蛋白酶体 26S 亚基,ATP 酶
26S 蛋白酶体(见 PSMC1;602706)是一种多亚基蛋白酶复合物,由一个 20S 核心成分和两个 19S 调节复合物组成。PSMC2 是包含在调节复合物中的 6 种推定的 ATP 酶中的一种。PSMC2 最初被确定为与人类免疫缺陷病毒-1(HIV-1) 蛋白 Tat 协同作用的一种可能的细胞因子,该蛋白是病毒基因表达的有效激活剂。
▼ 克隆与表达
通过酵母 sgv1 缺陷突变体的反式互补,Shibuya 等人(1992)从新基因 MSS1 中分离出人类 cDNA。发现 MSS1 蛋白与人 TBP1 蛋白(PSMC3;186852)具有 42% 的序列同一性,后者在体外结合 Tat 并在体内抑制 Tat 介导的反式激活(Nelbock 等人,1990)。涩谷等人(1992)发现 Tat 激活 HIV 的水平与 MSS1 mRNA 的内源性水平相关。此外,他们提供了证据表明 MSS1 的表达增强了 Tat 介导的反式激活。1.5-kb MSS1 cDNA 编码 433 个氨基酸的蛋白质。
为了表征 26S 蛋白酶体的成分,Dubiel 等人(1993)对亚基 7(S7) 进行了肽序列分析。他们确定 S7 与 MSS1 相同。通过 SDS-PAGE,S7 的分子量为 49 kD。
通过对大鼠组织的蛋白质印迹分析,Yanagi 等人(2000)发现 PSMC2 的表达水平在组织之间有所不同,但无处不在。这与蛋白酶体 20S 核心的 30-kD 组分的表达模式形成对比,后者在所有组织中显示出相似的表达水平。HeLa 和 HepG2 细胞中蛋白酶体亚基的免疫定位显示蛋白酶体定位在细胞核内,而 PSMC2 的免疫定位使细胞质和核质均染色。通过甘油梯度沉降,Yanagi 等人(2000)发现 PSMC2 从与蛋白酶体和密度较轻的蛋白质复合物相关的大鼠肝核提取物中纯化,它也以单体形式存在。他们还发现了几种 RNA 聚合酶 II 的基础转录因子,包括 TATA 框结合蛋白(TBP; 600075 ),以及一般转录因子 IIB(GFT2B; 189963 )、IIH(见 GTF2H1; 189972 ) 和 IIF(见 GTF2F1 ; 189968 ) 与来自大鼠肝脏溶酶体的 PSMC2 共免疫沉淀,表明 PSMC2 具有双重功能。
▼ 测绘
田桥等(1998)通过荧光原位杂交将 PSMC2 基因定位到 7q22.1-q22.3