半乳糖激酶2
李等人(1992)试图通过其替代酵母中的酶的能力来克隆人半乳糖激酶基因。他们使用了一种方法,通过酵母中的互补或其他功能活性来识别哺乳动物的 cDNA。
Pastuszak 等人(1996)从猪肾中分离出一种 N-乙酰半乳糖胺(GalNAc) 激酶,发现这种猪酶的部分肽序列与人 GK2 有 90% 的相似性。酶测定表明,当这种糖以高浓度存在时,人 GK2 是一种具有半乳糖激酶活性的高效 GalNAc 激酶。因此,Pastuszak 等人(1996)指出,虽然人类 GK2 是根据其半乳糖激酶活性鉴定的,但它实际上是一种 GalNAc 激酶。
▼ 测绘
李等人(1992)出人意料地发现,补充半乳糖激酶缺陷型酿酒酵母菌株的基因不是定位到 17 号染色体( 604313 ),而是定位到 15 号染色体,因此质疑 17 上的 GK1 或 15 上的 GK2 中的哪个基因是半乳糖血症的半乳糖激酶缺乏形式的突变位点(见230200)。他们使用的策略可能被用于克隆影响已知酵母突变体的中间代谢的各种人类疾病基因(通过使用 PCR 分析来自一组人类-啮齿动物体细胞杂交体的基因组 DNA 来完成对 15 号染色体的定位。)