显子（第609、611、618和620号密码子）和第11外显子（第634号密码子）编码的5个半胱氨酸密码子的错义突变。或MEN2A（MTC和嗜铬细胞瘤和/或甲状旁腺功能亢进）。RET原癌基因编码参与神经c谱系正常发育的受体酪氨酸激酶。胶质细胞衍生的神经营养因子（GDNF；600837）是转化生长因子（TGF）-β超家族的成员，是RET的配体。转染到NIH 3T3细胞中的突变RET（C634W; 164761.0012）赋予转化的表型，并且突变的受体通过分子间二硫键二聚并在酪氨酸残基处发生自磷酸化。Hoppner和Ritter（1997）指出，单个半胱氨酸残基突变为任何其他氨基酸可形成分子间二硫键，并改变构象以激活细胞内酪氨酸激酶结构域而无需配体。这似乎是刺激肿瘤生长的关键事件。似乎在富含半胱氨酸的结构域中任何半胱氨酸残基的消失对于MEN2A的进展至关重要。霍普纳与里特（1997）描述了MEN2A家族中一类新的种系突变。外显子11中12 b​​p的重复在富含半胱氨酸的结构域中产生了另一个半胱氨酸密码子，并导致了MEN2综合征的独特临床表型。该重复导致在密码子634（cys）和635（arg）之间插入4个氨基酸，因此产生了另外的半胱氨酸残基。该家庭有14名受影响的和11名未受影响的生活成员。在8例患者中诊断出高钙血症，并且组织学评估显示在所有检查的10例患者中甲状旁腺增生。该家族中没有成员显示嗜铬细胞瘤的证据。作者说，这是一个没有嗜铬细胞瘤但甲状旁腺疾病高发的家庭的第一份文献。大约85％的MEN2A家族显示半胱氨酸634突变，通常，

.0027甲状腺癌，家族性髓质
RET，GLU768ASP
在一个大型多代家族中，甲状腺髓样癌（155240）或C细胞增生的多例，以及肾上腺髓质增生的两个个体，Boccia等（1997）确定了RET基因的外显子13的glu768到asp（E768D）突变。该突变与该家族的FMTC表型隔离，但与肾上腺髓质增生表型隔离。Eng等人先前已在FMTC的3个无关家族中描述了该突变（1995）和Bolino等（1995）。

E768D突变是由位置2304处的G到C转变引起的。在一名患有甲状腺髓样癌的孤立病例的患者中，Antinolo等人（2002）发现，作为种系突变，相同的氨基酸变化是由同一核苷酸中的G到T转换引起的。

.0028 HIRSCHSPRUNG疾病，易感性至1
RET，ARG313GLN
Seri等人在一个由近亲父母出生的孩子中（1997年）发现RET基因的R313Q突变的纯合性是最严重的Hirschsprung病（142623）表型的原因，即总肠结肠神经节病伴小肠受累。

.0029 IIA型多发性内分泌性淋巴结病，患有赫氏弹簧病
RET，CYS609TYR
Decker等（1998年）发现在通过MEN2A确定的44个家庭中的7个（16％）家庭中，Hirschsprung病（142623）与MEN2A（171400）共分离。先前已在MEN2A或FMTC中报道了所有7个家族的易感RET突变，并在外显子10的609、618或620密码子处发生：C609Y，C618S，C620R和C620W。与具有更常见的RET外显子11 cys634或外显子14突变的人相比，具有RET外显子10 cys突变的MEN2A家庭其后发展HSCR1的风险更高。这些发现表明，MEN2A中HSCR1的表达可能特定于RET外显子10 cys突变。似乎仅RET引起的致癌激活不足以解释疾病的共表达。

