核帽结合蛋白 2

在转录时将单甲基化帽结构添加到由 RNA 聚合酶 II 转录的 RNA。帽结构通过促进mRNA与细胞质中的核糖体结合来增强翻译。它在核事件中也很重要，例如前 mRNA 剪接和 RNA 的核输出，以及剪接体的形成。一种 80-kD 的核帽结合蛋白 NCBP1（ 600469 ） 是涉及帽依赖性核过程的一个因素。NCBP2 与 NCBP1 形成复合物，这两种蛋白质都是结合帽结构所必需的（Kataoka 等人，1995 年）。

▼ 克隆与表达

通过使用以 NCBP1 作为诱饵的酵母 2-杂交相互作用陷阱系统筛选 HeLa 细胞 cDNA 文库，Kataoka 等人（1995）分离出一个编码 NCBP2 的 cDNA，他们称之为 NIP1。孤立地，Izaurralde 等人（1995）使用对应于纯化和微测序的 20-kD 帽结合蛋白的寡核苷酸引物，通过对 HeLa 细胞 cDNA 文库进行 PCR 分析，孤立出编码 NCBP2 的 cDNA，他们称之为 CBP20。推断的 156 个氨基酸的 NCBP2 蛋白与非洲爪蟾 Ncbp2 蛋白具有 84% 的氨基酸同一性，包含一个具有高度保守的 RNP1 和 RNP2 结构域的 RNP 基序。Northern 印迹分析检测到一个主要的 2.0 和一个次要的 0.8-kb NCBP2 转录物（Kataoka 等人，1995）。

▼ 基因功能

片冈等人（1995）证明 NCBP2 和 NCBP1 仅在相互复合时才与帽结构结合。

Izaurralde 等人（1995）表明 NCBP1 和 NCBP2 的抗体可以抑制它们与加帽 RNA 的相互作用。

通过对共沉淀的 HeLa 细胞蛋白进行质谱分析，Gebhardt 等人（2015）发现 NCBP2 优先与参与输出小核 RNA（snRNA） 的蛋白质相互作用，而其旁系同源物 NCBP3（ 616624） 优先与参与 mRNA 加工和输出的蛋白质相互作用。RNA 免疫沉淀显示 NCBP2 和 NCBP3 都与加帽的 mRNA 相互作用，但 snRNA、长基因间非编码 RNA 和反义 RNA 优先结合 NCBP2。单独敲除 NCBP3 或 NCBP2 对 HeLa 细胞和 NIH3T3 小鼠成纤维细胞的生长或 mRNA 核积累几乎没有影响。然而，敲低 NCBP2 和 NCBP3 会降低细胞生长，减少 NCBP1 与 N7 甲基化 GTP 的关联，并导致 mRNA 的核积累。在 HeLa 细胞中敲除 NCPB3 而不是 NCBP2 会提高受感染的水泡性口炎病毒、Semliki 森林病毒和脑心肌炎病毒的细胞质复制。格布哈特等人（2015）得出的结论是 NCBP2 和 NCBP3 在稳态条件下可以相互补偿，但 NCBP3 是特别需要限制病毒感染的程度。

▼ 生化特征

马扎等人（2001）确定了人类核帽结合复合物的 2 埃晶体结构。该结构表明，大亚基 CBP80 有 3 个结构域，每个结构域都包含连续的螺旋发夹结构，类似于在其他几种参与 RNA 代谢的蛋白质中发现的所谓 MIF4G 结构域。小亚基 CBP20 具有 RNP 折叠并与 CBP80 的第二和第三结构域相关联。定点诱变揭示了 CBP20 的 4 个残基，这些残基对帽结合至关重要。

▼ 测绘

Hartz（2015）根据 NCBP2 序列（GenBank BC001255 ） 与基因组序列（GRCh38） 的比对，将 NCBP2 基因对应到染色体 3q29。