微小RNA 365A; MIR365A

MIR365-1
MIR365
miRNA365A

HGNC 批准的基因符号：MIR365A

细胞遗传学位置：16p13.12 基因组坐标（GRCh38）：16:14,309,284-14,309,370（来自 NCBI）

▼ 说明

微小 RNA（miRNA），例如 MIR365A，是高度保守的小非编码 RNA，可通过降解或翻译抑制其靶 mRNA 在转录后抑制基因表达（Qin et al., 2011）。

▼ 克隆与表达

徐等人（2011）报道了成熟的人MIR365A序列为UAAUGCCCCUAAAAAAUCCUUAU。

通过数据库和 RT-PCR 分析，Sun 等人（2011）表明，位于小鼠 16 号染色体 5 kb 区域内的小鼠 Mir365 和 Mir193b（614734）是共转录的。 14个小鼠组织的实时PCR显示Mir193b和Mir365在棕色脂肪中高表达。 Mir365在附睾白色脂肪中也高表达，但在其他组织（包括皮下白色脂肪）中仅弱表达。 Mir193b 和 Mir365 在培养的棕色脂肪细胞的脂肪形成过程中均高度表达。

▼ 基因结构

徐等人（2011）鉴定了串联 MIR193B 和 MIR365A 基因上游的转录起始位点。他们在共同启动子区域内鉴定了 SP1（189906）和 NF-kappa-B（参见 164011）的功能结合位点。

▼ 测绘

Hartz（2012）根据成熟 MIR365A 序列（UAAUGCCCCUAAAAAAUCCUUAU）与基因组序列（GRCh37）的比对，将 MIR365A 基因对应到染色体 16p13.12。

徐等人（2011）表明 MIR193B 和 MIR365A 基因在 16 号染色体上非常接近。

孙等人（2011）将 Mir193b 和 Mir365a 基因定位在小鼠 16 号染色体上，彼此相距约 5 kb。

▼ 基因功能

徐等人（2011）确定 MIR365 是 IL6（147620）的直接负调节因子，IL6 是一种参与免疫反应、造血和炎症的多效细胞因子。包含 MIR365 前体或合成 MIR365 模拟物的 DNA 构建体的转染剂量依赖性地抑制 HEK293 细胞中 IL6 报告基因的表达，并抑制刺激物诱导的 HeLa 细胞分泌 IL6。抗 MIR365 构建体具有相反的效果。 MIR365 模拟物和 MIR365 抑制剂都不影响 IL6 mRNA 表达，表明 MIR365 抑制 IL6 翻译。 IL6 3-prime UTR 包含 MIR365 种子序列的推定结合位点，并且该结合位点在脊椎动物中广泛保守。结合位点内的突变消除了 MIR365 模拟物和 MIR365 抑制剂的作用。

Sun 等人使用实时 PCR（2011）发现，在从小鼠肩胛间棕色脂肪培养的基质血管细胞和棕色前脂肪细胞中分化时，Mir193b 和 Mir365 的表达显着上调。当在诱导棕色脂肪分化过程中引入时，靶向 Mir193a（614733）、Mir193b 或 Mir365 的 antagomir 会减少培养细胞中的脂质积累和脂肪形成标记物的表达。然而，分化后敲低这些 miRNA 的效果甚微。 Mir193a、Mir193b 或 Mir365 的表达抑制小鼠 C2C12 成肌细胞分化为多核肌管。染色质免疫沉淀分析显示，棕色脂肪特异性转录因子 Ppar-α（PPARA; 170998）直接结合 Mir193b-Mir365 的启动子区域。孙等人（2011）得出的结论是，Mir193b-Mir365 是棕色脂肪分化的重要调节剂，部分通过抑制肌生成来发挥作用。

使用微阵列分析和定量实时 PCR，Qin 等人（2011）发现MIR365的表达是由人脐静脉内皮细胞（HUVEC）中的氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导的。 ox-LDL 对 MIR365 的诱导伴随着细胞凋亡的诱导以及抗凋亡蛋白 BCL2 表达的降低（151430）。生物信息分析将 BCL2 确定为潜在的 MIR365 靶点。用 MIR365 抑制剂转染 HUVEC 会剂量依赖性地减弱 ox-LDL 对 BCL2 mRNA 和蛋白表达的抑制作用，并减少细胞对 ox-LDL 的凋亡反应。