有丝分裂纺锤体定位蛋白; MISP

有丝分裂相互作用子和 PLK1 的底物
19 号染色体开放解读码组 21； C19ORF21

HGNC 批准的基因符号：MISP

细胞遗传学位置：19p13.3 基因组坐标（GRCh38）：19:748,412-764,317（来自 NCBI）

▼ 说明

有丝分裂纺锤体的定位涉及附着在皮质结构上的星体微管的运动。 MISP 是一种皮质肌节蛋白相关蛋白，是有丝分裂纺锤体正确定位所必需的（Zhu et al., 2013）。

▼ 克隆与表达

Zhu 等人通过对同步 HeLa 细胞中与有丝分裂激酶 PLK1（602098）共沉淀的蛋白质进行质谱分析（2013）确定了 MISP。推导的 679 个氨基酸蛋白与小鼠和青蛙直向同源蛋白共享多个保守区域，包括 N 端结构域、3 个中央重复基序和 C 端结构域。其中一些区域在果蝇直系同源物中也是保守的。 MISP 有几个可能被 PLK1 和 CDK1（116940）磷酸化的位点。免疫荧光分析显示，在间期和有丝分裂期间，MISP 主要定位于皮质肌节蛋白结构，并且 MISP 与细胞质肌节蛋白丝部分共定位。蛋白质印迹分析在同步 HeLa 细胞的 G1 和 S 期检测到表观分子量约为 75 kD 的 MISP。 G2/M期蛋白质含量增加，MISP持续表达直至有丝分裂结束。还观察到迁移较慢、磷酸酶敏感的形式。

Maier 等人使用 RNA 干扰筛选来鉴定具有多余中心体的癌细胞中中心体聚集所需的蛋白质（2013）确定了 MISP。

▼ 基因功能

朱等人（2013）发现 MISP 的 C 端结构域与 PLK1 的 polo框结构域相互作用。内源性 CDK1-细胞周期蛋白 B（CCNB1；123836）复合物也与有丝分裂 HeLa 细胞中的内源性 MISP 相互作用。在 CDK1 引发 MISP 磷酸化后，PLK1 在有丝分裂中结合并磷酸化 MISP。蛋白质下拉分析揭示了 MISP 与聚合肌节蛋白的大量共沉淀。 MISP 还与微管以及动力蛋白 p150（胶合）（DCTN1；601143）和肌节蛋白一起共沉积。通过小干扰 RNA 消除 HeLa 细胞中的 MISP 会导致细胞变圆，并通过延迟纺锤体组装检查点的解析来减缓中期到后期的转变。 MISP 的敲除还会导致染色体错位、纺锤体极破坏、纺锤体倾斜、星体微管缩短以及纺锤体从细胞中心到皮质的运动。野生型 MISP 或磷酸化 MISP 突变体（但不是磷酸化缺陷型 MISP 突变体）挽救了表型。朱等人（2013）得出结论，MISP 在有丝分裂过程中稳定了星体微管与皮质的附着。

孤立地，迈尔等人（2013）发现 MISP 的消耗通过激活纺锤体组装检查点导致有丝分裂停滞。 MISP 耗竭还导致纺锤体张力丧失、纺锤体、中心体和染色体的方向和定位缺陷以及星体微管与细胞皮层附着的缺陷。在含有多余中心体的癌细胞中，MISP 的消耗导致纺锤体多极性。 MISP 与肌节蛋白细胞骨架和粘着斑激酶（FAK 或 PTK2；600758）相互作用，并在有丝分裂过程中被 CDK1 磷酸化。 MISP 还与微管加末端结合蛋白 EB1（MAPRE1; 603108）相互作用，并且与 p150（glued）相互作用更弱。迈尔等人（2013）得出结论，MISP 将微管与肌节蛋白细胞骨架和粘着斑连接起来，以正确定位有丝分裂纺锤体。

▼ 测绘

Hartz（2013）根据 MISP 序列（GenBank BC042125）与基因组序列（GRCh37）的比对，将 MISP 基因对应到染色体 19p13.3。