酸性簇蛋白，33-KD

Zeitlmann 等人在 Jurkat T 细胞 cDNA 文库的酵母 2 杂交筛选中使用 CD4（ 186940 ） 的细胞质尾部作为诱饵，然后进行 PCR（2001）克隆 ACP33。推导出的 308 个氨基酸蛋白质在 N 末端附近含有 4 个天冬氨酸簇和在 α/β 折叠细菌水解酶中保守的结构元件。它没有定位信号、前导序列或跨膜螺旋。Northern印迹分析检测到2.1-kb ACP33 转录物在所有检查的组织中以相当的水平表达。蛋白质印迹分析在所有检查的人和鼠细胞系中检测到表观分子量为 33 kD 的 ACP33。CD4 阳性 T 细胞系的分级分离发现内源性和瞬时表达的 ACP33 均匀分布在可溶性细胞溶质部分和颗粒部分之间。免疫荧光定位显示 ACP33 部分定位于胞质溶胶中，也积聚在细胞内囊泡区室中，

使用蛋白质印迹分析，Hanna 和 Blackstone（2009）发现内源性 maspardin 在 HeLa 细胞中的高表达。免疫组织化学分析将maspardin 定位在整个细胞质中，并在核周区域聚集。Maspardin 与细胞质和几种膜成分分馏，但与细胞核无关，主要与反式高尔基体和内吞区室的标志物相关。

▼ 基因功能

通过免疫共沉淀实验，Zeitlmann 等人（2001）证实内源性 CD4 在 ACP33 转染的 CD4 阳性 T 细胞系中与 ACP33 相互作用。通过分析各种截断和点突变体之间的相互作用，他们确定了相互作用需要CD4的C末端和ACP33的α/β折叠内的ser109的最后2个保守疏水氨基酸。CD4 的最后 2 个氨基酸的截断增强了 T 细胞受体（见186880）诱导的 T 细胞活化，表明 ACP33 是 CD4 活性的负调节剂。CD4-ACP33 复合物也可以共沉淀 LCK（ 153390）。ACP33 和 LCK 之间没有直接的相互作用，表明 ACP33 和 LCK 孤立地与 CD4 相互作用。

Hanna 和 Blackstone（2009）使用共免疫沉淀分析和蛋白质下拉分析表明，内源性 maspardin 和 ALDH16A1（ 613358 ） 直接相互作用。

▼ 测绘

通过基因组序列分析，辛普森等人（2003）将 ACP33 基因对应到染色体 15q22.31。

▼ 分子遗传学

Simpson 等人在广泛的阿米什族谱系分离 Mast 综合征（ 248900 ） 中，这是一种“复杂”形式的常染色体隐性遗传性痉挛性截瘫（SPG21），与痴呆和其他 CNS 异常的更晚期病例相关（2003）将疾病位点对应到包含 3 个基因的 15q22.31 的小区间。3 个转录本的序列分析显示，所有 14 个受影响的成员都是纯合子，在 ACP33 基因中插入 1-bp（601insA；608181.0001）。辛普森等人（2003 年）指定基因产物 maspardin（Mast 综合征、痉挛性截瘫、常染色体隐性遗传、痴呆）。

在 SPG21 的 2 个日本兄弟中，Ishiura 等人（2014）在 ACP33 基因（A108P; 608181.0002 ） 中发现了一个纯合错义突变。未进行变体的功能研究。先证者是从 129 名日本痉挛性截瘫患者中确定的，他们分析了候选痉挛性截瘫基因的突变。

▼ 等位基因变体（ 2 示例）：

.0001 痉挛性截瘫 21
ACP33，1-BP INS，601A
在Cross 和 McKusick（1967）首次发现称为 Mast 综合征（SPG21; 248900 ） 的复杂痉挛性截瘫形式的阿米什人谱系的受影响成员中，Simpson 等人（2003）在 ACP33 基因中发现了一个纯合的 1-bp 插入（601insA），导致蛋白质的移码和过早终止。

.0002 痉挛性截瘫 21
ACP33、ALA108PRO
在 2 名常染色体隐性痉挛性截瘫 21（SPG21; 248900 ） 的日本兄弟中，Ishiura 等人（2014 年）在 ACP33 基因的外显子 4 中鉴定出纯合 c.322G-C 颠换，导致在 α/β 水解酶结构域活性位点旁边的高度保守残基处发生 ala108 到 pro（A108P） 取代。未进行变体的功能研究。先证者是从 129 名日本痉挛性截瘫患者中确定的，他们分析了候选痉挛性截瘫基因的突变。兄弟俩在五六十岁时因痉挛而出现步态障碍，这比Cross 和 McKusick（1967）以及Simpson 等人报道的阿米什患者要晚得多（2003）谁有不同的 ACP33 突变（608181.0001）。两者都有认知能力下降和失用，先证者的脑部MRI显示胼胝体薄，额颞叶萎缩。两名患者均未出现锥体外系、小脑或延髓体征，这也与在阿米什患者中观察到的不同。