膜相关环指蛋白 8

MARCH8 是膜结合 E3 泛素连接酶 MARCH 家族的成员（ EC 6.3.2.19 ）。MARCH 酶添加泛素（参见191339）以靶向底物蛋白中的赖氨酸，从而发出膜隔室之间的囊泡转运信号。MARCH8 诱导几种膜糖蛋白的内化（Goto 等人，2003 年；Bartee 等人，2004 年）。

▼ 克隆与表达

卡波西肉瘤相关疱疹病毒（KSHV） 免疫识别（MIR） 蛋白调节剂作为免疫识别相关分子的 E3 泛素连接酶发挥作用。MIR 催化结构域是 BKS（牛疱疹病毒 4、KSHV 和猪痘病毒）亚类的植物同源结构域（PHD），或 BKS-PHD 结构域。Goto 等人通过在数据库中搜索包含 BKS-PHD 结构域的蛋白质，然后对人类 BJAB B 细胞 cDNA 文库进行 PCR 和 5-prime RACE（2003）克隆了 MARCH8，他们将其命名为 MIR。推导出的 291 个氨基酸的蛋白质具有 N 端 BKS-PHD 结构域，然后是 2 个跨膜结构域。预测 N 和 C 末端都是细胞质的。RT-PCR 分析检测到 MIR 在新生儿脑和成人淋巴结、脾脏和胎盘中的表达，但在检查的其他组织中未检测到。它也在单核细胞和未成熟树突状细胞中检测到，但在淋巴细胞中未检测到。

痘病毒和 γ-2 疱疹病毒表达称为 K3 蛋白的泛素连接酶，可抑制糖蛋白的表面表达，包括主要组织相容性复合物（MHC） I 类分子（见142800）。通过在数据库中搜索与病毒 K3 蛋白功能域相似的序列，Bartee 等人（2004）鉴定了 9 种人类 MARCH 蛋白，包括 MARCH8。推断的 MARCH8 蛋白包含一个短的 N 末端，然后是一个 RING-CH 结构域和 2 个跨膜结构域。MARCH8 与 MARCH1 共享超过 90% 的同一性（ 613331） 在 RING-CH 和跨膜结构域中。实时 PCR 分析检测到 MARCH8 在所有检查的人体组织中的可变表达，在肺中表达最高。免疫荧光分析显示表位标记的 MARCH8 以点状模式表达，与内吞或溶酶体囊泡部分重叠。

使用 RT-PCR，De Gassart 等人（2008）在未成熟和成熟的人类树突状细胞以及 HeLa 和人类 B 细胞系中检测到高 MARCH8 表达，而在单核细胞中表达较低。

▼ 基因功能

后藤等人（2003）表明，人类细胞中 MIR 的过表达下调了 MHC II 的共刺激分子B7-2（CD86; 601020 ） 的表面表达（见142860） 介导的抗原呈递。MIR 的过表达不会下调 MHC I 分子的表面表达。MIR 的 BKS-PHD 结构域在体外泛素化测定中显示出泛素连接酶活性，并且表面 B7-2 的下调需要 B7-2 在细胞质赖氨酸上的泛素化，然后是 B7-2 的溶酶体降解。突变分析表明，MIR 的泛素连接酶活性和表面 B7-2 的下调需要 MIR 的 BKS-PHD 结构域内保守的锌结合半胱氨酸。免疫沉淀分析显示，野生型 MIR 和连接酶死亡的 MIR 突变体都直接与 B7-2 相互作用。

巴蒂等人（2004）表明，在含有泛素、ATP、E1 泛素激活酶（见 UBE1； 314370）和 E2 泛素结合酶 UBCH2（UBE2H）的反应中，MARCH8 的分离 RING-CH 结构域作为 E3 泛素连接酶发挥作用; 601082 ） 或 UBCH5A（UBE2D1; 602961 ），但不是 UBCH3（CDC34; 116948 ）。转染 HeLa 细胞后，MARCH8 下调共转染的 B7.2 和内源性 TFR（TFRC; 190010 ） 和 FAS（TNFRSF6; 134637 ） 的表面表达。

锡伯杜等人（2008）表明，将 MARCH1 和 MARCH8 转染到 CD4（ 186940 ） 阳性人单核细胞中会下调所有 3 种 MHC II 同种型的表面表达，即 HLA-DR（参见 HLA-DRA；142860）、-DQ（参见 HLA-DQA1 ; 146880 ） 和 -DP（参见 HLA-DPA1; 142880 ）。

▼ 测绘

Hartz（2010）基于 MARCH8 序列（GenBank BC025394 ） 与基因组序列（GRCh37） 的比对，将 MARCH8 基因对应到染色体 10q11.21。