酰基辅酶A蜡醇酰基转移酶2

皮脂和睑脂富含脂质并且含有高百分比的蜡单酯。蜡合酶，如 AWAT2，通过酯键将长链脂肪醇与脂肪酰基-CoA 结合来合成蜡单酯（Cheng 和 Russell，2004 年）。

▼ 克隆与表达

Cheng 和 Russell（2004）克隆了小鼠 Awat2，他们称之为蜡合酶。通过在数据库中搜索与小鼠 Awat2 相似的序列，然后对成人皮肤 cDNA 文库进行 PCR，他们克隆了人类 AWAT2。小鼠和人类蛋白质都含有 333 个氨基酸，它们具有 84% 的序列同一性。对 20 种小鼠组织进行实时 PCR 检测，在包皮腺和眼睑中检测到强烈的表达，其次是胸腺、脾脏、睾丸、皮肤和心脏。所有其他组织几乎没有或没有蜡合酶表达。免疫组织化学分析显示，表位标记的小鼠 Awat2 在转染的中国仓鼠卵巢细胞的内质网中表达。

通过在数据库中搜索与 DGAT2（ 606983 ） 相似的序列，然后对肺 cDNA 文库进行嵌套 PCR，Turkish 等人（2005）克隆了 AWAT2，他们最初将其称为 DC4。推导出的 334 个氨基酸蛋白质的计算分子量为 38.2 kD，与 DGAT2 具有 48% 的同一性。AWAT2 具有一个 N 端信号序列、2 个跨膜区、一个二酰基甘油酰基转移酶（DGAT） 结构域、一个 N-糖基化位点、一个潜在的酪氨酸硫酸化位点和 2 个潜在的磷酸化位点。土耳其语等（2005）还克隆了缺少外显子 5 的 AWAT2 剪接变体，由于引入了早期终止密码子，导致蛋白质截短。巢式 PCR 在除胎盘外的所有检查组织中检测到 AWAT2 表达。人皮肤的原位杂交检测到AWAT2在皮脂腺中的表达，它位于未分化的外周皮脂细胞的细胞质中。

日元等人（2005）发现他们称为 MFAT 的全长 AWAT2 具有 3 个预测的跨膜结构域、一个酰基转移酶结构域、一个 N-糖基化位点、3 个推定的磷酸化位点和 3 个肉豆蔻酰化位点。Northern 印迹分析检测到仅在皮肤中表达的大约 1.5 和 2.2 kb 的主要转录物。定量 PCR 检测到肺和睾丸中的 MFAT 表达，尽管 mRNA 水平低于皮肤中的 1%。

▼ 基因功能

通过分析转染人和小鼠构建体的 HEK293 细胞的膜部分，Cheng 和 Russell（2004）确定人和小鼠 AWAT2 都催化了直链饱和、不饱和和多不饱和脂肪醇和酸形成蜡单酯。

土耳其语等（2005）表明在酵母微粒体中表达的人类 AWAT2 将放射性标记的油酰辅酶 A 掺入蜡酯中。它还将放射性标记的油酸盐和棕榈酸盐更弱地掺入甘油三酯中。在蜡酯的形成中，AWAT2 比 C10 饱和醇更喜欢 C16 和 C18 不饱和醇作为酰基受体。AWAT2 使用不饱和以及饱和的酰基辅酶 A，包括 C18:1，作为酰基供体。

Yen 等人使用多种酰基受体和棕榈酰辅酶 A 作为酰基供体（2005）发现人类 MFAT 在体外的昆虫细胞、分离的哺乳动物细胞膜和完整细胞中表现出广泛的酯化反应。MFAT 使用单酰基甘油、长链醇和视黄醇作为酰基受体底物，分别合成二酰基甘油、蜡单酯和视黄酯。由于 MFAT 表达在人体皮肤中很突出，Yen 等人（2005）假设 MFAT 通过形成皮肤表面的脂质和蜡来促进皮肤的屏障功能。

▼ 基因结构

Cheng 和 Russell（2004）确定 AWAT2 基因包含 7 个外显子，跨度约为 8.2 kb。

▼ 测绘

通过基因组序列分析，Cheng 和 Russell（2004）将 AWAT2 基因定位到染色体 Xq13.1。他们将小鼠 Awat2 基因定位到染色体 XC3 的一个区域，该区域与人类染色体 Xq13.1 具有同源性。

土耳其语等（2005）报道 AWAT2 位于一个 DGAT 基因簇中，该基因簇包括 AWAT1（ 300924 ） 和 DGAT2L6（ 300926 ）。