基本减数分裂核酸内切酶 1,S. Pombe,同源物,1
EME1 和 MUS81( 606591 ) 形成核酸内切酶复合物,可切割分支 DNA 结构,尤其是在 DNA 复制停滞期间产生的结构( Abraham et al., 2003 )。
▼ 克隆与表达
通过搜索 S. pombe Eme1 的同源物,然后进行 PCR,Ciccia 等人(2003)克隆了 EME1 和 EME2( 610886 )。推导出的 583 个氨基酸的 EME1 蛋白的计算分子量为 65 kD,与 EME2 具有 44% 的同一性。
亚伯拉罕等人(2003)克隆了小鼠 EME1,它编码一个 570 个氨基酸的蛋白质,与人类 EME1 有 66% 的同一性。Northern印迹分析检测到Eme1在所有检查的胚胎和成年小鼠组织中的表达。
▼ 基因功能
Ciccia 等人(2003)表明重组 EME1 与重组 MUS81 相互作用。异二聚体对 3 素皮瓣和复制叉底物具有 DNA 内切酶活性,但对张开臂或 Holliday 结底物的活性要低得多。单独的 EME1 和 MUS81 均未显示出核酸酶活性。
亚伯拉罕等人(2003)发现小鼠 Eme1/Mus81 异二聚体在体外优先切割 3 素数瓣结构和复制叉而不是 Holliday 结。Eme1 -/- 小鼠胚胎干细胞的活力、生长速率或 DNA 损伤激活的细胞周期检查点的激活没有变化。然而,Eme1 的缺失导致非整倍性增加,DNA 损伤后姐妹染色单体交换增加,以及自发染色体异常水平增加,包括断裂、片段、染色体融合和双着丝粒染色体。与野生型细胞相比,Eme1 -/- 细胞在用 DNA 交联剂丝裂霉素 C 处理后染色体异常增加了 2 倍。Abraham等人(2003)得出结论,EME1在DNA修复和基因组完整性维持中起关键作用。
▼ 测绘
通过基因组序列分析,Ciccia 等人(2003)将 EME1 基因对应到染色体 17q21.3。亚伯拉罕等人(2003)将小鼠 Eme1 基因对应到 11C 号染色体。