.0030 移至164761.0008

0.0031搬到164761.0009

.0032 IIA型多发性内分泌性肾病，合并有赫氏弹簧病
RET，CYS620TRP
参见（164761.0029）和Decker等（1998）。

.0033 IIA型内分泌多发性肾炎
甲状腺癌，家族髓样，包括
RET，LEU790PHE
Berndt等（1998）研究了MEN2A或FMTC（155240）的德国181个家庭的RET原癌基因突变。在8个带有MEN2A或FMTC的家庭中，在外显子10和11中编码的富含半胱氨酸的结构域中未检测到突变。外显子13至15的DNA测序显示3个家族中罕见的非半胱氨酸突变（密码子631、768和844）。与这些罕见事件相反，在5个家庭（仅4个MTC； 1个MTC和嗜铬细胞瘤的家庭）和11个明显散发性肿瘤的患者中发现了第13外显子的第1300个密码子的杂合错义突变。两种不同的leu790-phe突变（TTG至TTT，TTG至TTC）和1 tyr791-phe突变（TAT至TTT）（164761.0034） 被找到。他们得出结论，RET原癌基因的790位密码子和791位密码子是引起MEN2A / FMTC突变的新热点，德国MEN2A / FMTC家族的100％可以通过RET原癌基因的突变来表征。

.0034甲状腺癌，家族延髓
含铬
RET，TYR791PHE
参见（164761.0033）和Berndt等（1998）。

Neumann等人在散发性嗜铬细胞瘤的患者中（171300）（2002年）确定了RETr基因外显子13的2372A-T颠倒导致的tyr791-to-phe（Y791F）取代。在600个对照染色体中未发现该突变。

Baumgartner-Parzer等（2005年）发现在家族性甲状腺髓样癌患者中，Y791F突变（作者称为PHE791TYR，F791Y）与附近的L769L SNP有关。携带Y791F的所有12个个体（9个无关个体和3个后代）对于L769L多态性是纯合的或杂合的。

弗兰克·劳埃（Frank-Raue）等人（2005）发现这种突变与一个多发性内分泌肿瘤表型的家庭的3个成员的MEN1（131100.0034）的一个剪接位点突变相吻合。RET Y791F突变由父亲隔离进行，父亲65岁时没有甲状腺或甲状旁腺疾病，没有嗜铬细胞瘤，也没有甲状腺髓样癌，嗜铬细胞瘤或原发性甲状旁腺功能亢进症的家族史。作者得出结论，RET Y791F突变和MEN1突变不相互作用。

.0035赫氏弹簧病，易感性至1
RET，ARG231HIS
Attie等人在一个法国非家族性大肠埃希氏菌病家族中（142623），其特征是神经节病在8个同胞中有4个一直延伸到小肠（1995年）检测到RET基因中arg231-his（R231H）突变的杂合性。Pelet等（1998年）表明，RET突变通过显着减少细胞表面的RET蛋白而导致单倍体供血不足，如在体外所证明的。

在Attie等报道的家庭中（1995），Doray等（1998年）在接受测试的3名患病儿童以及未患病的父亲和2名患病的同胞中，均检测到神经营养素基因（NRTN; 602018）的杂合错义变异（A96S）。Doray等（1998年）表明，NRTN突变不足以单独导致HSCR，但可能调节疾病的表达，这在该家族中很严重。但是，他们指出，父亲也是RET R231H突变的杂合子。

.0036 HIRSCHSPRUNG疾病，易感性至1
RET，ARG982CYS
Svensson等（1998年）描述了一个在RET基因（从arg982到cys； R982C）和EDNRB基因（从gly57到ser；131244.0005）中都有错义突变的家庭。在这个家庭中，有5个成员中的3个都有这两个突变，但是只有1个男孩（具有男孩）具有赫氏弹簧病表型（142623）。

.0037 HIRSCHSPRUNG疾病，易感性至1
RET，ILE647ILE，1941C-T
Auricchio等（1999）描述了一名患有Hirschsprung病的患者（142623），其在核苷酸1941处具有从C到T的转变，不引起密码子647（I647I）的改变，但是对剪接产生作用。该突变以杂合状态与EDNRB位点S305N（131244.0006）的杂合错义突变结合存在。Ceccherini等人在另一位患者中描述了相同的I647I变化（1994）。他们在体内和体外均显示，在2位不同的患者中，沉默的RET突变会干扰正确的转录，可能导致RET蛋白水平降低。首次在同一患者中共存在2个功能上显着的EDNRB和RET突变，表明在多基因HSCR疾病中这2个不同的跨膜受体之间存在直接的遗传相互作用。

