粘蛋白 2

粘蛋白构成了一个与瞬时受体电位超家族同源的阳离子通道蛋白家族。在哺乳动物中，粘磷脂家族包括 3 个成员，MCOLN1（ 605248 ）、MCOLN2 和 MCOLN3（ 607400 ），它们表现出常见的 6 膜跨拓扑结构。哺乳动物粘蛋白的同源物存在于果蝇和秀丽隐杆线虫中（Karacsonyi 等人的总结，2007 年）。

▼ 克隆与表达

Di Palma 等人使用定位克隆策略来识别经典的半显性小鼠突变体 varitint-waddler（Va） 的突变基础（2002）确定了 Mcoln2 和 Mcoln3。发现 Mcoln3 基因的突变是导致 Va 小鼠表型的原因。然而，在 Mcoln2 基因中没有发现突变。

卡拉克索尼等人（2007）从人胎盘 cDNA 文库中克隆了全长 MCOLN2。推导出的 538 个氨基酸的蛋白质与孔区域中的 MCOLN1 和 MCOLN3 具有高度相似性，并具有预测确定离子特异性的 asp-asp（DD） 基序的保守性。转染的 HeLa 细胞的免疫荧光分析显示荧光标记的 MCOLN2 与 CD63（ 155740 ） 共定位，CD63 是晚期内体/溶酶体的标志物。在质膜和管状内体中也观察到较轻的 MCOLN2 染色，它们通过不依赖网格蛋白的途径参与 ARF6（ 600464 ） 调节的蛋白质循环。MCOLN2 与主要组织相容性复合物 I（MHCI；参见142800 ） 和 CD59（ 107271） 在管状内体中。

▼ 基因功能

通过用小鼠 Trpml3、鸡 Trpml2 和人 TRPML1 的各种组合转染人胚胎肾细胞，Venkatachalam等人（2006）表明每个 TRPML 可以与其他 TRPML 蛋白形成同源多聚体和异多聚体。当单独表达时，TRPML1 和 Trpml2 是溶酶体膜蛋白，而 Trpml3 保留在内质网中。相反，当 Trpml3 与 TRPML1 或 Trpml2 共表达时，它重新定位到溶酶体。TRPML1 或 Trpml2 的溶酶体靶向序列的突变或网格蛋白介导的内吞作用的破坏导致 TRPML1 和 Trpml2 错误定位到质膜，并且还导致 Trpml3 的质膜分布。Trpml3 不影响 TRPML1 或 Trpml2 的细胞内定位。

卡拉克索尼等人（2007）表明，当与 GTPase 缺陷型 ARF6 突变体共表达时，荧光标记的 MCOLN2 与 MHCI 和 CD59 一起在扩大的液泡结构中积累。MCOLN2 的过表达诱导 ARF6 的强烈激活，但不是 ARF1（ 103180 ）。MCOLN2 中保守的 DD 基序的突变并没有改变 CD59 从细胞表面的内化，但它显着减少了内化 CD59 循环回细胞表面，这表明 MCOLN2 突变体将内源性 MCOLN2 隔离到非活动通道中。通过小干扰 RNA 消耗内源性 HeLa 细胞 MCOLN2 也延迟了 CD59 再循环到细胞表面。当与 RAB5 的组成型活性突变体（RAB5A；179512），一种参与网格蛋白依赖性细胞表面蛋白内吞作用的 GTP 酶，MCOLN2 在含有 CD59 和 CD63 的扩大的早期内体中积累。卡拉克索尼等人（2007 年）得出结论，MCOLN2 参与了对网格蛋白依赖性和网格蛋白非依赖性货物蛋白转移的调节。

▼ 测绘

Hartz（2009）基于 MCOLN2 序列（GenBank AY083533 ） 与基因组序列（GRCh37） 的比对，将 MCOLN2 基因对应到染色体 1p22.3。

迪帕尔马等人（2002）将小鼠 Mcoln2 和 Mcoln3 基因对应到远端染色体 3。