腺苷酸激酶 5
核苷单磷酸激酶,包括腺苷酸激酶,催化核苷三磷酸和单磷酸之间的可逆磷酸化。通过 EST 数据库搜索新的单磷酸核苷激酶,Van Rompay 等人(1999)鉴定了一种新的腺苷酸激酶 cDNA,命名为 AK5,编码推测的 198 个氨基酸的蛋白质,预测分子量为 22 kD。该蛋白质包含一个核苷三磷酸结合富含甘氨酸的区域、一个核苷单磷酸结合位点和结合后在底物上关闭的盖子结构域。它与 AK1( 103000 )、AK2( 103020 ) 和 AK4( 609290 )共享 58%、26% 和 25% 的结构同一性), 分别。Northern 印迹分析检测到 2.4-和 4.0-kb 转录本的脑特异性表达。使用 AK5-GFP 融合蛋白的转染实验证明了在胞质溶胶中的定位。
通过数据库分析,Solaroli 等人(2009)确定了 AK5 的 3 个变体,它们在起始密码子的利用方面有所不同。推导出的全长 562 个氨基酸的蛋白质具有 2 个由 71 个氨基酸分隔的腺苷酸激酶结构域。这两个催化结构域,作者称为 AK5p1 和 AK5p2,都包含一个富含甘氨酸的 p 环、一个 NMP 结合结构域和一个 LID 结构域。一种变体编码包含两个腺苷酸激酶结构域的 536 个氨基酸的蛋白质,但与全长 AK5 相比,它的 N 末端被截短。第三个转录本与Van Rompay 等人描述的相同(1999)并编码一个推断的 198 个氨基酸的蛋白质,该蛋白质仅包含 AK5p2。索拉罗利等人(2009)鉴定了哺乳动物中全长AK5的直系同源物。小鼠和人类 AK5 具有 94% 的氨基酸同一性。
▼ 基因功能
范龙佩等人(1999)证明 AK5 的底物特异性取决于磷酸盐供体。AK5 以同等效率磷酸化 AMP 和 dAMP,ATP 作为磷酸供体,AMP、CMP 和 dCMP 以 GTP 作为磷酸供体。范龙佩等人(1999)注意到 AK5 的底物特异性与密切相关的 UMP/CMP 激酶的底物特异性重叠。
Solaroli 等人使用薄层色谱法(2009)发现全长 AK5 和分离的 AK5p1 结构域以 ATP 或 GTP 作为磷酸盐供体磷酸化 AMP、dAMP、CMP 和 dCMP。AK5p2 显示出与全长 AK5 和 AK5p1 相似的底物偏好,但它不使用 GTP 作为磷酸供体磷酸化 dAMP,也不使用 ATP 作为磷酸供体磷酸化 dCMP。
▼ 基因结构
索拉罗利等人(2009)确定 AK5 基因包含 14 个外显子,跨度为 278 kb。
▼ 测绘
通过辐射混合分析,Van Rompay 等人(1999)将 AK5 基因定位到染色体 1p31。