.0038 HIRSCHSPRUNG疾病，易感性至1
RET，ALA45ALA
Fitze等（1999）发现在两个孤立的人口与零星的Hirschsprung疾病（HSCR; 142623）（来自德国德累斯顿的37个人和来自德国埃尔兰根的25个人）的RET基因的密码子45多态性高度相关。多态性由密码子GCG变为GCA组成，该氨基酸未产生任何改变。他们指出，Puffenberger等（1994年）描述了在HSCR单倍型上这种多态性的显着过量，该多态性已遗传给患有HSCR的门诺石家族的受影响成员。但是，在该亲属中鉴定出的主要突变是EDNRB基因的纯正W276C创始人突变（131244.0001）。该协会支持HSCR的多基因，复杂遗传。此外，Auricchio等（1999）报道了一个患者既有EDNRB突变（131244.0006）又有RET突变（164761.0037），显然导致了异常的RET RNA剪接。Fitze等（1999）推测了沉默密码子45多态性可能在HSCR的发生中起作用的可能机制。

Borrego等（2000年）使用Hirschsprung病患者，未患病父母和区域匹配对照的RET中的7个基因座确定了12个单倍型。在超过35％的病例中发现了包含ala45到ala变体的四种特定基因型，而不含该变体的基因型占对照基因型的43％，但在Hirschsprung病例中从未见过。Borrego等（2000年）得出结论，含有这种变异的Hirschsprung基因型以简单的常染色体隐性方式或加性的，剂量依赖性的方式易患Hirschsprung疾病，即使在孤立的Hirschsprung病例中也是如此。

.0039甲状腺癌，家族性髓质
RET，9-BP DUP，EX8
皮尼等人（1999年）研究了一个家族患甲状腺甲状腺髓样癌（MTC；155240）的家庭中的4个患病成员，并且在先证者的姐姐中有致命的新生儿肠梗阻史。遗传分析表明，在所有MTC患者中，RET基因的外显子8中不存在通常的MTC突变和杂种9 bp复制的杂合性。该9bp的重复在RET的胞外富含半胱氨酸的结构域中产生了另外的半胱氨酸残基。皮尼等人（142）建议进一步的研究，以确认这种突变是否仅导致MTC或它是否也与Hirschsprung疾病有关（142623）。

.0040 IIA型内分泌多发性肾炎
RET，ALA640GLY
Tessitore等人在一名26岁的IIA型多发性内分泌肿瘤女性中（171400）（1999年）确定了RET基因中的2个突变：cys634到arg的替换（164761.0011）和跨膜区域的ala640到gly的替换。这两个突变存在于同一等位基因上，并在种系和肿瘤DNA中检测到。这两个突变都是从头开始的，也就是说，在父母或亲戚的DNA中找不到它们。免疫组织化学和RT-PCR分析表明，嗜铬细胞瘤表达降钙素以及两个RET等位基因。从肿瘤建立并在培养物中繁殖的细胞系与原始嗜铬细胞瘤一样，维持RET和降钙素的表达。

.0041甲状腺癌，家族延髓
RET，CYS620SER
传说等（2000年，2001年）描述了一个家族，其中RET基因的cys620-to-ser（C620S）突变在3代成员中被鉴定，并且通过推断第四代被发现与甲状腺髓样癌相关（155240）。几个成员。这些人之一被发现没有左肾。她的儿子被发现患有大隐身病（142623）在几个月大的时候，并已对相关肠段进行了手术切除。随后，他被发现患有RET突变，并在15岁时接受了全甲状腺切除术，从而发现了甲状腺髓样癌。超声检查异常也表明儿子没有左肾。在其他活体成员的腹部超声检查中未发现肾脏异常。传说等（2001年）得出结论，MEN2综合征可能与肾脏畸形有关。

.0042甲状腺癌，家族延髓
RET，CYS609ARG
Munnes等（2000年）分析了6个不同家庭的Hirschsprung病患者（142623）的RET基因。在一个伴有HSCR和家族性甲状腺髓样癌的家族中（155240），他们确定了一个cys609-arg（C609R）点突变，该突变涉及外显子10中编码的6个半胱氨酸残基中的1个。 RET受体的酪氨酸激酶结构域中的取代使得该突变可能导致HSCR和甲状腺癌。他们指出，RET基因中的C609Y突变（164761.0029）导致了MEN IIA（171400）与Hirschsprung病的合并。

