Nivelon-Nivelon-Mabille 综合征

黑色素瘤是一种免疫原性相对较高的癌症，对白细胞介素 2（IL2; 147680 ） 或肿瘤浸润淋巴细胞（TIL） 治疗敏感。黑色素瘤特异性抗原，例如 MART1（MLANA; 605513 ） 和特异性肽是肿瘤治疗的目标。Kawakami 等人使用黑色素瘤细胞系的 cDNA 表达克隆并使用 HLA-A1 限制性 TIL 进行筛选（2001）分离出编码 MART2 的 cDNA。推导出的 MART2 蛋白含有 453 个氨基酸。数据库分析揭示了一个同源 cDNA（GenBank AK001586） 从编码 493 个氨基酸的蛋白质以及源自 1q32 的基因组 DNA 的畸胎癌中分离。RT-PCR 和 Northern 印迹分析检测到在正常组织和癌细胞系中普遍存在的表达。从黑色素瘤细胞系中分离的 MART2 序列的特征在于存在 G 到 A 转换，导致 P 环（FLGGNEVGKTY） 中的 leu 后出现 gly 到 glu 取代，这在 T 细胞中没有发生来自同一个病人。在源自畸胎癌细胞系的 MART2 序列中发现了不同的氨基酸取代（asn 到 asp）。功能分析确定 MART2 中的突变 P 环缺乏在野生型蛋白中观察到的 GTP 结合活性，表明可能参与黑色素瘤的发展；然而，190020 ） P 环突变。进一步分析表明，HLA-A1 限制性 TIL 识别突变黑色素瘤 P 环序列但不识别野生型 P 环序列，可能是由于 HLA-A1 结合抗原突变肽中存在带负电荷的锚氨基酸.

果蝇“瘦刺猬”（ski1）编码一种酶，该酶在分泌途径中起作用以催化“刺猬”的 N 末端棕榈酰化（参见600725）。夏蒙等人（2001）对果蝇刺猬信号通路的成分进行了遗传筛选，发现“瘦刺猬”的突变产生了典型的由刺猬或“无翅”功能丧失引起的表型。ski1 蛋白与膜结合的 O-酰基转移酶具有短但重要的序列同源性。

卡利尔等人（2014 年）在人类胎儿组织中进行了表达分析，并在所研究的大多数器官中观察到不同水平的 HHAT 表达，包括睾丸和卵巢以及肺、心脏、肠、舌和肾。成人睾丸中的 qRT-PCR 揭示了支持细胞中高水平的 HHAT 表达。在小鼠中，在性别确定之前，在胚胎第（E） 10.5 天，在 XX 和 XY 性腺的体细胞祖细胞中观察到 Hhat 转录物。睾丸分化后，E13.5 使 XY SF1+ 细胞中的 Hhat 转录水平增加了 2.5 倍。作者认为 HHAT 在性别决定时在支持细胞谱系中表达，后来在支持细胞中表达。

▼ 分子遗传学

在一名患有 Nivelon-Nivelon-Mabille 综合征（NNMS; 600092 ）的 46,XY 女性患者中， Callier 等人（2014）确定了 HHAT 基因（G287V; 605743.0001 ） 错义突变的纯合性，该突变在她未受影响的父母中以杂合性存在，但在 dbSNP 数据库中未发现。功能分析显示 G287V 突变体对刺猬蛋白的棕榈酰化缺失。

在患有 NNMS 的两个 46、XX 沙特阿拉伯姐妹中，Abdel-Salam 等人（2019）确定了 HHAT 基因（L257P; 605743.0002 ） 错义突变的纯合性，该突变存在于其近亲父母的杂合性中，但在其健康的姐姐或沙特阿拉伯对照中未发现。

▼ 动物模型

丹尼斯等人（2012）研究了 'Creface' 转基因小鼠品系，其中核定位 Cre 重组酶由特定的 TFAP2A（ 107580） 增强元素。使用基于 PCR 的 DNA 步行和作图方法，作者确定 Creface 转基因已整合到 Hhat 基因的内含子 9 的核苷酸位置 22949，并证实 Hhat 表达在纯合 Creface 突变胚胎中显着减少或缺失。没有存活的出生后 Hhat Creface/Creface 突变小鼠；突变胚胎的表型包括前脑全畸形；颅面间充质广泛凋亡；额鼻、中外侧、上颌和下颌隆突发育不全；面部突起和颅神经节的图案缺陷；和减少软骨形成和成骨。这些异常共同导致中面发育不全和下颌发育不全。除了全前脑畸形和无颌畸形，纯合突变胚胎除了颅骨的腹侧骨骼外，其他所有骨骼均缺失，鼻骨、额骨、顶骨和顶间骨完全发育不全，以及基底枕骨、枕骨和基底蝶骨严重发育不全。作者将 Hhat Creface/Creface 指定为一种新的颅骨-前脑无颌畸形小鼠模型。

卡利尔等人（2014）分析了 Hhat 敲除小鼠模型 Hhat Creface/Creface 小鼠的睾丸发育。在性别决定期间，性腺发育的早期阶段通常发生在胚胎日（E） 11.5 之前，并且睾丸程序的启动不受影响。然而，到 E12.5，XY 胚胎的睾丸发育显着受损，睾丸大小大量减少；睾丸索的数量减少，其形状和直径也出现不规则；几乎完全没有胎儿间质细胞。作者得出结论，HHAT 不是支持细胞定型所必需的，但它在睾丸索的正常形成和睾丸间质细胞的分化中发挥作用。

▼ 等位基因变体（ 2 示例）：

.0001 NIVELON-NIVELON-MABILLE 综合征
HHAT，GLY287VAL
在一名患有 Nivelon-Nivelon-Mabille 综合征（NNMS; 600092 ）的 46,XY 女性患者中， Callier 等人（2014）确定了 HHAT 基因中 c.860G-T 颠换（c.860G-T, NM_001122834） 的纯合性，导致长异构体中的 gly287-to-val（G287V） 取代（相当于 c.449G -T 颠换和 HHAT 短异构体中的 G150V 替代）。位于高度保守的膜结合 O-酰基转移酶（MBOAT） 结构域内的第六个预测跨膜结构域旁边的 G287 残基在物种间也得到很好的保守。先证者未受影响的父母是该变异的杂合子。使用 SSH 的体外棕榈酰化测定（ 600725） 分析 HHAT 活性表明，与野生型 HHAT 的稳健结合相比，没有将（125） I-碘棕榈酸酯与突变体结合到 SHH 中。使用 DHH（ 605423 ） 重复实验，这是唯一在性腺中表达的刺猬蛋白，作者证明 HHAT 直接棕榈酰化 DHH，并且 G287V 突变导致活性丧失。

.0002 NIVELON-NIVELON-MABILLE 综合征
HHAT，LEU257PRO
在两名患有 Nivelon-Nivelon-Mabille 综合征（NNMS; 600092 ）的 46,XY 沙特阿拉伯姐妹中， Abdel-Salam 等人（2019）确定了 HHAT 基因中 c.770T-C 转换（c.770T-C，NM_018194.5）的纯合性，导致 leu257 到 pro（L257P）取代。他们未受影响的近亲父母是该突变的杂合子，在他们健康的姐姐或内部全外显子组测序数据库中的 2,379 名沙特阿拉伯对照中未发现该突变。