羧肽酶,类蛋白素

Mahoney 等人使用差异展示 PCR 来鉴定巨噬细胞限制基因(2001)从人脾 cDNA 中鉴定并随后克隆了一种新的丝氨酸羧肽酶,他们称之为 CPVL。CPVL 编码推定的 476 个氨基酸的蛋白质,具有 22 个氨基酸的推定信号肽、4 个潜在的 N-连接糖基化位点、完整的丝氨酸羧肽酶活性位点,并且与来自高等和低等真核生物的大量丝氨酸羧肽酶高度相似。CPVL 与蚊子卵巢中表达的卵黄羧肽酶蛋白具有 43% 的序列同一性。RT-PCR 显示单核细胞系中强烈的 CPVL 表达,但在代表 B 细胞、成纤维细胞或上皮细胞的细胞系中没有。人体组织的 Northern 印迹分析检测到富含单核细胞/巨噬细胞的来源(包括脾脏、白细胞和胎盘)以及心脏和肾脏中的 CPVL 转录物,表明 CPVL 在免疫系统之外的作用。CPVL 兔抗血清在来自转染细胞的裂解物的蛋白质印迹上检测到约 67 kD 的蛋白质,但在原代人巨噬细胞中检测到 58-kD 条带。马奥尼等人(2001)推测这种差异可能代表从巨噬细胞中的 CPVL 中去除了前肽。

▼ 基因功能

通过蛋白质印迹分析,Mahoney 等人(2001)发现 CPVL 的表达是在单核细胞成熟为巨噬细胞的过程中被诱导的。尽管作者在单核细胞中没有发现 CPVL 蛋白,但 Northern 印迹分析表明,单核细胞表达 CPVL mRNA 的量与成熟巨噬细胞相当,这意味着 CPVL 蛋白的巨噬细胞谱系表达在翻译水平而非转录水平上受到调节。蛋白质印迹未检测到淋巴细胞或中性粒细胞中的 CPVL 蛋白。

▼ 基因结构

马奥尼等人(2001)确定 CPVL 基因包含 13 个外显子并且包含超过 150 kb。内含子的大小变化很大,从 398 bp 到近 35 kb。

▼ 测绘

通过序列分析,Mahoney 等人(2001)将 CPVL 基因对应到染色体 7p15-p14。