.0043 IIB型多内分泌性肾病
RET，VAL804MET，SER904CYS
Menko等（2002年）报道了一种具有非典型的多发性内分泌肿瘤2B型（162300），其特征是甲状腺髓样癌（155240）和多个家庭成员的黏膜神经瘤。突变分析显示，在受影响的个体中，RET基因中的双重种系突变不涉及密码子918（val804对应于met804，ser904对应于cys）。

.0044甲状腺癌，家族延髓
RET，VAL804LEU
RET基因的一个804密码子突变导致亮氨酸取代缬氨酸（V804L）首次在两个家族性甲状腺髓样癌（MTC; 155240）无关的法国家庭中发现（Farndon等，1986 ; Bolino等， 1995）。Lombardo等（2002年）在5个孤立的家族中研究了61个具有RET原癌基因种系V804L突变的杂合子，其中包括Bolino等人报道的一个（1995）。共有31名受试者接受了手术。组织学发现30例C细胞增生，12例分离，18例与MTC相关。6例MTC患者有淋巴结转移。在14例可检测到的基础降钙素患者中（114130）水平，其中12例患有MTC，2例患有孤立的C细胞增生。在大多数携带V804L RET突变的个体中，C细胞疾病发病较晚，病程缓慢。在生命的前二十年中，大多数杂合子的五肽胃泌素检测为阴性，而在生命的第三，四十年中，只有五分之一为阳性。作者得出的结论是，在这些基因携带者中，手术可能会推迟到生命的第四个十年或直到五肽胃泌素刺激试验转为阳性。他们还建议在更大系列的V804L携带者上证实其数据，但它可能提供一种平衡策略，可控制并防止疾病全表型的发展。

Ruiz等（2001）等人发现了种系变体，ser836 to ser（S836S）（由于RET基因第14外显子的核苷酸改变而不会改变氨基酸），在患者中的发生频率明显更高患有散发性MTC的患者比没有散发性MTC的对照组要高。基于此观察结果，推测S836S多态性在MTC中可能是低渗透性等位基因，在FMTC家族中有少量受影响的成员，它们没有典型的RET基因突变。在一个扩展的匈牙利FMTC亲戚中，其成员在RET基因第14外显子的单独等位基因中具有种系V804L突变和种系S836S多态性（2003年）分析了临床关联。观察结果表明，在大多数具有RET基因外显子14密码子804突变的患者中，V804L突变和S836S多态性在不同等位基因中的共存并未加剧相对低风险的疾病表型特征。对具有V804L突变的家庭成员中的三个成员和无法测试突变的成员进行了非转移性MTC手术，而具有V804L突变的MTC成员中有1个拒绝手术。在所有受MTC影响的患者中，该疾病的发展相对较晚，并且从未引起死亡。

Lesueur等（2005年）比较了3例V804L或V804M纯合子患者的临床数据和诊断年龄（见164761.0043），来自同一人群的6例其他杂合子病例以及先前报道的其他纯合子和杂合子受试者。数据与密码子804突变具有低渗透率的模型一致，甲状腺髓样癌的发展与第二种系或体细胞突变有关。作者得出的结论是，RET基因中其他这些遗传变异的活性和（在发生体细胞突变的情况下）时间安排可以解释与804号密码子种系突变相关的广泛临床变异性。

.0045先天性中央通气综合征
RET，ARG114HIS
在患有先天性中央通气不足综合征（CCHS; 209880）的患者中，一个8岁的女孩Kanai等人（2002年）在RET基因的外显子3中发现了341G-A过渡，导致arg114-his（R114H）氨基酸取代。该突变是从她健康的父亲那里继承而来的，在50个健康的日本对照中不存在。患者仅在睡眠期间需要家庭通气治疗，并且表现出正常的精神运动发育。她在足月出生，出生后不久（尤其是在睡眠期间）表现出通气不足和/或呼吸暂停，并且在出生后数小时内需要进行气管插管和机械通气。睡眠期间进行的呼吸功能测试显示对高碳酸血症的反应极低或没有反应。尽管清醒状态下的呼吸功能测试结果正常，即使血液中的二氧化碳含量增加，分钟通气量也没有增加。142623）或未检测到神经were起源的肿瘤。该患者有非常轻度的便秘（不需要治疗），斜视和不完全的右束支传导阻滞。Kanai（2002）声称这是首例孤立CCHS患者中RET基因突变的报道。

