锚蛋白重复和包含 FYVE 结构域的蛋白 1; ANKFY1

锚蛋白重复序列与锌指基序相连；ANKHZN
KIAA1255

HGNC 批准的基因符号：ANKFY1

细胞遗传学定位：17p13.2 基因组坐标（GRCh38）：17:4,163,819-4,263,978（来自 NCBI）

▼ 描述

ANKFY1 包含多个蛋白质相互作用结构域，并与参与囊泡转移的许多酿酒酵母蛋白质具有显着的同一性（Kuriyama 等，2000）。

▼ 克隆和表达

Ito 等人（1999）克隆了小鼠 Ankfy1，他们将其命名为 Ankhzn。推导的 1,184 个氨基酸蛋白质的表观分子质量为 130 kD。Ankhzn 包含一个 N 端卷曲螺旋结构域、一个 BTB/POZ 结构域、17 个锚蛋白重复序列和一个 C 端锌指基序。锚蛋白重复序列被分成N端一半的一组4个重复序列和C端一半的13个重复序列组。伊藤等人（1999）确定存在一种可溶形式的 Ankhzn 和一种与内体结合的形式。

Nagase 等人通过对从按大小分级的成人脑 cDNA 文库获得的克隆进行测序，（1999）克隆了 ANKFY1，他们将其命名为 KIAA1255。推导的蛋白质与小鼠 Ankhzn 有 88% 的同一性。RT-PCR ELISA 检测到在整个成人大脑中高表达，在所有其他组织和检查的特定大脑区域（包括胎儿大脑）中检测到中等表达。

Kuriyama 等人通过搜索数据库寻找与小鼠 Ankhzn 具有同源性的序列，然后进行 PCR（2000）从胎儿大脑 cDNA 文库中克隆了 ANKHZN。推导的 1,166 个氨基酸蛋白质的计算分子量约为 128 kD。ANKHZN 与小鼠 Ankhzn 具有 85% 的同一性，并且两种蛋白具有相同的结构域结构。栗山等人（2000）指出，C 端锌指（FYVE）结构域包含 8 个潜在的 Zn（2+）配位半胱氨酸残基，可结合 2 个 Zn（2+）离子，在与细胞内转移相关的蛋白质中非常保守。Northern 印迹分析在人和小鼠大脑中均检测到 7 kb 的转录物。RT-PCR 检测到所有检查组织中的表达。人肾的亚细胞分离回收了可溶性和膜级分中的 ANKHZN。

使用原位杂交，Weng 等人（2016）表明Ankfy1在小鼠早期发育过程中在神经干/前体细胞中特异性表达，在中枢神经系统的心室区表达。

▼ 基因结构

Kuriyama 等人（2000）确定 ANKFY1 基因包含 25 个外显子。

▼

通过辐射混合分析进行绘图，Nagase 等人（1999）将 ANKFY1 基因定位到 17 号染色体。通过辐射杂交分析和 FISH，Kuriyama 等人（2000）将 ANKFY1 基因定位到染色体 17p13。Southern印迹分析表明ANKFY1是一个单拷贝基因。

▼ 基因功能

Hermle 等人（2018）证明 ANKFY1 定位于足细胞系的细胞内囊泡。ANKFY1 与 RAB5（179512）和 GAPVD1（611714）共定位并显示出结合。这些发现表明 RAB5 在调节和内体功能中发挥作用。

田中等人（2020）表明 ANKFY1 敲低可抑制人视网膜微血管内皮细胞（HRMEC）的增殖和迁移。ANKFY1 敲低降低了 VEGFR2（191306）的细胞表面表达并减弱了下游 AKT（164730）/eNOS（NOS3; 163729）信号传导，但不诱导细胞凋亡。

▼ 分子遗传学

关联有待确认

Hermle 等人在 2 名同胞中，出生于印度父母（家庭 B1027），在 8 岁和 11 岁时出现肾病综合征（参见，例如 NPHS1, 256300）（2018）在 ANKFY1 基因的外显子 2 中发现了一个纯合错义变体（R95L）。该变异是通过全外显子组测序发现并经桑格测序证实的，与该家族中的疾病分离。它不存在于 gnomAD 数据库中。这些患者属于接受全外显子组测序的 665 名肾病综合征患者的一部分。体外研究表明，与对照相比，R95L 变体与活性 RAB5 的结合减少。ANKFY1 的敲低会损害足细胞迁移，这可以通过表达野生型基因来挽救，但不能通过表达 R95L 变体来挽救。赫姆勒等人（2018）假设肾脏疾病是由 RAB5 调节缺陷引起的，可能存在内吞作用紊乱。1 名患者的肾活检显示局灶节段性肾小球硬化症（FSGS）。两名患者的肾功能均正常。

▼ 动物模型

翁等（2016）发现来自混合遗传背景的 Ankfy1 -/- 小鼠具有存活能力、可生育能力，并且在形态上与野生型小鼠相同，在发育和成年期间没有表型变化。然而，来自纯 C57BL/6 遗传背景的 Ankfy1 -/- 小鼠即使在回交 7 代之后也表现出胚胎致死性。作者得出的结论是，Ankfy1 在神经干/前体细胞中是可有可无的，但可能对小鼠早期胚胎发育至关重要，具体取决于遗传背景。

丁等人（2017）发现 C57BL/6 背景下的 Ankfy1 +/- 小鼠以预期的孟德尔比率出生，而 Ankfy1 -/- 小鼠在胚胎发生过程中死亡。Ankfy1 +/- 小鼠的大脑比野生型小，并且表现出异常步态，伴有进行性运动和小脑神经功能障碍，让人想起痉挛性共济失调 2（SPAX2; 611302）。免疫染色显示，Ankfy1 +/- 小鼠表现出浦肯野细胞早发性和进行性丧失，随后出现神经胶质增生。此外，Ankfy1 的缺失会破坏 Ankfy1 +/- 小脑中生长因子的表达。Ankfy1 +/- 小鼠培养的浦肯野细胞表现出形态学变化，树突长度较短，树突棘数量减少。Ankfy1 +/- 小脑中的浦肯野细胞变性是由于 Ankfy1 缺失引起的细胞凋亡。