.0046先天性中央呼吸通气综合征，合并赫氏弹簧病
RET，PRO1039LEU
在患有CCHS和全结肠神经节病的患者中（209800），Amiel等人（1998）发现在RET基因的外显子19的密码子1039的第二个核苷酸的C到T转换，蛋白质（P1039L）的脯氨酸变成亮氨酸。Amiel等（2003）发现这名患者在PHOX2B基因（603851.0001）也携带了聚丙氨酸扩展。

.0047 IIA型内分泌多发性肾炎
RET，VAL648ILE
在4名IIA型多发性内分泌肿瘤患儿中，有2名（171400）的父亲具有罕见的MEN2A表型，包括双侧产生ACTH的嗜铬细胞瘤和甲状腺髓样癌，Nunes等（2002年）在RET基因的第11外显子中发现了一个新的648G-A过渡，导致val648-ile（V648I）突变。在未受影响的母亲或200个对照等位基因中未发现这种新的替代。父亲中同时存在V648I和cys634-to-arg（C364R; 164761.0011）变体，作者推测这可能已经修饰并促成了他罕见的MEN2A表型。

.0048甲状腺癌，家族性髓质
RET，GLY533CYS
Alvares Da Silva等在来自西班牙的6代家族中有229名受试者的76例家族性甲状腺髓样癌（FMTC; 155240）中进行了研究（2003年）在RET基因的外显子8（1597G-T）中检测到一个新的点突变，该突变与RET蛋白富含半胱氨酸的结构域中的gly533-cys（G533C）取代相对应。对35例甲状腺切除术的组织学分析表明，有21例在40岁之后患有MTC，8例在40岁之前患有MTC，其中4例在18岁之前患有MTC或C细胞增生（CCH），2例死于MTC年龄在53岁和60岁之间，有1名患者在5岁时患有CCH，提示临床异质性。作者得出结论，为改善FMTC的诊断，在未发现经典RET突变的家庭中应考虑对RET外显子8的分析。

.0049 IIA型内分泌多发性肾炎
甲状腺癌，家族髓样，包括
RET，SER891ALA
Jimenez等人在一个以MEN2A为特征的甲状腺髓样癌和嗜铬细胞瘤的家庭中（171400）（2004）发现在RET基因的密码子891（S891A）丝氨酸变成丙氨酸。这种突变是由外显子15中第2671位核苷酸的T-G转化引起的。人们认为，这种突变的携带者只会发展遗传性甲状腺髓样癌，而没有MEN2其他表现的证据（Hofstra等，1997；Dang等）。等，1999）。

.0050 HIRSCHSPRUNG疾病，易感性至1
RET，IVS1，CT，+9.7 KB（rs2435357）
Emison等（2005）鉴定了在RET基因的内含子1的27.6-kb区域内与Hirschsprung疾病易感性相关的单核苷酸多态性（SNP）（142623）。命名为SNP RET + 3（rs2435357）的变体位于多物种保守序列MCS + 9.7（通过与RET起始位点的千碱基距离确定），与所有受检哺乳动物均显示出72.5％的最小同一性。RET + 3：C等位基因在所有检测的9种哺乳动物中高度保守。T等位基因与Hirschsprung病有关。瞬时转染分析表明，MCS + 9.7在体外起增强子的作用，带有RET + 3突变等位基因的MCS + 9.7在增强子功能上降低了6.3倍。

Emison等（2005年）表明RET + 3：T等位基因是在非洲几乎不存在的衍生等位基因，但是在100,000年或更短的时间内，欧洲的频率上升到0.25，亚洲的频率上升到0.45，这表明维持该基因的正选择压力。等位基因。赫氏弹簧病在表达和发病率上显示出明显的性别差异；Emison等（2005年）观察到，在RET区域，相关的等位基因的遗传频率对患病的女儿总是比对患病的儿子要小，但在不重要的SNP处例外。RET + 3突变的其他两个特征显示出性别差异，与男性比女性的发病率更高相符。假设外显率是乘性模型，那么向受影响的儿子和女儿遗传的频率分别导致男性和女性的易感性分别提高了5.7倍和2.1倍。第二，受影响个体的基因型频率可以用来估计外显率，其变化范围在6.2 x 10（5）和1.8 x 10（3）之间，远小于长段性Hirschsprung疾病。

Emison等（2010年）研究了882名患有Hirschsprung疾病的先证者和来自美国，欧洲和中国家庭的1478​​名一级亲属，并证明rs2435357 T等位基因的易感性普遍提高了4倍以上。体外测定表明，T变体破坏了MCS + 9.7中的SOX10（602229）结合位点，从而损害了RET反式激活。Emison等（2010年）发现T等位基因参与了所有形式的HSCR，并且与神经节病的长度（p = 7.6 x 10（-5））和家族性（p = 6.2 x 10（-4））显着相关，并带有增强子在男性，短段家庭和单纯形家庭的常见形式中更为常见。此外，T变体增加了罕见的RET编码突变患者的外显率。

.0051甲状腺癌，家族延髓
RET，ARG912PRO
Jimenez等（2004年）报道了甲状腺髓样癌家族中RET细胞内酪氨酸激酶结构域的arg912-to-pro（R912P）突变（MTC；155240）。该索引患者在14岁时出现甲状腺髓样癌。尽管最初对常见突变密码子的常规分析未能显示出种系RET突变，但疾病的早期发作和肿瘤的多灶性促使人们进行了进一步分析。直接DNA测序显示外显子16发生G到C转换，从而导致R912P取代。68个家庭成员中有11个具有相同的杂合突变。索引患者是生命的第二个十年中唯一出现此临床明显和转移性疾病的携带突变的患者。在进行全甲状腺切除术和改良的根治性颈淋巴结清扫术之后，她在本报告发表之时大约40年没有表现出任何放射学证据。

.0052预防黑氏病，预防
RET，128496T-C
Griseri等。等（2007）在位于第三个和第四个聚腺苷酸化位点之间的富AU区域的RET基因的3个主要非翻译区中鉴定出128496T-C多态性（rs3026785）。体外和细胞培养研究表明，罕见的128496C变体通过干扰富含AU的序列介导的生理mRNA代谢而导致RET基因表达增加。所述128496T-C SNP被发现是与单倍型（预先用2508C-T SNP相关联的）完全连锁不平衡发现对先天性巨结肠症（保护142623）（Griseri等人（2000，2002年））。由于其位置，预计128496T-C SNP的作用仅限于编码RET51的转录本。但是，Griseri等（2007年）指出，SNP的保护作用可能不足以抵消强烈的HSCR易感因素，例如核型异常。

.0053重新分类-各种未知的意义
RET，VAL778ILE
由于尚未确认其对肾发育不全的贡献（见191830），因此该变种以前称为RENAL AGENESIS，已被重新分类为重要性不明的变种。

Skinner等人在来自2个无关的死胎的双侧肾脏发育不良的石蜡包埋的组织样本中（2008年）确定了RET基因的外显子13杂合的G到A过渡，导致val778到ile（V778I）取代。其中一个胎儿还携带RET M918T突变（164761.0013）。没有研究父母的DNA。体外功能表达研究表明，V788I突变蛋白在酪氨酸1062上被组成性磷酸化（2008年）假设RET信号缺陷导致功能丧失。胎儿没有Hirschsprung病的证据（142623），MEN2A（171400），MEN2B（162300））或家族性甲状腺髓样癌（155240）。但是，Skinner等（2008）指出，这些情况通常在儿童后期出现临床表现。它们可能已经存在于胎儿中，而没有被标准尸检发现。

.0054重新分类-各种未知的意义
RET，PRO198THR
由于尚未确认其对肾发育不全的贡献（见191830），因此该变种以前称为RENAL AGENESIS，已被重新分类为重要性不明的变种。

Skinner等人在死胎胎儿双侧肾发育不全的石蜡包埋组织样本中（2008）鉴定了RET基因的外显子3的杂合的C到A转换，导致pro198到thr（P198T）替换。没有研究父母的DNA。体外功能表达研究表明，P198T突变蛋白被灭活。胎儿没有Hirschsprung病（142623），MEN2A（171400），MEN2B（162300）或家族性甲状腺髓样癌（155240）的证据。但是，Skinner等（2008年）注意到这些情况通常在儿童后期出现临床表现。它们可能已经存在于胎儿中，而没有被标准尸检发现。